Hematologia PNG. Choroba Markiafava-Mikeli (napadowa nocna hemoglobinuria)

Posiadacze patentu RU 2574968:

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie diagnostyki laboratoryjnej, i może być stosowany do diagnozowania napadowej nocnej hemoglobinurii. W tym celu należy zabarwić badaną próbkę krwi przeciwciałami monoklonalnymi CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). Obecność klonu PNH wśród erytrocytów i retikulocytów ocenia się na podstawie braku ochronnego białka CD59 na błonie retikulocytów izolowanych przez bramę CD235a, marker pan-erytrocytów i receptor transferyny CD71. Aby ocenić klon PNH wśród retikulocytów w bramce CD71 +, zbiera się co najmniej 20000 zdarzeń, w zależności od bramki CD71 +, wykreślany jest wykres FSC (log) vs SSC (log), na którym izoluje się retikulocyty przy użyciu dodatkowego CD71str bramki, w ten sposób oczyszczając populację retikulocytów z gruzu i dubletów przy użyciu metody bramkowania sekwencyjnego. W przypadku obecności 100% pozytywnych wyników dla retikulocytów CD59 ocenia się brak klonu PNH i rozpoznaje się brak napadowej nocnej hemoglobinurii. Po wykryciu u pacjenta z objawy kliniczne ujemne retikulocyty CD59 i wartość uzyskanych wskaźników powyżej 1% dają wniosek diagnostyczny o obecności klonu PNH, a dla potwierdzenia rozpoznania napadowej nocnej hemoglobinurii zaleca się dodatkowe badanie zgodnie z międzynarodowym standardowym protokołem. W przypadku wykrycia negatywnego dla retikulocytów CD59 i wartości uzyskanych wskaźników na poziomie 0,1-1% ocenia się obecność pomniejszego klonu PNH i zaleca się ponowne oznaczenie klonu PNH po 6 miesiącach ze względu na wzrost jego wartości i rozwój napadowej nocnej hemoglobinurii i po potwierdzeniu tej wielkości klonu rozpoznaje się subkliniczną postać napadowej nocnej hemoglobinurii bez objawy kliniczne... Zastosowanie wieloczynnikowego bramkowania komórek CD71 + umożliwia wykluczenie z analizy szczątków, dubletów i niespecyficznie związanych przeciwciał monoklonalnych. 1 chory.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie klinicznych i laboratoryjnych metod diagnostycznych, i może być stosowany do przesiewowej diagnostyki napadowej nocnej hemoglobinurii (PNH).

Napadowy nocna hemoglobinuria odnosi się do rzadkie choroby.

PNH jest wynikiem mutacji w genie PIG-A. W efekcie dochodzi do zakłócenia syntezy kotwicy glikozylofosfatydyloinozytolu (GPI), która wiąże liczne cząsteczki na błonie komórek krwi (w tym CD24 na granulocytach, CD14 na monocytach, CD59 na erytrocytach i ich prekursorach), które chronią komórki krwi przed system uzupełniania.

Błona erytrocytów jest najbardziej narażona na błony atakującego kompleksu, a przy braku ochronnego białka CD59 erytrocyty ulegają hemolizie.

PNH charakteryzuje się hemolizą wewnątrznaczyniową, anemią, hemoglobinurią, powikłaniami zakrzepowymi, dysfagią, letargiem, zaburzeniami erekcji, przewlekłą niewydolnością nerek, nadciśnieniem płucnym.

Ponadto klon PNH może występować w niedokrwistości aplastycznej, autoimmunologicznej niedokrwistości hemolitycznej i zespole mielodysplastycznym. Mediana wieku występowania PNH wynosi 30–35 lat. Częstość występowania napadowej nocnej hemoglobinurii wynosi od 1 do 10: 1 miliona osób. Śmiertelność bez leczenia napadowej nocnej hemoglobinurii wynosi około 35% w ciągu 5 lat od początku choroby.

Obecnie pojawiły się technologie komórkowe, które umożliwiły rozwój nowoczesne metody leczeniu tej choroby.

W związku z tym konieczne stało się stworzenie dokładnych metod diagnostycznych. Skuteczność i adekwatność leczenia zależy od informatywności, obiektywizmu i dowodów zastosowanych środków diagnostycznych oraz kompletności otrzymanych informacji, co umożliwia ocenę obecności klonu PNH i wyjaśnienie diagnozy.

Znana metoda wykrywania PNH metodą Hem w diagnostyce napadowej nocnej hemoglobinurii (Abdulkadyrov KM, Clinical Hematology, Handbook - St.Petersburg: Peter, 2006, s. 82), oparta na stymulacji inaktywacji układu dopełniacza jako wynikiem zakwaszenia próbki krwi i zwiększonej wrażliwości na niego erytrocytów pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią. Wynik testu Hema jest oceniany wizualnie.

Metoda polega na tym, że do surowicy krwi dawcy dodaje się 0,2 normalnego roztworu HCl, co jest porównywalne z surowicą pacjenta w układzie antygenów ABO, jego pH w surowicy zmieni się do 6,4, co powoduje aktywację dopełniacza ( stosunek surowicy do kwasu wynosi 9: jeden). Następnie dziesięć objętości zakwaszonej surowicy miesza się z jedną objętością 50% zawiesiny przemytych erytrocytów. Następnie dokonaj wizualnej oceny powstałego zawieszenia. W przypadku napadowej nocnej hemoglobinurii dochodzi do hemolizy erytrocytów i zawiesina staje się czerwonawa lub czerwona, podczas gdy normalne erytrocyty nie hemolizują w tych samych warunkach.

Jednak technika nie ma wystarczającej czułości do wykrywania mniejszych klonów PNH: minimalna wykrywalna wielkość klonów wynosi 4,2–5%. Metoda Hem nie dostarcza informacji o wielkości klonu.

To wszystko nie pozwala na oszacowanie klonu PNH w procentach, co w przypadku wykrycia choroby podczas badań przesiewowych jest punktem wyjścia do późniejszego monitorowania i odpowiedniego leczenia.

Ponadto technika jest bardzo pracochłonna i nie spełnia współczesnych wymagań diagnostycznych.

Znana jest również metoda diagnozowania napadowej nocnej hemoglobinurii za pomocą testu sacharozowego („Problems of Hematology and Blood Transfusion”, 1972, sierpień, 17 (8) 55-7, „Ocena testu sacharozy do diagnozowania napadowej nocnej hemoglobinurii”, Idelson LI, Benisovich V.I., Savina L.S., Radzhivilovskaya E.G.).

Metoda opiera się na zwiększonej wrażliwości erytrocytów pacjenta z napadową nocną hemoglobinurią na białka układu dopełniacza, w tym przypadku z powodu dodatku sacharozy.

Do erytrocytów pacjenta dodaje się świeżą surowicę dawcy, identyczną w grupie krwi pacjenta. Erytrocyty przemywa się trzykrotnie roztworem fizjologicznym (0,145 M NaCl), 100 μl cytrynianowanej lub odwłóknionej krwi dodaje się do 900 ml roztworu sacharozy i inkubuje przez 30 minut w 37 ° C lub 23 ° C. Następnie probówki odwirowuje się, a supernatant ocenia się pod kątem widocznej hemolizy. Jeśli wystąpi hemoliza, jej stopień wyrażony w procentach oblicza się ze stężenia hemoglobiny w supernatancie, które określa się metodą cyjanomethemoglobiny.

Próbki krwi pełnej miesza się w stosunku 9: 1 z 3,2% roztworem cytrynianu sodu lub 0,1 M roztworem szczawianu i całą krew defibrynuje się przez dodanie 4 mm szklanej kulki na 2 ml krwi. Podwielokrotności pełnej krwi i osocza bez płytek krwi miesza się w różnych proporcjach. Izotoniczny roztwór sacharozy przygotowuje się przez rozpuszczenie 0,27 mola specjalnego odczynnika sacharozy w 91 ml 50 mM NaH 2 PO 4 i 9 ml NaHPO 4. W razie potrzeby pH doprowadza się do 6,1 małymi stężeniami NaOH. Końcową objętość napełnia się 1000 ml wody.

Probówki odwirowuje się, a supernatant ocenia pod kątem widocznej hemolizy. Procent hemolizy jest wartością obliczoną, obliczoną na podstawie stężenia hemoglobiny w supernatancie, określonego metodą cyjanmethemoglobiny. Do oceny próbki przygotowano również dwie inne porcje, 100% hemolizę i „zerową” hemolizę (bez erytrocytów).

Wadą tej metody jest brak czułości i swoistości w diagnostyce choroby: minimalna wykrywalna wielkość klonu - 4,2-5% nie daje dokładnego wyobrażenia o wielkości klonu, natomiast może występować u pacjenta krew przy niższych wartościach - poniżej 4,2%. Wady tej metody można również przypisać jej złożoności.

Znana jest również metoda diagnostyki klonu PNH (Rosse WF. Zmienności krwinek czerwonych w napadowej nocnej hemoglobinurii. Br J Haematol 1973; 24: 327-42. 12), obejmująca pomiar i analizę stopnia hemoliza przy różnych stężeniach dopełniacza. Analiza ta pokazuje, że komórki PNH ulegają lizie przy niższych stężeniach niż normalne komórki.

Za pomocą tego testu określa się populacje komórek ze średnią wrażliwością na białka układu dopełniacza (typ II) między prawidłowymi erytrocytami (typ I) a nieprawidłowymi erytrocytami w napadowej nocnej hemoglobinurii (typ III). Jednak metoda jest pracochłonna i trudna do standaryzacji. Podczas korzystania z testu można przeoczyć małe populacje nieprawidłowych komórek.

Znana jest metoda izolowania retikulocytów zgodnie z CD71 do oznaczania klonu PNH metodą cytometrii przepływowej wśród retikulocytów i granulocytów (Tsagarakis NJ, Paterakis G. Asimple flow cytometric assay for rutynowe napadowe nocne badanie hemoglobinurii na podstawie niedojrzałych retikulocytów i granulocytów.2012-07 259-263) (http: //onlinelibrary.wiley.coni/doi/10.1002/cyto.b.21030/full).

Bada się pełną krew pacjenta, którą rozcieńcza się w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem 1: 100. Do dwóch probówek dodaje się 50 μl rozcieńczonej krwi, następnie wykonuje się barwienie: w pierwszej probówce 10 μl przeciwciał monoklonalnych (MCA) przeciwko CD71 i 20 μl MCA przeciwko CD59; Do drugiej probówki dodaje się 10 μl kontroli izotypowej IgGl. Ocena wyników odbywa się na histogramach jednoparametrowych.

Ponadto metoda ta analizuje również granulocyty przy użyciu kombinacji MCA: 1) CD59-FITC / CD24-PE / CD45-PE-Cy5 /; 2) CD66b-FITC / CD16-PE / CD45-PE-Cy5.

Według tej metody czułość oznaczania klonu PNH wśród granulocytów wynosi 1%, czułość oznaczania klonu PNH wśród retikulocytów wynosi 5%. Zaproponowana metoda została jednak przetestowana na niewielkiej liczbie pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią (n \u003d 8) iz klonem PNH mniejszym niż 1% (przy ocenie na granulocytach i odpowiednio poniżej 5% przy ocenie na retikulocytach) ( n \u003d 7). Również czułość oznaczenia klonu na retikulocytach (5%) nie pozwala na zastosowanie techniki do jednoczesnej oceny klonu wśród granulocytów i retikulocytów. Jednocześnie wśród próbek krwi pacjentów z podejrzeniem PNH nie było ani jednego klonu o wielkości 1–24%, co nie daje pełnego obrazu korelacji wartości w tym zakresie. Przy takim podejściu bramkowanie retikulocytów jest trudne ze względu na brak markera pan-erytrocytów (CD235a) w panelu, co jest szczególnie konieczne do izolacji czystej populacji i odcinania szczątków i dubletów. Ponadto do obiektywnej oceny klonu PNH niezbędna jest ocena dziesiątek tysięcy komórek. Jeden test według proponowanej metody zużywa dużą liczbę przeciwciał. Całkowita liczba zebranych zdarzeń bramkowych (według CD71) (2000 zdarzeń) może nie wystarczyć do wykrycia klonu.

Tak więc znaną metodę przetestowano na niewielkiej liczbie pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią i klonem PNH, komórki niespecyficznie związane z MCA do CD71 najprawdopodobniej zniekształcą wyniki analizy. Ponadto do tej analizy wykorzystuje się 6 typów przeciwciał monoklonalnych, 2 z nich są używane dwukrotnie, co znajduje odzwierciedlenie w wysokim koszcie zastosowanego panelu MCA. Metodę przetestowano na 8 pacjentach z PNH, 7 z nich miało klon poniżej progu czułości (1% dla granulocytów, 5% dla retikulocytów). Ta metoda nie rozwiązuje problemu niezawodnego wykrywania pomniejszych klonów PNH i nie jest dowodem na wysoką czułość metody.

Jako najbliższy analog istnieje znana metoda diagnozowania napadowej nocnej hemoglobinurii za pomocą cytometrii przepływowej, zaproponowana przez Międzynarodowe Stowarzyszenie Cytometrii Klinicznej (ICCS). (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Wytyczne dotyczące diagnozy i monitorowania napadowej nocnej hemoglobinurii oraz zaburzeń pokrewnych za pomocą cytometrii przepływowej, online: 28 kwietnia 2010 DOI: 10.1002 / cyto.b.20525).

Metoda obejmuje badanie obecności białek związanych z GPI na granulocytach, monocytach i erytrocytach. Badanie składa się z dwóch etapów: przygotowania próbki i późniejszej analizy na cytometrze przepływowym.

Do analizy erytrocytów krew pełną rozcieńcza się PBS w stosunku 1: 100, 10 μl pełnej krwi dodaje się do 990 μl soli fizjologicznej buforowanej fosforanem; Następnie 40 μl powstałej zawiesiny komórek dodaje się do znakowanej probówki. W celu wybarwienia erytrocytów do zawiesiny komórek dodaje się przeciwciała monoklonalne sprzężone z fluorochromami PE odpowiednio znakowanymi CD235FITC i CD59. Po inkubacji z przeciwciałami monoklonalnymi przez 30 minut w ciemności próbki przemywa się z niezwiązanych przeciwciał monoklonalnych. W celu analizy erytrocytów dwukrotnie przepłukuje się próbkę, odwirowując próbkę w 4 ml buforu fosforanowo-solnego przy 1500 około 5 minut, następnie pobiera się supernatant, komórki ponownie zawiesza, dodaje 500 μl buforu fosforanowo-solnego w celu dalszego analiza.

Aby zebrać i przeanalizować erytrocyty w cytometrze przepływowym za pomocą oprogramowania urządzenia, buduje się wykresy:

Plot-FS (log) vs (versus) SS (log), na którym izolowana jest populacja czerwonych krwinek (tworzy bramę RBC), a resztki, płytki krwi i agregaty krwinek czerwonych są eliminowane;

CD235a (log) vs FS (log) wykreśla zdarzenia z bramki RBC, aby wyraźniej podkreślić populację krwinek CD235a dodatnich, utworzyć nową bramkę (CD235a +)

CD59 (log) vs CD235a (histogram przedstawia zdarzenia bramkowane przez CD235a +). Histogram odzwierciedla poziom ekspresji CD59 na erytrocytach. Komórki bez niedoboru CD59 - typ I to normalne erytrocyty, komórki z częściowym niedoborem ekspresji CD59 - klon PNH typu II, komórki bez ekspresji CD59, czyli erytrocyty z całkowitym niedoborem CD59 to klon PNH typu III.

Zgodnie z metodologią zbiera się co najmniej 50 000 zdarzeń cytometrycznych.

Aby przygotować się do analizy granulocytów i monocytów, dodaj 100 μl krwi obwodowej do dwóch oznakowanych probówek. Ponadto, do barwienia znakowanymi przeciwciałami monoklonalnymi, dodaj do każdej probówki własną kombinację znakowanych przeciwciał monoklonalnych:

kombinacja wyznakowanych przeciwciał monoklonalnych w celu określenia klonu PNH wśród granulocytów FLAER (AlexaFluor700) / CD15 (PE) / CD24 (PerCP) / CD45 (PE-Cy7) (markery bramkowania: CD45 i CD15, GPI - powiązane markery FLAER i CD24) ;

kombinację znakowanych przeciwciał monoklonalnych w celu określenia klonu PNH wśród monocytów FLAER (AlexaFluor700) / CD14PE / CD64PerCP / CD45PE-Cy7, gdzie markerami bramkowania są CD45 i CD64, GPI to powiązane markery FLAER i CD14;

Zabarwione próbki są inkubowane przez 30 minut w temperatura pokojowa w ciemności, po czym do próbki dodaje się 1 ml roztworu do lizy w celu pozbycia się erytrocytów. Po inkubacji z roztworem do lizy próbki odwirowuje się przez 5 min przy 1500 obr / min, po odwirowaniu supernatant odsącza się i leukocyty na dnie probówki ponownie zawiesza. Następnie próbki wypłukuje się z roztworu do lizy przez dodanie do próbki 2 ml buforu fosforanowo-solnego, a następnie odwirowanie przez 5 minut przy 1500 obr./min. Po odwirowaniu supernatant zdekantowano, komórki ponownie zawieszono, a następnie dodano 500 μl soli fizjologicznej buforowanej fosforanem do dalszej analizy.

Do analizy i zbierania granulocytów i monocytów na cytometrze przepływowym przy użyciu oprogramowania przyrządu, buduje się następujące wykresy:

Na wykresie CD45 (log) vs SS, obszary limfocytów CD45 + LY (komórki obszaru o wysokiej ekspresji CD45, niskie wartości SS), monocyty CD45 + MON (komórki o powierzchni ekspresja CD45, wyższe wartości SS) i granulocyty CD45 + GRAN (obszary komórkowe o niskiej ekspresji CD45, wysokie wartości SS).

Aby przeanalizować klon PNH wśród granulocytów, wykreślono wykres CD 15 (log) względem SS w zależności od bramki (CD45 + GRAN). Przy użyciu bramki CD15 + izoluje się populację granulocytów bez szczątków i komórek, które nie związały się z przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko CD15;

Histogram FLAER (log) vs CD24 (log) (wykreślony względem bramki CD15 +. Ten wykres przedstawia bramkę PNH GRAN, która wychwytuje strefę negatywną pod względem ekspresji CD24 i FLAER. Brak tych markerów na granulocytach wskazuje, że komórki należą do klonu PNH.

Aby ocenić klon PNH wśród monocytów, wykreślono wykres -CD64 (log) vs SS względem bramki CD45 MON. Na tym wykresie pozytywne zdarzenia C064 są ograniczone do bramki CD64 + MON. W zależności od bramki CD64 + MON wykreślany jest wykres -FLAER (log) vs CD14 (log) (w zależności od wybranej populacji monocytów CD64 + - bramka). Na tym wykresie budowana jest bramka PNH MON, obejmująca strefę ujemną dla ekspresji CD14 i FLAER. Brak tych markerów na monocytach wskazuje, że komórki należą do klonu PNH.

Wartość klonu PNH to odsetek komórek (granulocytów, monocytów, erytrocytów), wśród których nie ma białek kotwiczących związanych z GPI.

Badanie klonu PNH zgodnie z protokołem międzynarodowym jest „złotym standardem” w diagnostyce PNH. Jednak badania są kosztowne i czasochłonne. Przygotowanie i analiza tą metodą trwa co najmniej 2,5-3 godziny.

W związku z tym, że PNH jest chorobą rzadką, według różnych źródeł dotyka od 1 do 10 osób na 1 milion populacji, większość pacjentów kierowanych do diagnostyki klonowej PNH nie będzie miała PNH. W konsekwencji pracochłonna i kosztowna analiza według protokołu międzynarodowego jest nieodpowiednia dla pacjentów bez PNH i wystarczy odpowiedzieć na pytanie, czy klon PNH jest obecny, czy nie. Koszt znakowanych przeciwciał monoklonalnych zaczyna się od 500 USD za jedną sztukę pełny zestaw przeciwciał i odczynników do diagnostyki PNH według międzynarodowego podejścia będzie kosztował od 5000 USD. Biorąc pod uwagę krótki okres trwałości niektórych wymaganych odczynników, nawet w mieście liczącym 1 milion osób, jednym zestawem rocznie można przebadać odpowiednio od 10 do 100 pacjentów, koszt jednego badania może sięgać nawet $ 500.

Celem wynalazku jest stworzenie dokładnej, czułej i opartej na dowodach metody diagnostyki laboratoryjnej napadowej nocnej hemoglobinurii, która jest łatwa do wykonania, niedroga i umożliwia skriningową napadową nocną hemoglobinurię przy minimalnych kosztach materiałowych.

Istota wynalazku polega na tym, że w metodzie diagnostyki laboratoryjnej napadowej nocnej hemoglobinurii, w tym barwienia krwi pełnej pacjenta przeciwciałami monoklonalnymi w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem, inkubacji, przemywaniu krwinek z niezwiązanych przeciwciał monoklonalnych metodą wirowania, resuspensji gotowa próbka lub późniejsza ocena wielkości klonu jej brak w programie cytometru przepływowego z powodu braku lub obecności białek ochronnych, trójkolorowa kombinacja przeciwciał monoklonalnych CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) , który jest dodawany do probówki z próbką, obecność klonu PNH wśród erytrocytów i retikulocytów ocenia się na podstawie braku ochronnego białka CD59 na błonie retikulocytów izolowanych przez bramkę CD235a - marker pan-erytrocytów i receptor transferyny CD71 ; aby ocenić klon PNH wśród retikulocytów w bramce CD71 +, zbiera się co najmniej 20000 zdarzeń, w zależności od bramki CD71 + wykres FSC (log) vs SSC (log), na którym izoluje się retikulocyty za pomocą dodatkowej bramki CD71str, oczyszczając w ten sposób populację retikulocytów z gruzu i dubletów metodą bramkowania sekwencyjnego, porównuje się otrzymane wartości wskaźników z kryteriami normy iw obecności 100% dodatnich retikulocytów CD59 ocenia się, że nie mają klonu PNH i rozpoznaje się brak napadowej nocnej hemoglobinurii. W przypadku wykrycia pacjenta z klinicznymi objawami ujemnych retikulocytów CD59 i wartości uzyskanych wskaźników powyżej 1%, wysuwają wnioski diagnostyczne o obecności klonu PNH i potwierdzają rozpoznanie napadowej nocnej hemoglobinurii, dodatkowe badanie jest zalecany zgodnie z międzynarodowym standardowym protokołem, w przypadku wykrycia ujemnego wyniku dla retikulocytów CD59 i wartości. Uzyskane wskaźniki 0,1-1% pozwalają ocenić obecność drobnego klonu PNH i zalecają ponowne oznaczenie klonu PNH po 6 miesiącach w celu zwiększenia jej wartość i rozwój napadowej nocnej hemoglobinurii; po potwierdzeniu tej wielkości klonu rozpoznaje się subkliniczną postać napadowej nocnej hemoglobinurii bez objawów klinicznych ...

Zastosowanie wynalazku umożliwia uzyskanie następującego wyniku technicznego.

Proponowana metoda wykrywania klonu PNH charakteryzuje się wysoką niezawodnością, dokładnością i czułością - 0,1%, porównywalną do międzynarodowej znormalizowanej metody i jest oparta na dowodach.

Pozwala na określenie obecności klonów PNH zarówno znacznej wielkości u pacjentów z prawdziwą napadową nocną hemoglobinurią, jak i mniejszych - od 0,01 do 1%, u pacjentów z niedokrwistością aplastyczną i zespołem mielodysplastycznym.

Metoda jest prostsza w realizacji, nie wymaga dużych kosztów materiałowych w porównaniu z międzynarodową metodą znormalizowaną.

Technologia oznaczania klonu PNH umożliwia wykorzystanie minimalnej liczby (trzech) przeciwciał monoklonalnych w badaniach przesiewowych PNH (CD235a, CD71, CD59).

Do badania krwi jednego pacjenta używana jest tylko jedna probówka, co również upraszcza i przyspiesza analizę.

Czas poświęcony na jeden test to 40-50 minut. Zastosowanie mniejszej ilości przeciwciał bez użycia roztworów lizy sprawia, że \u200b\u200btest jest tańszy o około 75% na test. Jednocześnie zachowana jest wysoka czułość i dokładność diagnostyczna.

W większości przypadków metoda pozwala uniknąć dodatkowych kosztów związanych ze stosowaniem większej ilości przeciwciał, ponieważ ze względu na rzadkie występowanie choroby wynik jest często ujemny. Technika dobrze nadaje się do badań przesiewowych pacjentów i jest dostępna dla placówek medycznych o różnych profilach, a także dla wszystkich kategorii obywateli.

Końcowy wynik analizy w proponowanej metodzie przedstawiono w postaci odsetka erytrocytów i retikulocytów z defektem białek GPI, czyli klonu PNH. Technika pozwala określić zwiększone ryzyko powstania skrzepliny na podstawie odsetka zidentyfikowanych klonów PNH.

Zaproponowana metoda jest korzystniejsza w porównaniu z niektórymi innymi znanymi metodami - test Hema, test sacharozy, mierzący stopień hemolizy przy różnych stężeniach białek układu dopełniacza.

Wynik techniczny osiągnięto dzięki opracowanej przez autorów nowej technologii oznaczania klonu PNH w napadowej nocnej hemoglobinurii z wykorzystaniem cytometrii przepływowej, której algorytm przewiduje oznaczanie tego klonu na retikulocytach i erytrocytach (w przeciwieństwie do standardowego określanego na neutrofilach, monocytach i erytrocytach). W tym przypadku autorzy po raz pierwszy stosują kombinację przeciwciał CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). Zgodnie z proponowaną metodą, na czas analizy danych stosuje się dodatkową procedurę wieloparametrowego bramkowania komórek CD71 + i wykluczenia z analizy szczątków, dubletów i unieszkodliwienia niespecyficznie związanych przeciwciał monoklonalnych.

Kluczowym punktem jest badanie retikulocytów, które według opracowanej przez autorów technologii są izolowane przy użyciu przeciwciał przeciwko CD71 i badane przy użyciu kombinacji trzech przeciwciał monoklonalnych CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) wybrane przez autorów. Klon PNH wśród retikulocytów odzwierciedla prawdziwą wartość klonu PNH; autorzy porównali uzyskane klony PNH wśród retikulocytów z wartościami uzyskanymi przy zastosowaniu standardowego międzynarodowego podejścia do diagnostyki PNH. Korelacja objętości retikulocytów PNH-dodatnich z monocytami wynosi 0,95, a granulocytów - 0,93. Zgodnie z proponowaną metodą odsetek erytrocytów PNH-dodatnich mierzy się z większą czułością w porównaniu z międzynarodowym podejściem standardowym, ponieważ proponowaną metodą bada się co najmniej 1 000 000 erytrocytów, a według ICCS tylko 500 000.

Po raz pierwszy klon PNH badano na retikulocytach przy użyciu kombinacji przeciwciał monoklonalnych CD235a / CD71 / CD59, co umożliwiło oszacowanie wielkości tego klonu z czułością 100%.

W rezultacie stało się możliwe badanie przesiewowe PNH przy użyciu trzech przeciwciał monoklonalnych. Zastosowanie dodatkowego etapu izolacji retikulocytów i „odcięcia” komórek niespecyficznie związanych z przeciwciałami monoklonalnymi (na wykresie FS vs SS, ryc.) Podać dokładny wynik, który na podstawie badań przesiewowych pozwala potwierdzić rozpoznanie PNH i przeprowadzić skuteczne odpowiednie leczenie.

Metodę przeprowadza się w następujący sposób.

Do badania pobiera się krew żylną pacjenta do probówki z antykoagulantem K 2 EDTA. Probówka dostarczana jest do laboratorium z gabinetu zabiegowego placówki medyczno-profilaktycznej (LPI).

Do analizy erytrocytów i retikulocytów krew pełną rozcieńcza się w oddzielnej probówce polistyrenowej. W celu rozcieńczenia solanką buforowaną fosforanem w stosunku 1:10, 50 μl pełnej krwi dodaje się do 450 μl soli fizjologicznej buforowanej fosforanem i dokładnie miesza przez 5 sekund na worteksie, a następnie wprowadza się 40 μl powstałej zawiesiny komórek do oznaczonej probówki.

Do barwienia próbki stosuje się trójkolorową kombinację przeciwciał monoklonalnych - CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). Barwienie przeprowadza się przez dodanie do próbki kolejno 3 μl wyznakowanych przeciwciał monoklonalnych, po czym probówkę wytrząsa się przez 5 sekund na worteksie. Następnie inkubację prowadzi się przez 15 minut w ciemności w temperaturze pokojowej.

Następnie krwinki przemywa się dwukrotnie 4 ml soli fizjologicznej buforowanej fosforanem w trybie wirowania przez 5 minut z częstotliwością 1500 obrotów na minutę. Po każdym wirowaniu ostrożnie zebrać supernatant pipetą, tak aby komórki pozostały na dnie probówki.

Przygotowaną próbkę ponownie zawiesza się na 5 sekund na worteksie i dodaje 750 μl soli fizjologicznej buforowanej fosforanem, po czym próbka jest gotowa do analizy w cytometrze przepływowym.

Następnie wyniki są oceniane i zapisywane za pomocą wielokolorowej cytometrii przepływowej. Analizę można przeprowadzić na dowolnym cytometrze przepływowym wyposażonym w detektory co najmniej trzech kanałów fluorescencyjnych.

Pomiary przeprowadza się na cytometrze przepływowym BD FACSCanto ™ II Becton-Dickinson (USA).

Ocenę obecności lub nieobecności klonu PNH na erytrocytach i retikulocytach, a także wielkość klonu PNH przeprowadza się na cytometrze przepływowym przy użyciu specjalnego oprogramowania.

Aby ocenić klon PNH wśród erytrocytów i retikulocytów, wykreślono wykres - FSC (log) vs SSC (log), stosując ograniczenie logiczne, wyodrębnia się obszar erytrocytów, z wyłączeniem szczątków i dubletów (ryc. 1a).

Bramka CD235a + jest następnie konstruowana na wykresie FSC (log) vs CD235a (fig. 1b), ograniczając w ten sposób komórki dodatnie i wykluczając zdarzenia, które nie są specyficznie związane z CD235a (szczątki i komórki inne niż CD235a +).

Zdarzenia zawarte w bramce CD235a + są analizowane na wykresie CD71 vs FSC (log) (Ryc. 1e), a populacja CD71 pozytywna jest na nim zaznaczona.

W celu obiektywnej oceny klonu PNH wśród retikulocytów, w bramce CD71 + zbiera się co najmniej 20000 zdarzeń.

W zależności od bramki CD71 + wykreślany jest wykres FSC (log) vs SSC (log) (ryc. 1f), w którym retikulocyty są izolowane przy użyciu dodatkowej bramki CD71str, a tym samym populacja jest ostatecznie oczyszczana z resztek i dubletów przez sekwencyjne metoda bramkowania.

Następnie wykreślono wykres CD235a względem CD59 (ryc. 1g) względem bramki CD71str (wyizolowane retikulocyty). Na tym wykresie rozróżnia się dwa obszary Norm ° Ret i PNH ° Ret (ryc. 1g), są to odpowiednio granice retikulocytów normalnych i PNH-dodatnich. Statystyki są wyrażone w wartościach bezwzględnych i% bramki (fig. 1d i 1h).

Protokoły gromadzenia danych są konfigurowane raz, później wymagane są jedynie drobne poprawki.

Bramka CD235a + na pierwszym etapie zbierania danych jest bramką zatrzymującą, tj. gromadzi 1000000 wydarzeń. Bramkę CD235a + zastosowano do wykresu CD235a względem CD59 (ryc. 1c). Jeśli nie ma więcej niż 10 zdarzeń w regionach PNH typu II i PNH typu III na wykresie CD235a względem CD59, gromadzenie danych zostaje zatrzymane i wyciąga się wniosek, że klon PNH jest nieobecny.

Wobec większej łącznej liczby wydarzeń w tych regionach, badania są kontynuowane.

Klon PNH wśród retikulocytów to odsetek retikulocytów pozbawionych ochronnego białka CD59.

W przypadku obecności w 100% pozytywnych wyników retikulocytów CD59 ocenia się brak klonu PNH i rozpoznaje się brak napadowej nocnej hemoglobinurii.

W przypadku zidentyfikowania pacjenta z klinicznymi objawami ujemnych retikulocytów CD59 i wartości uzyskanych wskaźników powyżej 1%, wysuwają oni wniosek liagnostyczny o obecności klonu PNH i potwierdzają rozpoznanie napadowej nocnej hemoglobinurii, dodatkowe badanie jest zalecany zgodnie z międzynarodowym standardowym protokołem (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Guidelines for the diagnostyka i monitorowanie napadowej nocnej hemoglobinurii i zaburzeń pokrewnych metodą cytometrii przepływowej).

Jeżeli nie wykryto negatywnych retikulocytów CD59, a wartość uzyskanych wskaźników wynosi 0,1-1%, ocenia się obecność pomniejszego klonu PNH. W takim przypadku zaleca się ponowne oznaczenie klonu PNH po 6 miesiącach w celu zwiększenia jego wartości i rozwinięcia napadowej nocnej hemoglobinurii.

Kiedy wielkość klonu zostanie potwierdzona cytometrią przepływową zgodnie z protokołem międzynarodowym, rozpoznaje się subkliniczną postać napadowej nocnej hemoglobinurii bez objawów klinicznych lub klon PNH współistniejący z AA i MDS jest oceniany po postawieniu odpowiedniego rozpoznania zgodnie z zaleceniami Międzynarodowego Grupa Interesowa PNH (I-PIG).

Metoda przeszła badania kliniczne w Zakładzie Klinicznej Diagnostyki Laboratoryjnej Rosyjskiej Akademii Medycznej Kształcenia Podyplomowego. Przebadaliśmy 572 pacjentów skierowanych z różnych placówek służby zdrowia ze wstępną diagnozą lub podejrzeniem napadowej nocnej hemoglobinurii (PNH), anemii aplastycznej (AA), zespołu mielodysplastycznego (MPS), autoimmunologicznej niedokrwistości hemolitycznej (AIHA) w wieku od 12 do 82 lat.

Wszystkich pacjentów poddano diagnostyce zgodnie z proponowaną metodą metodą wielokolorowej cytometrii przepływowej, a także według międzynarodowego standardowego podejścia.

Brak ochronnego białka CD59 na błonie retikulocytów izolowanych przez CD235a (marker pan-erytrocytów) i CD71 (receptor dla transferyny) i dodatkowo oczyszczonych metodą bramkowania sekwencyjnego według parametrów rozpraszania światła FS / SS; PNH metoda klonowania granulocytów i monocytów, mierzona zgodnie z międzynarodowym standardowym podejściem.

W badaniu wzięło udział 572 osoby w wieku od 15 do 64 lat, w tym 248 mężczyzn i 324 kobiety. Spośród 572 badanych klon PNH stwierdzono u 175 pacjentów, wartości wahały się od 0,1% do 99,7% (mediana 41,6%). Wśród nich 78 to mężczyźni, a 97 to kobiety. Wszyscy pacjenci zostali poddani równoległym badaniom klonu PNH zgodnie z międzynarodowym standardowym podejściem i proponowaną metodą. Korelacja między liczbą klonów PNH wśród retikulocytów i granulocytów wyniosła 0,93, wśród retikulocytów i monocytów odpowiednio 0,95. Czułość metody wynosiła 98,9%, swoistość 99,8%, a ogólna dokładność 99,7%.

Zasadniczo, w niedokrwistości aplastycznej i zespole mielodysplastycznym liczba klonów PNH jest mniejsza niż 1%. Zgodnie z zaleceniami klony tej wielkości należy badać dynamicznie z częstotliwością 1 raz na 6 miesięcy. Wraz ze wzrostem wielkości klonów i odpowiadającymi im objawami klinicznymi mówimy o postawieniu diagnozy PNH.

Przykład. Pacjent M., lat 34, znajdował się pod opieką hematologa. Po wystąpieniu ostrych wirusowych infekcji dróg oddechowych nastąpił wzrost osłabienia, żółtaczki, ciemnienie moczu.

Chory został przyjęty na oddział lekarsko-profilaktyczny (LPU) z dolegliwościami osłabienia i ciemnienia moczu.

Planowane badanie przeprowadzono w ambulatorium placówki medycznej. W obiektywnym badaniu stwierdzono żółtaczkę skóry i widoczne błony śluzowe. Chory został przyjęty na oddział hematologii z dolegliwościami w postaci osłabienia ogólnego, złego samopoczucia, duszności, tachykardii, ciemnego moczu, obniżonej hemoglobiny i liczby erytrocytów.

Probówka z próbką krwi obwodowej stabilizowanej K 2 EDTA została wysłana do Zakładu Klinicznej Diagnostyki Laboratoryjnej Rosyjskiej Akademii Medycznej Kształcenia Podyplomowego w Centrum Referencyjnym PNH w celu identyfikacji klonu PNH metodą cytometrii przepływowej. Analizę klonu PNH wśród granulocytów, monocytów i erytrocytów wykonano zgodnie z protokołem międzynarodowym, a badanie klonu PNH zaproponowaną metodą na erytrocytach i retikulocytach.

W tym samym czasie badano klon PNH zgodnie z protokołem międzynarodowym i według zaproponowanej metody (powtarzając poprzednie zdanie!). Zgodnie z protokołem międzynarodowym próbkę wybarwiono w celu identyfikacji klonu PNH wśród granulocytów, monocytów i erytrocytów oraz zgodnie z metodą zaproponowaną przez autorów w celu identyfikacji klonu PNH wśród erytrocytów i retikulocytów. Zgodnie z proponowaną metodą próbkę wybarwiono przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC), dodając je naprzemiennie do 40 μl krwi pełnej rozcieńczonej w stosunku 1:10.

Po inkubacji przez 15 minut w ciemności, komórki przemywano dwukrotnie 4 ml solanki buforowanej fosforanem w trybie wirowania przez 5 minut z częstotliwością 1500 obrotów na minutę.

Po każdym wirowaniu pobierano supernatant, podczas gdy komórki pozostawały na dnie probówki.

Przygotowaną próbkę ponownie zawieszono na 5 sekund na worteksie i dodano 750 µl PBS.

W przypadku badania erytrocytów i retikulocytów, obszar erytrocytów z wyłączeniem szczątków i dubletów zaznaczono na wykresie FSC (log) vs SSC (log).

Na wykresie FSC (log) vs CD235a zaznaczono następnie komórki CD235a - dodatnie, z wyłączeniem szczątków i komórek innych niż CD235a +, które niespecyficznie wiążą przeciwciała monoklonalne anty-CD235a. Zdarzenia zawarte w bramce CD235a + analizowano na wykresie CD71 vs FSC (log) i zidentyfikowano populację CD71 pozytywną.

W celu obiektywnej oceny klonu PNH wśród retikulocytów zebrano co najmniej 20 000 zdarzeń w bramce CD71 +.

W zależności od bramki CD71 + wykreślono FSC (log) vs SSC (log). Następnie na tym wykresie populację retikulocytów wyizolowano przy użyciu dodatkowej bramki CD71str, którą w ten sposób oczyszczono z gruzu i dubletów metodą bramkowania sekwencyjnego.

Dalej, na wykresie CD235a vs CD59, w zależności od bramki CD71str (izolowane retikulocyty), retikulocyty oceniano pod kątem obecności białka CD59 związanego z GPI na błonach retikulocytów, odpowiednio, komórkach PNH-dodatnich i PNH-ujemnych. Statystyki podano jako wartości bezwzględne i% bramki.

Po izolacji retikulocytów metodą CD71 i późniejszym oczyszczeniu z gruzu, komórki populacji CD59 stanowiły 97,6%. W ten sposób za pomocą proponowanej metody znaleziono klon PNH.

Badanie przeprowadzone zgodnie z międzynarodowym protokołem wykrywania PNH potwierdziło, że klon PNH jest obecny na granulocytach, monocytach i erytrocytach w ilości odpowiednio 99,2%, 97,6% i 71,0%, co wskazuje na powtarzalność wyników proponowanych i standardowe metody. Badanie to było podstawą rozpoznania napadowej nocnej hemoglobinurii.

Badania kliniczne wykazały, że proponowana metoda charakteryzuje się wysoką niezawodnością, dokładnością i czułością (0,1% klon PNH), pozwala na określenie obecności zarówno wysokich wartości klonów u pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią, jak i mniejszych (od 0,1% do 0,1%). %) u pacjentów z niedokrwistością aplastyczną, zespołem mielodysplastycznym. Proponowana technika jest łatwa do wykonania, nie wymaga dużych kosztów materiałowych, jeden test trwa 40-50 minut.

Technika dobrze nadaje się do badań przesiewowych pacjentów i jest dostępna dla placówek medycznych o różnych profilach, a także dla wszystkich kategorii obywateli.

Metoda diagnostyki laboratoryjnej napadowej nocnej hemoglobinurii, w tym barwienie krwi pełnej pacjenta przeciwciałami monoklonalnymi w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem, inkubacja, przemywanie krwinek z niezwiązanych przeciwciał monoklonalnych poprzez wirowanie, ponowne zawieszenie gotowej próbki i późniejsza ocena wielkości klonu lub jego brak w programie cytometru przepływowego lub obecność białek ochronnych, charakteryzujących się tym, że dodana do probówki trójkolorowa kombinacja przeciwciał monoklonalnych CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) jest stosowany do barwienia badanej próbki krwi, obecność klonu PNH wśród erytrocytów i retikulocytów ocenia się na podstawie braku ochronnego białka CD59 na błonie retikulocytów izolowanych przez bramę CD235a - marker pan-erytrocytów i CD71 - receptor transferyny aby ocenić klon PNH wśród retikulocytów w bramce CD71 +, zbiera się co najmniej 20000 zdarzeń, w zależności od bramki CD71 +, wykreślany jest wykres FSC (log) vs SSC (log), na którym retikulocyty są izolowane za pomocą dodatkowej bramki CD71str, oczyszczając w ten sposób populację retikulocytów z gruzu i dubletów metodą bramkowania sekwencyjnego, uzyskane wartości porównuje się z normalnymi kryteriami, aw obecności 100% retikulocytów CD59 dodatnich ocenia się brak PNH -klonuje i diagnozuje brak choroby napadowej nocnej hemoglobinurii, jeśli wykryto pacjenta z klinicznymi objawami ujemnych retikulocytów CD59 i wartość uzyskanych wskaźników jest większa niż 1% dają wnioski diagnostyczne o obecności klonu PNH oraz w celu potwierdzenia rozpoznania napadowej nocnej hemoglobinurii, zaleca się dodatkowe badanie zgodnie z międzynarodowym standardowym protokołem, w przypadku wykrycia ujemnych retikulocytów CD59 i wartości uzyskanych wskaźników 0,1-1%, ocenia się obecność pomniejszego klonu PNH i zaleca się ponowne określenie klonu PNH po 6 miesiącach w celu zwiększenia jego wartości i rozwoju napadowego hemoglobinuria śródścienna, po potwierdzeniu wielkości klonu rozpoznaje się subkliniczną postać napadowej nocnej hemoglobinurii bez objawów klinicznych.

Podobne patenty:

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie okulistyki, i może być stosowany do diagnostyki dziedzicznej neuropatia nerwu wzrokowego (NIE). W tym celu przeprowadza się badania kliniczne i cytologiczne, a dodatkowo ze skóry pacjenta uzyskuje się hodowlę fibroblastów o gęstości 5000-10000 komórek na cm2, zabarwionych mitochondrialnym barwnikiem fluorescencyjnym TMRE zależnym od napięcia do końcowego stężenia 25 nM.

Wynalazek dotyczy medycyny i opisuje odczynnik chemiluminescencyjny do oznaczania obecności i / lub ilości analitu w próbce o oczekiwanej zawartości analitu, przy czym odczynnik jest nierozpuszczalny i rozpuszczalny w środowisku wodnym i zawiera partnera wiążącego dla analitu i kompozycji chemiluminescencyjnej zawierającej związek olefinowy i chelat metalu, przy czym związek olefinowy jest związkiem zdolnym do reagowania z dodatkiem tlenu singletowego 2 + 2 z wytworzeniem dioksetanu lub zdolnym do reagowania z tlenem singletowym z 4+ 2 cykloaddycja z dienami i gdzie metal lub chelat metalu jest metalem ziem rzadkich lub metalem z grupy VIII i gdzie metal jest skoordynowany z dwoma lub więcej atomami tej samej cząsteczki lub czynnika chelatującego, gdzie dwa lub więcej atomów jest wybranych z grupa składająca się z tlenu, azotu i siarki.

Grupa wynalazków dotyczy medycyny, a mianowicie immunologii i może służyć do określania skuteczności leczenia raka ex vivo. W tym celu po podaniu pacjentowi jednej lub więcej dawek kompozycji immunogennej, mierzy się poziom aktywowanych limfocytów T (CD3 + CD69 +) w organizmie.

Wynalazek dotyczy dziedziny biotechnologii i może być stosowany do określania ludzkiego genotypu przez polimorfizm metaloproteinazy macierzy genowej MMP9-1562 C\u003e T (rs3918242).

Wynalazek dotyczy sposobu określania aktywności biologicznej jaj zarodkowych Trichuris. Scharakteryzowana metoda obejmuje wykonanie co najmniej 3 analiz wybranych spośród: - oceny i / lub potwierdzenia stadium rozwoju embrionalnego jaj metodą ilościowego PCR z wykorzystaniem odpowiednich sekwencji markerowych do określenia liczby kopii genomowego DNA, - oceny aktywności metabolicznej jaja zarodkowe metodami biochemicznymi i / lub biologicznymi molekularnymi, - ocena indukowalności ekspresji genów w jajach zarodkowych, - ocena ruchliwości larw Trichurs przy użyciu mikroskopu przez dłuższe okresy obserwacji po preinkubacji w podwyższonych temperaturach i / lub - ocena wylęgu wskaźnik larw Trichuris u zwierzęcia laboratoryjnego ...

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie kardiologii, i może być stosowany do przewidywania ryzyka śmiertelności sercowo-naczyniowej u pacjentów z przewlekłą niewydolnością serca po zawale serca, w połączeniu z cukrzyca 2 rodzaje.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie onkologii i biochemii klinicznej. Istota metody polega na tym, że utrwalone komórki krwi obwodowej są traktowane przeciwciałami pierwotnymi przeciwko białku wiążącemu estrogen, które specyficznie oddziałują z antygenami na powierzchni segmentowanych granulocytów, a następnie do powstałego antygenu dodaje się wtórne przeciwgatunkowe przeciwciała znakowane fluorescencyjnie. - kompleks przeciwciał, aw obecności zabarwienia powierzchni segmentowanych granulocytów rozpoznaje się granulocyty złośliwe nowotwory, a przy braku zabarwienia powierzchni segmentowanych granulocytów rozpoznaje się łagodne nowotwory.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie onkologii, i może być stosowany do przewidywania rozwoju hematogennych przerzutów po skojarzonym leczeniu raka nerki.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie położnictwa i ginekologii, i może być stosowany do przewidywania wewnątrzmacicznego opóźnienia wzrostu płodu. W tym celu we krwi żylnej kobiety we wczesnej ciąży określa się względną zawartość limfocytów CD3 + CD16 + 56 +, poziom składnika C3 dopełniacza i rozpuszczalnego receptora czynnika martwicy nowotworu (sTNF-R).

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie gastroenterologii, i może być stosowany do diagnostyki ropnej pozakrotycznej rzekomej torbieli trzustki. W tym celu aktywność fagocytów określa się we krwi pacjenta na podstawie poziomu ekspresji CD 14 + / HLA-DR + za pomocą cytometrii przepływowej i statystycznej analizy ROC. Jeśli zawartość CD14 + / HLA-DR + jest poniżej 85%, rozpoznaje się ropną pozakrotyczną torbiel rzekomą trzustki. Zastosowanie tej metody pozwala na zdiagnozowanie ropnej pozakrotycznej torbieli rzekomej trzustki, co pozwala na ustalenie taktyki postępowania z takimi pacjentami i dokonanie wyboru interwencji chirurgicznej. 2 np. 1 stół

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie hematologii onkologicznej i może być stosowany do przewidywania rozwoju przeżycia bez nawrotów u pacjentów ze szpiczakiem mnogim po autologicznym przeszczepie krwiotwórczych komórek macierzystych. Celem wynalazku jest uproszczenie metody przewidywania przeżycia wolnego od choroby u pacjentów ze szpiczakiem mnogim po ATHSC. Metoda przewidywania przeżycia wolnego od nawrotów u chorych na szpiczaka mnogiego po autologicznej transplantacji hematopoetycznych komórek macierzystych (ATHSC) obejmuje cytometrię przepływową i ocenę względnej zawartości jednej z populacji limfocytów na podstawie jej wartości progowej. W proponowanej metodzie po zabiegu aferezy, przed przeszczepem, określa się względną liczbę komórek B CD45 + CD19 + w produkcie aferezy pacjenta, a jeśli zawartość komórek B CD45 + CD19 + jest większa niż 2,5%, Przewiduje się okres przeżycia wolnego od nawrotu po ATHSC, a przy zawartości komórek B CD45 + CD19 + poniżej 2,5% przewiduje dłuższe przeżycie wolne od choroby po ATHSC. 1 chory.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie immunologii, i może być stosowany do oceny reakcji transformacji blastycznej limfocytów. W tym celu brucelina jest używana do specyficznej aktywacji limfocytów. Wykrywanie blastycznych form limfocytów przeprowadza się za pomocą przeciwciał monoklonalnych przeciwko CD34, a następnie zlicza się komórki za pomocą cytometrii przepływowej. Zastosowanie tej metody umożliwia rejestrację limfocytów aktywowanych bruceliną w RBTL przy użyciu przeciwciał monoklonalnych CD34 u pacjentów z brucelozą i zdrowych dawców. 1 karta.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie immunologii, i może być stosowany do oznaczania przeciwciał przeciwko allogenicznemu HLA-G w surowicy krwi. W tym celu stosuje się test dopasowania krzyżowego komórek jednojądrzastych dawcy z surowicą biorcy. Subpopulacje komórek jednojądrzastych analizuje się metodą cytofluorometrii przepływowej pod kątem wiązania przeciwciał monoklonalnych HLA-G, a stopień ekspresji HLA-G ocenia się na eksperymentalnych i kontrolnych komórkach jednojądrzastych dawcy. Jednocześnie istotne są subpopulacje CD3-HLA-G + i CD3 + HLA-G +, zgodnie z którymi współczynnik tłumienia (CP) w układzie doświadczalnym oblicza się w stosunku do kontrolnej według wzoru: CP HLA-G \u003d (HLA - G О П - HLA - G K ON T) HLA - GK ON T × 100, gdzie HLA-Gon to całkowita względna liczba subpopulacji wyrażających HLA-G: (CD3-HLA-G ++ CD3 + HLA-G +) w warunkach eksperymentalnych,%; HLA-Gcont to całkowita względna liczba subpopulacji wyrażających HLA-G: (CD3-HLA-G ++ CD3 + HLA-G +) w układzie kontrolnym,%. W tym przypadku obecność uczulenia na allogeniczne HLA-G jest diagnozowana z ujemną wartością CPHLA-G. Zastosowanie tej metody pozwala na wykrycie allogenicznego uczulenia na HLA-G za pomocą cytometrii przepływowej, określając subpopulacje CD3-HLA-G + i CD3 + HLA-G +. 3 przykł., 3 rys., 2 tabl.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie położnictwa i ginekologii, i może być stosowany do przewidywania nawrotu groźnego poronienia. W tym celu przeprowadza się badanie immunologiczne krwi żylnej obwodowej w 7-12 tygodniu ciąży u kobiet zagrożonych poronieniem. Po leczeniu groźby przerwania ciąży określa się względną zawartość CD45RA-CD62L- w populacji limfocytów CD8 +. Jeśli jego wartość przekracza 23,9%, przewidują wystąpienie groźnego poronienia w drugim trymestrze ciąży u kobiet z poronieniami nawracającymi w wywiadzie. Zastosowanie tej metody pozwala przewidzieć nawrót groźnego poronienia w drugim trymestrze ciąży, co pozwoli na dobranie odpowiedniej taktyki postępowania z kobietą w ciąży i zmniejszenie częstości występowania tego powikłania. 1 tabl., 4 np

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie transfuzjologii, i może być stosowany do kontrolowania skuteczności napromieniania krwi dawcy. Metoda polega na stopniowaniu reakcji blastotransformacji krwinek z mitogenem fitohemaglutyniną i uwzględnieniu wyników tej reakcji poprzez określenie wskaźnika stymulacji limfocytów. Reakcję przeprowadza się w odniesieniu do napromieniowanej krwi dawcy, wyniki rejestruje się za pomocą cytometru przepływowego z użyciem przeciwciał monoklonalnych znakowanych różnymi fluorochromami, bramkując aktywowane limfocyty ze zmniejszoną ekspresją ogólnego markera leukocytów CD45 i określając wśród nich procent podwójnie ujemnego T -limfocyty z immunofenotypem CD3 CD4-CD8-, podczas gdy nienaświetlona próbka tej samej krwi jest pobierana jako kontrola. Następnie o skuteczności napromieniania decyduje stosunek zawartości podwójnie ujemnych limfocytów T do immunofenotypu CD3 + CD4-CD8- w badanej napromienionej i tej samej nienapromieniowanej krwi kontrolnej co Eob \u003d Cdntlo-Sdntlk, gdzie Eob to efektywność napromieniania, Cdntlo to odsetek podwójnie ujemnych limfocytów T z immunofenotypem CD3 + CD4-CD8- w eksperymencie (w badanej napromieniowanej krwi), Sdntlk - procent zawartości podwójnie ujemnego T- limfocyty z immunofenotypem CD3 + CD4-CD8- w kontroli (w nienaświetlonej próbce tej samej krwi). Jeżeli różnica w porównaniu z kontrolą jest większa niż 50%, wyciąga się wniosek o funkcjonalnej niższości limfocytów T w napromieniowanej krwi oraz o bezpieczeństwie immunologicznym tego preparatu krwiopochodnego dla biorcy. Zastosowanie tej metody umożliwia określenie skuteczności napromieniania krwi dawcy metodą cytometrii przepływowej.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie położnictwa i ginekologii, i umożliwia przewidywanie groźnego późnego poronienia u kobiet w ciąży. W tym celu w okresie 5-12 tygodni ciąży określa się względną liczbę ciążowych monocytów CD178 + we krwi żylnej obwodowej. Jeśli jego wartość w bramce monocytów wynosi 37,7% lub mniej, przewiduje się groźne późne poronienie u kobiet zagrożonych przerwaniem ciąży wczesne daty i historia nawracających poronień. Stosowanie tej metody pozwala na dobór prawidłowej taktyki postępowania w ciąży, prowadzenie kompleksu działań terapeutyczno-profilaktycznych oraz zmniejszenie ryzyka powikłań i niekorzystnych wyników ciąży w grupie kobiet z dużym ryzykiem poronienia. 3 np. 1 stół

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie położnictwa, i dotyczy wyboru taktyki postępowania z kobietami w ciąży z niewydolnością łożyska i zespołem opóźnienia wzrostu płodu (FGRS). W tym celu u pacjentów z niewydolnością płodowo-łożyskową i IGR w surowicy krwi do oznaczenia aktywności dysmutazy ponadtlenkowej, zawartości łożyskowego czynnika wzrostu, endogliny i melatoniny stosuje się enzymatyczny test immunologiczny. Dla tych wskaźników współczynnik predykcyjny P oblicza się za pomocą wzoru: P \u003d (0,0001 * COD + 0,0255 * Mel + 0,1636 * CD105 + (- 0,0487 * PGF) -8,5389, gdzie COD to dysmutaza ponadtlenkowa, pg / ml, Mel - melatonina, pg / ml, CD 105 - endoglin, pg / ml, PGF - łożyskowy czynnik wzrostu, pg / ml Przy wartości P 0,64 lub więcej istnieje wysokie ryzyko wystąpienia krytycznego stanu płodu w okresie przedporodowym przewidywane, co wymaga chirurgicznego zakończenia ciąży cesarskie cięcie w nagłych przypadkach w interesie płodu. Metoda zapewnia zwiększenie dokładności przewidywania krytycznego stanu płodu przed urodzeniem, co pozwala na terminowy dobór odpowiedniej taktyki postępowania z pacjentem. 2 np.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie otolaryngologii, i może być stosowany do różnicowej ekspresowej diagnostyki ostrego wirusowego i bakteryjnego zapalenia migdałków u dorosłych. W tym celu pobiera się krew obwodową i określa względną zawartość subpopulacji granulocytów obojętnochłonnych, jednocześnie wyrażających CD16, CD11b na błonie powierzchniowej. Obecność subpopulacji CD16brightCD11bdimNG% od 80 do 99,9% z wysoką gęstością ekspresji CD16 i niską gęstością ekspresji CD11b jest uważana za normalną. Jeśli subpopulacja CD16brightCD11bbrightNG lub CD16dimCD11bbrightNG zostanie wykryta w ilości 40% lub więcej, ostra infekcja wirusowa lub ostra infekcja bakteryjna... Korzystanie z tej metody pozwala zapewnić dokładność diagnostyka różnicowa ostre wirusowe i bakteryjne zapalenie migdałków u dorosłych. 3 np. 1 stół

Grupa wynalazków dotyczy medycyny, a mianowicie diagnostyki laboratoryjnej i może służyć do jednoczesnego wykrywania przedstawicieli warunkowych grup taksonomicznych drobnoustrojów chorobotwórczych dla ludzi i zwierząt. Charakteryzuje się zastosowaniem co najmniej pięciu immunochromatograficznych testów paskowych umieszczonych w jednym budynku. Jednocześnie w pierwszym i drugim kanale korpusu urządzenia znajdują się testy paskowe do wykrywania toksyn, w trzecim kanale paskowy do wykrywania form wegetatywnych bakterii, w czwartym - do form przetrwalnikowych bakterii oraz w piąty kanał - test paskowy do identyfikacji pożywki hodowlanej do hodowli wirusów i riketsji. Badanie przeprowadza się poprzez umieszczenie korpusu testów paskowych immunochromatograficznych w termoizolacyjnym worku ceflenowym, składającym się z dwóch warstw ceflenu, z uszczelką termoizolacyjną wykonaną z porowatego materiału termoizolacyjnego pomiędzy nimi oraz korpusem testów paskowych immunochromatograficznych wnętrze worka ogrzewane jest stałym źródłem ciepła, a otwarcie worka zamykane jest mechanicznym zaciskiem i moment ten traktujemy jako początek badania. Zaproponowano również urządzenie do analizy immunochromatograficznej. EFEKT: grupa wynalazków pozwala na zwiększenie produktywności analizy immunochromatograficznej, rozszerzenie zakresu temperatur analizy immunochromatograficznej od minus 20 do plus 50 ° C, skrócenie czasu uzyskania wyniku do 10 min w porównaniu z analizą w temperaturze pokojowej ( 20 min), pod warunkiem osiągnięcia tej samej czułości, w celu zwiększenia czułości analizy w porównaniu z analizą przeprowadzaną w temperaturze pokojowej. 2 n. i 7 p.p. f-kryształy, 5 rys., 4 tabl., 8 przykł.

Wynalazek dotyczy medycyny, a mianowicie diagnostyki laboratoryjnej, i może być stosowany do diagnozowania napadowej nocnej hemoglobinurii. W tym celu należy zabarwić badaną próbkę krwi przeciwciałami monoklonalnymi CD235a CD59CD71. Obecność klonu PNH wśród erytrocytów i retikulocytów ocenia się na podstawie braku ochronnego białka CD59 na błonie retikulocytów izolowanych przez bramkę CD235a - marker pan-erytrocytów i receptor CD71 - transferyny. Aby ocenić klon PNH wśród retikulocytów w bramce CD71 +, zbiera się co najmniej 20000 zdarzeń, w zależności od bramki CD71 +, wykreślany jest wykres FSC vs SSC, na którym izoluje się retikulocyty za pomocą dodatkowej bramki CD71str, usuwając w ten sposób retikulocyty populacja z gruzu i dubletów metodą bramkowania sekwencyjnego. W obecności 100 retikulocytów CD59 pozytywnych ocenia się brak klonu PNH i rozpoznaje się brak napadowej nocnej hemoglobinurii. W przypadku wykrycia pacjenta z klinicznymi objawami ujemnych retikulocytów CD59 i wartości uzyskanych wskaźników powyżej 1, wyciągany jest wniosek diagnostyczny o obecności klonu PNH i zalecane jest dodatkowe badanie zgodnie z międzynarodowym standardowym protokołem w celu potwierdzenia rozpoznanie napadowej nocnej hemoglobinurii. W przypadku wykrycia negatywnego dla retikulocytów CD59 i wartości uzyskanych wskaźników 0,1-1 ocenia się obecność pomniejszego klonu PNH i zaleca się ponowne oznaczenie klonu PNH po 6 miesiącach ze względu na wzrost jego wartości i rozwój napadowa nocna hemoglobinuria, a po potwierdzeniu takiej wielkości klonu diagnozuje subkliniczną postać napadowej nocnej hemoglobinurii bez objawów klinicznych. Zastosowanie bramkowania wieloparametrowego komórek CD71 + umożliwia wykluczenie z analizy szczątków, dubletów i niespecyficznie związanych przeciwciał monoklonalnych. 1 chory.

Napadowa nocna hemoglobinuria (PNH) jest chorobą nabytą objawiającą się trwałą niedokrwistością hemolityczną, napadową lub uporczywą hemoglobinurią oraz hemolizą wewnątrznaczyniową. Rzadkość tego typu niedokrwistości hemolitycznej charakteryzuje się tym, że na PNH choruje 1 osoba na pół miliona, głównie młodzież.

Przyczyny choroby nie są obecnie znane. Przypuszcza się, że występuje z powodu pojawienia się nieprawidłowego klonu krwinek czerwonych, skłonnego do hemolizy wewnątrznaczyniowej. Z kolei niższość erytrocytów jest konsekwencją defektów strukturalnych i biochemicznych w ich błonie. Wiadomo, że w uszkodzonej błonie aktywowana jest peroksydacja lipidów, co przyczynia się do szybkiej lizy erytrocytów, ponadto w proces patologiczny biorą udział nieprawidłowe klony granulocytów i płytek krwi. Główną rolę w powstawaniu powikłań zakrzepowych PNH odgrywa wewnątrznaczyniowa destrukcja erytrocytów i inicjacja krzepnięcia krwi przez uwalniane w tym przypadku czynniki. PNH z reguły rozpoczyna się stopniowo i przebiega chronicznie wraz z okresowymi kryzysami. Kryzysy prowokują infekcje wirusowe, zabiegi chirurgiczne, stres psycho-emocjonalny, miesiączka, używanie liczby leki i produkty spożywcze.

Objawy napadowej nocnej hemoglobinurii

Objawy PNH podczas kryzysu:

• ból napadowy w jama brzuszna;
• ból w okolicy lędźwiowej;
• żółtaczka skóra i twardówkę; hipertermia; blada twarz;
• czarne zabarwienie moczu, głównie w nocy;
• gwałtowny spadek ciśnienia krwi;
• przejściowe powiększenie śledziony;
• ustanie wypływu moczu.

W niektórych przypadkach kryzys hemolityczny kończy się śmiercią.

Objawy PNH poza kryzysem:

• ogólna słabość;
• blady, z żółtawym odcieniem, kolor skóry;
• niedokrwistość;
• skłonność do tworzenia skrzepów; krwiomocz; wzrosła ciśnienie tętnicze; powiększona wątroba; duszność; kołatanie serca; częste choroby zakaźne.

Diagnostyka

• Badanie krwi: anemia (normochromiczna, później hipochromiczna), umiarkowana leukocyto- i trombocytopenia, poziom żelaza w surowicy jest znacznie obniżony.
• Badanie moczu: zabarwienie na czarno, hemoglobinuria, hemosyderuria, białkomocz. Wynik testu benzydyny Gregersena w moczu jest dodatni.
• Specyficzny test Ham jest pozytywny.
• Specyficzny test Hartmanna jest pozytywny.
• Interpunkcja szpik kostny: przerost czerwonej linii krwiotwórczej, ale w ciężkich przypadkach można również zaobserwować niedorozwój szpiku kostnego, zwiększenie ilości tkanki tłuszczowej w szpiku kostnym.

Leczenie napadowej nocnej hemoglobinurii

Leczenie PNH ma charakter objawowy i polega głównie na przetoczeniach zastępczych krwi, których objętość i częstotliwość zależą od „odpowiedzi” na te zabiegi. W leczeniu PNH metandrostenolon stosuje się w dawce 30-50 mg / dobę przez co najmniej 2-3 miesiące. Walkę z hipoplazją szpiku kostnego prowadzi się przez dożylne stosowanie immunoglobuliny antytymocytarnej w dawce 150 mg / dobę przez 4 do 10 dni. Zaleca się przyjmowanie preparatów żelaza per os w małych dawkach. Czasami dobry efekt podawać duże dawki kortykosteroidów. Wskazaniem do przeszczepu jest hipoplazja szpiku kostnego z rozwojem powikłań zakrzepowych. Opisano pojedyncze przypadki wyzdrowienia z PNH, w niektórych przypadkach korzystny przebieg choroby trwa kilka dziesięcioleci.

Podstawowe leki

Istnieją przeciwwskazania. Wymagana konsultacja specjalistyczna.

RCHD (Republikańskie Centrum Rozwoju Opieki Zdrowotnej Ministerstwa Zdrowia Republiki Kazachstanu)
Wersja: Protokoły kliniczne MH RK - 2015

Napadowa nocna hemoglobinuria [markaafava-mikeli] (D59.5)

Onkohematologia

informacje ogólne

Krótki opis

Zalecana
Rada Ekspertów
RSE on REM „Republican Center”
rozwój zdrowia ”
Ministerstwo Zdrowia
i rozwój społeczny
Republika Kazachstanu
z dnia 9 lipca 2015 r
Protokół nr 6

Klasyfikacja

Klasyfikacja kliniczna:

Istnieją 3 główne formy APG.
1. Klasyczna formacharakteryzujący się klinicznymi i laboratoryjnymi objawami hemolizy wewnątrznaczyniowej bez objawów innych chorób związanych z niewydolnością szpiku kostnego (niedokrwistość aplastyczna (AA), zespół mielodysplastyczny (MDS), idiopatyczne włóknienie szpiku).
2. PNH rozpoznany u chorych na AA (AA / PNG),MDS (MDS / APG)i niezwykle rzadko z mielofibrosis (idiopatyczna mielofibroza / PNH),gdy choroby te mają kliniczne i / lub laboratoryjne objawy hemolizy wewnątrznaczyniowej, a klon komórek z fenotypem PNH zostanie określony we krwi obwodowej.
3. Postać subklinicznachoroby ( AA / cPNG, MDS / cPNG, idiopatyczna mielofibroza / cPNG), zdiagnozowana u pacjentów bez klinicznych i laboratoryjnych objawów hemolizy, ale w obecności niewielkiego klonu komórek z fenotypem PNH (zwykle<1 %). Следует отметить, что субклиническое течение ПНГ может отмечаться и при большем размере клона.

Izolacja subklinicznej postaci PNH nie ma niezależnego znaczenia klinicznego, ale konieczne jest zapewnienie monitorowania takich pacjentów w związku z prawdopodobieństwem wzrostu liczebności klonów i progresji hemolizy, która może dominować wśród objawów klinicznych i wymagać odpowiedniego leczenia.
Biorąc pod uwagę, że subkliniczna postać PNH w AA i / lub MDS nie ma niezależnego znaczenia klinicznego.

Klasyczna forma APG.
U pacjentów z klasyczną PNH z reguły występuje wyraźna hemoliza wewnątrznaczyniowa ze wzrostem poziomu dehydrogenazy mleczanowej (LDH) w surowicy krwi, retikulocytozą i spadkiem poziomu haptoglobiny. W przypadku tego wariantu PNH nie ma ostatecznych morfologicznych objawów innych patologii szpiku kostnego (AA, MDS, mielofibrosis), a nieprawidłowości kariotypu nie są charakterystyczne

PNH na tle zespołów niewydolności szpiku kostnego (AA / PNH, MDS / PNH).
U pacjentów z AA / PNH i MDS / PNH rozpoznaje się kliniczne i laboratoryjne objawy hemolizy wewnątrznaczyniowej. Na różnych etapach rozwoju choroby mogą przeważać objawy niewydolności szpiku kostnego lub hemolizy wewnątrznaczyniowej, aw niektórych przypadkach występuje połączenie obu. Mimo, że u pacjentów z małym klonem PNH choroba przebiega zwykle z minimalnymi objawami i obserwuje się jedynie laboratoryjne oznaki hemolizy wewnątrznaczyniowej, konieczna jest kontrola (2 razy w roku). Wynika to z faktu, że z czasem ekspansja klonu jest możliwa wraz z rozwojem ciężkiej hemolizy i wysokim ryzykiem powikłań zakrzepowych.

Subkliniczna postać APG (AA / sPNG, MDS / sPNG).
Pacjenci z subklinicznym PNH nie mają żadnych klinicznych ani laboratoryjnych dowodów hemolizy. Małe populacje komórek z niedoborem GPIAP można wykryć tylko za pomocą cytometrii przepływowej o wysokiej czułości. Podkliniczne PNH można rozpoznać na tle chorób charakteryzujących się dysfunkcją szpiku kostnego, głównie AA i MDS. Bardzo ważne jest uważne monitorowanie tych pacjentów w celu wykrycia objawów hemolizy i ekspansji klonów, ponieważ 15-17% pacjentów z AA / subklinicznym PNH z czasem rozwija się hemolityczna postać AA / PNH.

Diagnostyka

Lista podstawowych i dodatkowych środków diagnostycznych:
Podstawowe (obowiązkowe) badania diagnostyczne wykonywane na poziomie ambulatoryjnym:
Ogólne badanie krwi (liczenie retikulocytów w rozmazie);
· Immunofenotypowanie krwi obwodowej w celu określenia procentu PNH erytrocytów typu I, II i III metodą cytometrii przepływowej;
· Biochemiczne badanie krwi (bilirubina całkowita, bilirubina bezpośrednia, LDH);
· Test Coombsa;
· Mielogram.

Dodatkowe badania diagnostyczne wykonywane na poziomie ambulatoryjnym:



· Oznaczanie stężenia kwasu foliowego i witaminy B12;
· Koagulogram;
· Standardowe badanie cytogenetyczne szpiku kostnego;
· Ogólna analiza moczu
ELISA dla markerów wirusowego zapalenia wątroby;
· ELISA dla markerów HIV;
ELISA dla markerów wirusów opryszczki;
· HLA - typowanie;
EKG;
· USG narządów jamy brzusznej (wątroba, śledziona, trzustka, woreczek żółciowy, węzły chłonne, nerki, u kobiet miednica mała;

Minimalna lista badań, które należy przeprowadzić w przypadku planowanej hospitalizacji:
Ogólne badanie krwi (liczenie leukoformuli, płytek krwi i retikulocytów w rozmazie);
Mielogram;
Grupa krwi i czynnik rezusa
· Biochemiczne badanie krwi (białko całkowite, albumina, bilirubina całkowita, bilirubina bezpośrednia, kreatynina, mocznik, ALaT, ASaT, GGTP, glukoza, LDH, białko C-reaktywne, fosfataza alkaliczna);
· Test Coombsa;
· USG jamy brzusznej i śledziony;
· USG narządów miednicy - dla kobiet.

Podstawowe (obowiązkowe) badania diagnostyczne przeprowadzane na poziomie stacjonarnym:

Ogólne badanie krwi (zliczanie leukoformuli, płytek krwi i retikulocytów w rozmazie);
- immunofenotypowanie krwi obwodowej w celu określenia procentu PNH w erytrocytach typu I, II i III metodą cytometrii przepływowej;
- biochemiczne badanie krwi (bilirubina całkowita, bilirubina bezpośrednia, LDH);
- Test Coombsa
- mielogram.
- standardowe badanie cytogenetyczne szpiku kostnego;
- ELISA dla markerów wirusowego zapalenia wątroby;
- ELISA dla markerów HIV;
- ELISA dla markerów wirusów opryszczki;
· RTG narządów klatki piersiowej.
Dodatkowe badania diagnostyczne wykonywane na poziomie stacjonarnym:
· Oznaczanie poziomu haptoglobiny.
· Grupa krwi i czynnik Rh;
· Biochemiczne badanie krwi (białko całkowite, albumina, bilirubina całkowita, bilirubina bezpośrednia, kreatynina, mocznik, ALaT, ASaT, glukoza, LDH, GGTP, białko C-reaktywne, fosfataza alkaliczna);
· Metabolizm żelaza (oznaczenie poziomu żelaza w surowicy, całkowitej zdolności wiązania żelaza w surowicy i poziomu ferrytyny);
· Oznaczanie stężenia kwasu foliowego i witaminy B12;
· Koagulogram;
· HLA - typowanie;
· Ogólna analiza moczu;
· Oznaczanie poziomu hemosyderyny w moczu;
· Test Reberga-Tareeva (oznaczenie współczynnika filtracji kłębuszkowej);
EKG;
· USG narządów jamy brzusznej (wątroba, śledziona, trzustka, woreczek żółciowy, węzły chłonne, nerki, u kobiet miednica mała;
· Rentgen klatki piersiowej;
· USDG tętnic i żył;
· Echokardiografia;
EGDS (rozszerzenie żył przełyku);
· Codzienne monitorowanie ciśnienia krwi;
· 24-godzinne monitorowanie EKG.

Działania diagnostyczne wykonywane na etapie ratownictwa medycznego:
· Zbieranie skarg i wywiad dotyczący choroby;
· Badanie lekarskie.

Kryteria diagnostyczne diagnozy:

Reklamacje i anamneza:
- słabość;
- szybka męczliwość;


- zwiększone krwawienie.

Anamneza: należy zwrócić uwagę na:
- długoterminowa słabość;
- szybkie zmęczenie;
- częste choroby zakaźne;
- ostre ataki bólu w okolicy lędźwiowej;
- ciemnienie moczu, głównie w nocy i rano;
- zespół Budd-Chiari (zakrzepica żył wątrobowych);
- zakrzepica o różnych lokalizacjach;
- zwiększone krwawienie;
- pojawienie się krwotocznych wysypek na skórze i błonach śluzowych;
- ambulatorium rozliczające AA lub MDS.

Badanie lekarskie[ 8 ]:
- połączenie bladości i zażółcenia skóry;
- wysypki krwotoczne - wybroczyny, wybroczyny o różnych lokalizacjach;
duszność;
- częstoskurcz;
- powiększona wątroba;
- powiększona śledziona.

Badania laboratoryjne:
W przypadku podejrzenia PNH cytometria przepływowa zapewnia dokładną diagnozę. Cytometria przepływowa jest najbardziej czułą i dostarczającą informacji metodą.
· Ogólna analiza krwi:Liczba retikulocytów jest zwykle zwiększona, a zgodnie z rozmazami krwi obwodowej erytrocyty nie różnią się morfologicznie od normy. W wyniku hemolizy we krwi często występują normoblasty, obserwuje się polichromatofilię. W wyniku znacznych strat żelaza w moczu u pacjentów z PNH istnieje duże prawdopodobieństwo wystąpienia niedoboru żelaza, po czym erytrocyty nabierają wyglądu charakterystycznego dla IDA - hipochromicznego z tendencją do mikrocytozy. Liczba leukocytów i płytek krwi jest często zmniejszona. Można również zaobserwować pancytopenię o różnym nasileniu. Jednak w przeciwieństwie do niedokrwistości aplastycznej, retikulocytoza zwykle występuje wraz z cytopenią.
· Chemia krwi:W surowicy krwi zwiększa się ilość bilirubiny, wolnej hemoglobiny i methemoglobiny. Występują oznaki hemolizy wewnątrznaczyniowej, to znaczy zmniejszenie lub brak haptoglobiny, wzrost LDH, podwyższony poziom wolnej hemoglobiny i żelaza w moczu. Niskie poziomy haptoglobiny są konsekwentnie obserwowane podczas hemolizy wewnątrznaczyniowej, ale występują również w przypadkach hemolizy pozanaczyniowej, zwłaszcza hemolizy przewlekłej. Ponieważ haptoglobina jest również odczynnikiem ostrej fazy, jej gwałtowny spadek lub brak jest najbardziej pouczający.
· W moczu:można określić krwiomocz i białkomocz. Hemosiderinuria i wykrycie detrytusu krwi w moczu to trwałe oznaki wartości diagnostycznej.
· Badania morfologiczne:W szpiku kostnym wykrywa się przerost erytrocytów. Często określa się hipoplazję szpiku kostnego, zmniejszoną zawartość syderocytów i syderoblastów.
· Immunofenotypowanie: Wczesnym i wiarygodnym wskaźnikiem fenotypu PNH jest ekspresja białek związanych z GPI: ekspresję CD14 i CD48 określa się na monocytach, CD16 i CD66b - na granulocytach, CD48 i CD52 - na limfocytach, CD55 i CD59 - na erytrocytach, CD55, CD58.

Badania instrumentalne:
· USG narządów jamy brzusznej: wzrost wielkości wątroby, śledziony.
· USG Doppler tętnic i żył:obecność zakrzepicy tętnic i żył
· EKG: naruszenie przewodzenia impulsów w mięśniu sercowym.
· EchoCG:objawy niewydolności serca (EF<60%), снижение сократимости, диастолическая дисфункция, легочная гипертензия, пороки и регургитации клапанов.
· CT / MRI całego ciała:wykrywanie zakrzepicy (mózgowej, wrotnej itp.)
· CT odcinka piersiowego:naciekowe zmiany w tkance płucnej, objawy nadciśnienia płucnego.
· FGDS: żylaki przełyku.
· Spirografia: badanie czynności płuc.

Wskazania do konsultacji wąskich specjalistów:
· Lekarz w zakresie diagnostyki i leczenia wewnątrznaczyniowego - założenie centralnego cewnika żylnego z dostępu obwodowego (PICC);
· Hepatolog - do diagnostyki i leczenia wirusowego zapalenia wątroby;
· Ginekolog - ciąża, krwotok maciczny, krwotok miesiączkowy, konsultacja przy przepisywaniu złożonych doustnych środków antykoncepcyjnych;
Dermatowenerolog - zespół skórny
· Specjalista chorób zakaźnych - podejrzenie zakażeń wirusowych;
· Kardiolog - niekontrolowane nadciśnienie, przewlekła niewydolność serca, zaburzenia rytmu i przewodzenia;
· Ostry incydent naczyniowo-mózgowy neurologa, zapalenie opon mózgowych, zapalenie mózgu, neuroleukemia;
· Neurochirurg - ostre zaburzenia krążenia mózgowego, zespół zwichnięcia;
· Nefrolog (eferentolog) - niewydolność nerek;
· Onkolog - podejrzenie guzów litych;
Otorynolaryngolog - do diagnostyki i leczenia chorób zapalnych zatok przynosowych i ucha środkowego;
Okulista - zaburzenia widzenia, choroby zapalne oka i przydatków;
· Proktolog - szczelina odbytu, paraproctitis;
• psychiatra - psychoza;
· Psycholog - depresja, anoreksja itp.;
· Resuscytator - leczenie ciężkiej posocznicy, wstrząsu septycznego, zespołu ostrego uszkodzenia płuc z zespołem różnicowania i stanów terminalnych, założenie cewników do żyły centralnej.
· Reumatolog - zespół Sweeta;
· Chirurg klatki piersiowej - wysiękowe zapalenie opłucnej, odma opłucnowa, zygomikoza płucna;
· Transfuzjolog - za dobór środków do transfuzji z dodatnim pośrednim testem antyglobulinowym, nieskuteczność transfuzji, ostrą masywną utratę krwi;
Urolog - choroby zakaźne i zapalne układu moczowego;
· Phthisiatrician - podejrzenie gruźlicy;
· Chirurg - powikłania chirurgiczne (zakaźne, krwotoczne);
· Chirurg szczękowo-twarzowy - choroby zakaźne i zapalne układu szczękowo-zębowego.

Diagnostyka różnicowa

Diagnostyka różnicowa.
Diagnozę różnicową przeprowadza się z innymi typami niedokrwistości hemolitycznych oraz z PNH cytopenią i niedokrwistością aplastyczną.

Niedokrwistość z niedoboru B-12.Często istnieje potrzeba diagnostyki różnicowej PNH występującej z pancytopenią i hemolizą, z niedokrwistością z niedoboru witaminy B12 z zespołem hemolitycznym. W obu tych chorobach hemoliza jest dość wyraźna. Różnice między tymi chorobami przedstawiono w tabeli:

Stół. Różnice w diagnostyce różnic między niedokrwistością z niedoboru witaminy B12 a PNH.

Leczenie

Cele leczenia:
Osiągnięcie i utrzymanie remisji (patrz punkt 15 - Wskaźniki skuteczności leczenia).

Taktyka leczenia:
Leczenie nielekowe:
Tryb II:ogólna ochrona.
Dieta:Pacjentom z neutropenią nie zaleca się stosowania określonej diety ( poziom wiarygodności B.).

Leczenie.
Na rycinie przedstawiono ogólny algorytm leczenia pacjentów z PNH w zależności od postaci choroby i nasilenia hemolizy.

Algorytm leczenia pacjentów z PNH.


Terapia eklizumabem.
Ekulizumab jest humanizowanym przeciwciałem monoklonalnym, które wiąże się ze składnikiem dopełniacza C5. Zapobiega to rozszczepieniu C5 na C5a i C5b, hamując w ten sposób tworzenie cytokin prozapalnych (przez C5a) i MAC (przez C5b).
Obecnie istnieje jedno wieloośrodkowe, randomizowane, podwójnie zaślepione, kontrolowane placebo badanie TRIUMPH, w którym oceniano skuteczność ekulizumabu w stabilizowaniu poziomu hemoglobiny i zmniejszaniu zależności od transfuzji u 87 pacjentów z PNH zależnych od transfuzji w ciągu 6 miesięcy leczenia.
Badaniami objęto pacjentów powyżej 18 roku życia, którzy w ciągu ostatniego roku przeszli co najmniej 4 transfuzje pożywek zawierających erytrocyty, z co najmniej 10% klonem erytrocytów typu III PNH, poziomem płytek krwi co najmniej 100 tys. / Μl, ³1,5 normalny. Wszyscy pacjenci otrzymali szczepionkę przeciwko meningokokom przed rozpoczęciem leczenia.
Głównym wynikiem badania była stabilizacja poziomu hemoglobiny u 49% pacjentów otrzymujących ekulizumab (p.<0,001) и снижение необходимости в трансфузиях в этой группе до нуля (в группе плацебо за 6 месяцев потребовалось от 6 до 16 трансфузий), а также улучшение качества жизни.
Wyniki tego badania posłużyły jako podstawa do zatwierdzenia przez FDA stosowania ekulizumabu w PNH zależnych od transfuzji z hemolizą.
Badania R. Hillmen i in. a późniejsze badania prospektywne mają pewne ograniczenia, które utrudniają ekstrapolację ich wyników na wszystkich pacjentów z PNH, które szczegółowo opisano w raporcie FDA i przeglądzie Cochrane autorstwa Arturo J Martí-Carvajala:
· Skuteczność badano tylko u pacjentów w wieku powyżej 18 lat;
· Dane dotyczące pacjentów w podeszłym wieku są również ograniczone (tylko 15 pacjentów objętych badaniem miało powyżej 65 lat);
· W badaniu uczestniczyli tylko pacjenci wymagający transfuzji z hemolizą;
· Mała liczba pacjentów z epizodami zakrzepowymi, duża częstość przepisywania profilaktyki przeciwzakrzepowej nie pozwala na ocenę wpływu ekulizumabu na ryzyko powikłań zakrzepowych i zalecenie zaprzestania stosowania leków przeciwzakrzepowych u pacjentów otrzymujących ekulizumab. Względne zmniejszenie częstości występowania epizodów zakrzepowych na tle profilaktyki przeciwzakrzepowej i terapii ekulizumabem wynosi 81%;
· Zastosowany kwestionariusz dotyczący jakości życia nie został zweryfikowany dla pacjentów z PNH, a poprawa jakości życia mogła być związana jedynie ze wzrostem poziomu hemoglobiny;
· Krótki okres obserwacji;
· Badanie było sponsorowane przez producenta leku;
· Brak danych dotyczących wpływu ekulizumabu w porównaniu z placebo na całkowity czas przeżycia, ryzyko przemiany w AML i MDS. Wzrost całkowitego przeżycia wykazano tylko w jednym historycznie kontrolowanym badaniu (lata 1997-2004). W 2013 roku opublikowano dane z trzech prospektywnych badań z udziałem 195 pacjentów z PNH i hemolizą, które wykazały 97,6% wskaźnik przeżycia po 36 miesiącach, ale nie było porównania z grupą placebo.
· Ograniczone dane dotyczące stosowania ekulizumabu u kobiet w ciąży. Ciąża zwiększa częstość występowania ciężkich, zagrażających życiu powikłań PNH. Istnieje duże prawdopodobieństwo, że ekulizumab przenika przez barierę krew-łożysko i mleko matki. Ze względu na rzadkie występowanie choroby nie ma obecnie kontrolowanych badań skuteczności ekulizumabu u kobiet w ciąży. Opisano dwa przypadki przepisywania ekulizumabu kobietom w ciąży od 4. i 5. tygodnia ciąży, a następnie przebieg ciąży i poród zdrowych dzieci.
· Nawet przy długotrwałym leczeniu trwającym około 30 miesięcy około 18% pacjentów pozostaje uzależnionych od transfuzji. Możliwym wyjaśnieniem tego zjawiska jest udział fragmentu dopełniacza w procesach wewnątrznaczyniowej hemolizy C3, której ekulizumab nie hamuje.

Można zalecić włączenie ekulizumabu do programu leczenia następujących kategorii pacjentów w wieku powyżej 18 lat z klasyczną PNH:
Uzależnienie od transfuzji z powodu przewlekłej hemolizy ( poziom dowodów A.);
Obecność powikłań zakrzepowych ( poziom dowodówre);
Ciąża u pacjentek z PNH ( poziom dowodówre).

Przy ustalaniu wskazań do terapii ekulizumabem nie należy brać pod uwagę jedynie poziomu LDH.

Sposób podawania i dawkowanie ekulizumabu
Lek podaje się dożylnie, kroplówkę, w ciągu 25-45 minut - dla dorosłych.
Przebieg leczenia obejmuje 4-tygodniowy cykl początkowy, po którym następuje cykl podtrzymujący. Początkowy cykl to 600 mg leku raz w tygodniu przez 4 tygodnie. Terapia podtrzymująca - 900 mg w 5 tygodniu, a następnie 900 mg co (14 ± 2) dni.

Hemoliza „przełomowa”.
Standardowy schemat leczenia ekulizumabem jest wystarczający do całkowitego i stabilnego zablokowania hemolizy za pośrednictwem dopełniacza. U niektórych pacjentów z powodu
charakterystyka metabolizmu leku lub infekcje mogą powodować hemolizę „przełomową”. W tej sytuacji oznaki hemolizy pojawiają się po 2-3 dniach.
przed kolejnym podaniem ekulizumabu. Pacjenci mogą rozwinąć hemoglobinurię, powrócić pierwotne objawy (duszność, osłabienie, skurcz mięśni gładkich itp.), Potrzebę transfuzji, wzrost poziomu LDH, retikulocytów i spadek poziomu haptoglobiny. Leczenie hemolizy „przełomowej” polega na skróceniu przerwy między wstrzyknięciami ekulizumabu do 12 dni lub zwiększeniu dawki do 1200 mg o 1-2 wstrzyknięcia.

Zapobieganie i leczenie infekcji meningokokowych.
Podczas leczenia ekulizumabem konieczne jest kontrolowanie pojawiania się objawów infekcji i infekcji bakteryjnych, terminowe przepisywanie antybiotyków. Podczas diagnozowania infekcji meningokokowej kolejne podanie leku zostaje anulowane.
Mechanizm działania leku ekulizumab sugeruje zwiększone ryzyko zakażenia meningokokami ( Neisseria meningitidis) na tle jego wykorzystania (poziom wiarygodności B).
Wszyscy pacjenci muszą zostać zaszczepieni przeciwko meningokokom na 2 tygodnie przed rozpoczęciem leczenia, a także ponowne szczepienie między 2,5-3 rokiem terapii. Najkorzystniejsza jest czterowartościowa skoniugowana szczepionka przeciwko serotypom A, C, Y i W135. Jeżeli konieczne jest pilne leczenie ekulizumabem u niezaszczepionego pacjenta, można rozpocząć terapię odpowiednią profilaktyką antybiotykową, którą należy kontynuować przez 2 tygodnie po szczepieniu przeciwko zakażeniu meningokokami.

Leczenie objawowe.
W leczeniu ekulizumabu leczenie objawowe obejmuje wskazanie kwasu foliowego (5 mg / dobę), witaminy B12 (z niedoborem), preparatów żelaza (z niedoborem), antykoagulantów (warfaryna, heparyna drobnocząsteczkowa) w przypadku powikłań zakrzepowych, przetaczanie produktów krwiopochodnych w zależności od objawów klinicznych, nawodnienie wraz z wystąpieniem kryzysu hemolitycznego. Preparaty żelaza należy przepisywać ostrożnie ze względu na możliwość zwiększonej hemolizy.

Terapia antykoagulacyjna.
Po incydencie zakrzepowym można zalecić długotrwałe (przez całe życie) leczenie lekami przeciwzakrzepowymi (pochodne kumaryny lub heparyny). Leczenie zespołu Budd-Chiari wymaga, aby pacjent przebywał na specjalistycznym oddziale chirurgicznym w celu miejscowej i ogólnoustrojowej trombolizy. Leczenie przeciwzakrzepowe w pierwotnej profilaktyce zakrzepicy może być wskazane w niektórych przypadkach, gdy klon PNH zostanie wykryty w ≥ 50% granulocytów oraz w przypadku dodatkowego ryzyka powikłań zakrzepowych, z wyjątkiem pacjentów z aplazją szpiku kostnego.

Wsparcie transfuzji.
Wskazania do transfuzji składników krwi:

Zawiesina / masa erytrocytów.
· W odniesieniu do zawiesiny / masy erytrocytów konieczna jest selekcja według grupy krwi i czynnika Rh;
· W odniesieniu do pacjentów, u których w historii przebyło wiele transfuzji, zaleca się wybranie następujących antygenów: Kell, Duffy, Kidd, MNS;
• Bezpośrednio przed transfuzją zawiesiny / masy erytrocytów konieczne jest wykonanie testu na zgodność ze standardowymi surowicami;
Wskaźniki progowe, przy których rozważana jest potrzeba przetoczenia zawiesiny / masy erytrocytów: Hb<80 г/мл, Ht <25%;
· Obliczenie maksymalnej objętości zawiesiny / masy erytrocytów jest wyznaczane według następującego wzoru: Hb (g / dl) x4 x waga biorcy (kg).

Koncentrat płytek krwi.
· Koncentrat płytek krwi należy dobrać zgodnie z grupą krwi i czynnikiem Rh;
Transfuzję koncentratu płytek krwi w celu zapobieżenia krwawieniom przeprowadza się na poziomie Tr<10 тыс кл/мкл;
Pacjentom z gorączką, krwawieniem z błon śluzowych zaleca się przetaczanie koncentratu płytek krwi na poziomie Tr<20 тыс кл/мкл;
Planując interwencję inwazyjną u pacjenta, zaleca się przetoczenie koncentratu płytek krwi w Tr<50 тыс кл/мкл;
· Terapeutyczna dawka płytek krwi zalecana dla dorosłych: 3 x 10 11 komórek / lw objętości 200-300 ml.

Ocena skuteczności transfuzji:
· Zatrzymanie krwawienia;
Oznaczenie poziomu płytek krwi następnego dnia - trwały poziom Tr<20 тыс кл/мкл свидетельствует о рефрактерности к трансфузиям;
Jeśli wykluczy się wszystkie przyczyny trombocytopenii, konieczne jest zbadanie obecności przeciwciał przeciw leukocytom;
• W przypadku wykrycia przeciwciał należy wykonać transfuzję płytek krwi od dawcy zgodnego z HLA.

Świeżo mrożone osocze.
Ponieważ FFP zawiera dopełniacz, jego transfuzja może wywołać rozwój hemolizy u pacjentów z PNH. Należy unikać transfuzji FFP w PNH.

Leczenie ambulatoryjne:
- wykaz leków podstawowych ze wskazaniem formy ich uwolnienia (z 100% prawdopodobieństwem zastosowania):

Leki przeciwnowotworowe i immunosupresyjne
... ekulizumab * 300 mg, koncentrat do sporządzania roztworu do infuzji, 10 mg / ml.

Filgrastym, roztwór do wstrzykiwań 0,3 mg / ml, 1 ml;
· Ondansetron, roztwór do wstrzykiwań 8 mg / 4 ml.

Środki przeciwbakteryjne
Tabletka / kapsułka azytromycyny, 500 mg
Amoksycylina / kwas klawulanowy, tabletki powlekane, 1000 mg;
Tabletka moksyfloksacyny, 400 mg
Ofloksacyna, tabletka, 400 mg;
Tabletka cyprofloksacyny, 500 mg;
· Metronidazol, tabletka, 250 mg, żel dentystyczny 20 g;
Tabletka erytromycyny 250 mg.

Anidulafungina, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań, 100 mg / fiolkę;



Klotrimazol, roztwór do użytku zewnętrznego 1% 15 ml;

Kapsułka / tabletka flukonazolu 150 mg.

Acyklowir, tabletka, 400 mg, żel w probówce 100000 ED 50 g;


Famciclovir tabletki 500 mg

Rozwiązania stosowane do korygowania naruszeń równowagi wodno-elektrolitowej i kwasowo-zasadowej

· Dekstroza, roztwór do infuzji 5% 250 ml;
· Roztwór chlorku sodu do infuzji 0,9% 500 ml.

Heparyna, roztwór do wstrzykiwań 5000 IU / ml, 5 ml; (do przepłukiwania cewnika)

Tabletka rywaroksabanu;
Kapsułka / tabletka kwasu traneksamowego 250 mg;

Ambroksol, roztwór do podawania doustnego i inhalacji, 15 mg / 2 ml, 100 ml;

Tabletka Atenolol 25mg



Drotaverine, 40 mg tabletka;


Tabletka Levofloxacin 500 mg

Lizynopryl, tabletka 5 mg;
Tabletka metyloprednizolonu, 16 mg;

Omeprazol, kapsułka 20 mg;

Prednizon, tabletka, 5 mg;
· Smektyt dioktaedryczny, proszek do sporządzania zawiesiny do podawania doustnego, 3,0 g;

Torasemid, tabletka 10 mg;
Fentanyl, leczniczy system transdermalny 75 mcg / h; (do leczenia przewlekłego bólu u chorych na raka)

Leczenie szpitalne:
- wykaz leków podstawowych ze wskazaniem formy ich uwolnienia (z 100% prawdopodobieństwem zastosowania):

Ekulizumab * 300 mg, koncentrat do sporządzania roztworu do infuzji, 10 mg / ml.

- wykaz leków dodatkowych ze wskazaniem formy uwolnienia (prawdopodobieństwo użycia mniejsze niż 100%):

Leki osłabiające toksyczne działanie leków przeciwnowotworowych
... filgrastym, roztwór do wstrzykiwań 0,3 mg / ml, 1 ml;
... ondansetron, roztwór do wstrzykiwań 8 mg / 4 ml.

Środki przeciwbakteryjne
Azytromycyna, tabletka / kapsułka, 500 mg, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do infuzji dożylnej, 500 mg;
Amikacyna, proszek do wstrzykiwań, 500 mg / 2 ml lub proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań, 0,5 g;
Amoksycylina / kwas klawulanowy, tabletki powlekane, 1000 mg, proszek do przygotowania roztworu do podania dożylnego i domięśniowego 1000 mg + 500 mg;
Proszek / liofilizat wankomycyny do sporządzania roztworu do infuzji 1000 mg;
· Gentamycyna, roztwór do wstrzykiwań 80 mg / 2 ml 2 ml;
Imipinem, cylastatyna proszek do sporządzania roztworu do infuzji, 500 mg / 500 mg;
· Kolistymetat sodu *, liofilizat do sporządzania roztworu do infuzji 1 milion jednostek / fiolkę;
· Tabletka metronidazolu, 250 mg, roztwór do infuzji 0,5% 100 ml, żel dentystyczny 20 g;
Lewofloksacyna, roztwór do infuzji 500 mg / 100 ml, tabletka 500 mg;
· Linezolid, roztwór do infuzji 2 mg / ml;
Meropenem, liofilizat / proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 1,0 g;
Moksyfloksacyna, tabletka 400 mg, roztwór do infuzji 400 mg / 250 ml
Ofloksacyna, tabletka 400 mg, roztwór do infuzji 200 mg / 100 ml;
Piperacylina, proszek tazobaktamu do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 4,5 g;
Tygecyklina *, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 50 mg / fiolkę;
Tikarcylina / kwas klawulanowy, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do infuzji 3000 mg / 200 mg;
Cefepim proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 500 mg, 1000 mg;
· Cefoperazon, sulbaktam proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 2 g;
Ciprofloxacin, roztwór do infuzji 200 mg / 100 ml, 100 ml, 500 mg tabletki;
Tabletka erytromycyny 250 mg
Liofilizat ertapenemu do sporządzania roztworu 1 g do wstrzyknięć dożylnych i domięśniowych.

Leki przeciwgrzybicze
Amfoterycyna B *, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań, 50 mg / fiolkę;
Anidulofungina, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań, 100 mg / fiolkę;
Worykonazol, proszek do sporządzania roztworu do infuzji 200 mg / fiolkę;
Tabletka worykonazolu, 50 mg;
Itrakonazol, roztwór doustny 10 mg / ml 150,0;
Kaspofungina, liofilizat do sporządzania roztworu do infuzji 50 mg;
· Klotrimazol, krem \u200b\u200bdo użytku zewnętrznego 1% 30g, roztwór do użytku zewnętrznego 1% 15ml;
Mykafungina, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 50 mg, 100 mg;
Flukonazol, kapsułka / tabletka 150 mg, roztwór do infuzji 200 mg / 100 ml, 100 ml.

Leki przeciwwirusowe
Acyklowir, krem \u200b\u200bdo użytku zewnętrznego, 5% - 5,0, tabletka - 400 mg, proszek do sporządzania roztworu do infuzji, 250 mg;
Tabletka walacyklowiru, 500 mg;
Tabletka walgancyklowiru, 450 mg;
Gancyklowir *, liofilizat do sporządzania roztworu do infuzji 500 mg;
Famcyklowir, tabletki, 500 mg nr 14.

Leki stosowane w pneumocystozie
Sulfametoksazol / trimetoprim, koncentrat do sporządzania roztworu do infuzji (80 mg + 16 mg) / ml, 5 ml;
Sulfametoksazol / trimetoprim, 480 mg tabletka.

Dodatkowe leki immunosupresyjne:
Deksametazon, roztwór do wstrzykiwań 4 mg / ml 1 ml;
Metyloprednizolon, tabletka 16 mg, wstrzyknięcie 250 mg;
Prednizolon, roztwór do wstrzykiwań 30 mg / ml 1 ml, tabletka 5 mg.

Rozwiązania stosowane do korygowania naruszeń równowagi wodno-elektrolitowej i kwasowo-zasadowej, żywienie pozajelitowe
· Albumina, roztwór do infuzji 10%, 100 ml;
· Albumina, roztwór do infuzji 20% 100 ml;
· Woda do wstrzykiwań, roztwór do wstrzykiwań 5ml;
Dekstroza, roztwór do infuzji 5% - 250m, 5% - 500ml; 40% - 10 ml, 40% - 20 ml;
Chlorek potasu, roztwór do podawania dożylnego 40 mg / ml, 10 ml;
· Glukonian wapnia, roztwór do wstrzykiwań 10%, 5 ml;
· Chlorek wapnia, 10% roztwór do wstrzykiwań 5ml;
Siarczan magnezu, roztwór do wstrzykiwań 25% 5 ml;
Mannitol, roztwór do wstrzykiwań 15% -200,0;
Chlorek sodu, roztwór do infuzji 0,9% 500 ml;
· Chlorek sodu, roztwór do infuzji 0,9% 250 ml;
· Chlorek sodu, chlorek potasu, roztwór octanu sodu do infuzji w butelce 200ml, 400ml;
· Chlorek sodu, chlorek potasu, roztwór octanu sodu do infuzji 200 ml, 400 ml;
Chlorek sodu, chlorek potasu, wodorowęglan sodu, roztwór do infuzji 400 ml;
L-alanina, L-arginina, glicyna, L-histydyna, L-izoleucyna, L-leucyna, chlorowodorek L-lizyny, L-metionina, L-fenyloalanina, L-prolina, L-seryna, L-treonina, L-tryptofan , L-tyrozyna, L-walina, trójwodzian octanu sodu, pentihydrat glicerofosforanu sodu, chlorek potasu, heksahydrat chlorku magnezu, glukoza, chlorek wapnia dwuwodny, mieszanka emulsji z oliwek i oleju sojowego d / inf.: Pojemniki trzykomorowe 2 l
Skrobia hydroksyetylowa (pentastarch), roztwór do infuzji 6% 500 ml;
· Kompleks aminokwasów, emulsja do infuzji zawierająca mieszankę olejów oliwnych i sojowych w proporcji 80:20, roztwór aminokwasów z elektrolitami, roztwór dekstrozy, o łącznej wartości kalorycznej 1800 kcal 1 500 Pojemnik trzyczęściowy ml.

Leki stosowane w intensywnej terapii (leki kardiotoniczne stosowane w leczeniu wstrząsu septycznego, środki zwiotczające mięśnie, leki wazopresyjne i leki znieczulające):
· Aminofilina, roztwór do wstrzykiwań 2,4%, 5 ml;
Amiodaron, roztwór do wstrzykiwań, 150 mg / 3 ml;
Tabletka Atenolol 25mg
Atrakurium besilat, roztwór do wstrzykiwań, 25 mg / 2,5 ml;
Atropina, roztwór do wstrzykiwań, 1 mg / ml;
Diazepam, roztwór do podawania domięśniowego i dożylnego, 5 mg / ml 2 ml;
Dobutamina *, roztwór do wstrzykiwań 250 mg / 50,0 ml;
Dopamina, roztwór / koncentrat do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 4%, 5 ml;
• prosta insulina;
· Ketamina, roztwór do wstrzykiwań 500 mg / 10 ml;
· Morfina, roztwór do wstrzykiwań 1% 1 ml;
Norepinefryna *, roztwór do wstrzykiwań 20 mg / ml 4,0;
Bromek pipekuronium, liofilizowany proszek do wstrzykiwań 4 mg;
· Propofol, emulsja do podawania dożylnego 10 mg / ml 20 ml, 10 mg / ml 50 ml;
Bromek rokuronium, roztwór do podawania dożylnego 10 mg / ml, 5 ml;
· Tiopental sodu, proszek do sporządzania roztworu do podawania dożylnego, 500 mg;
Fenylefryna, roztwór do wstrzykiwań 1% 1 ml;
Fenobarbital, tabletka 100 mg;
· Immunoglobulina ludzka normalna, roztwór do infuzji;
Epinefryna, roztwór do wstrzykiwań 0,18% 1 ml.

Leki wpływające na układ krzepnięcia krwi
Kwas aminokapronowy, roztwór 5% - 100 ml;
· Kompleks koagulantów o działaniu przeciwinfekcyjnym, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań, 500 IU;
Heparyna, roztwór do wstrzykiwań 5000 IU / ml, 5 ml, żel w probówce 100000 ED 50 g;
· Gąbka hemostatyczna, rozmiar 7 * 5 * 1, 8 * 3;
Nadroparyna, roztwór do wstrzykiwań w ampułko-strzykawkach, 2850 jm anty-Xa / 0,3 ml, 5700 jm anty-Xa / 0,6 ml;
Enoksaparyna, roztwór do wstrzykiwań w strzykawkach 4000 anty-Xa j. M. / 0,4 ml, 8000 anty-Xa j. M. / 0,8 ml.

Inne leki
Bupiwakaina, roztwór do wstrzykiwań 5 mg / ml, 4 ml;
· Lidokaina, roztwór do wstrzykiwań, 2%, 2 ml;
· Prokaina, roztwór do wstrzykiwań 0,5%, 10 ml;
· Roztwór normalnej immunoglobuliny ludzkiej do podawania dożylnego 50 mg / ml - 50 ml;
Omeprazol, kapsułka 20 mg, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 40 mg;
Famotydyna, liofilizowany proszek do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 20 mg;
Ambroksol, roztwór do wstrzykiwań, 15 mg / 2 ml, roztwór do podawania doustnego i inhalacji, 15 mg / 2 ml, 100 ml;
Amlodypina, tabletka / kapsułka 5 mg;
Acetylocysteina, proszek do sporządzania roztworu do podawania doustnego, 3 g;
Deksametazon, krople do oczu 0,1% 8 ml;
Difenhydramina, roztwór do wstrzykiwań 1% 1 ml;
· Drotaverine, 2% roztwór do wstrzykiwań, 2 ml;
Tabletka Captopril 50 mg
· Ketoprofen, roztwór do wstrzykiwań 100 mg / 2 ml;
Laktuloza, syrop 667 g / l, po 500 ml;
Chloramfenikol, sulfadimetoksyna, metyluracyl, maść trimekainowa do użytku zewnętrznego 40g;
Lizynopryl, tabletka 5 mg;
Methyluracil, maść do stosowania miejscowego w tubie 10% 25g;
Nafazolina, krople do nosa 0,1% 10 ml;
Nicergolina, liofilizat do sporządzania roztworu do wstrzykiwań 4 mg;
· Jod powidonu, roztwór do użytku zewnętrznego 1 l;
Salbutamol, roztwór do nebulizatora 5 mg / ml - 20 ml;
· Smektyt dioktaedryczny, proszek do sporządzania zawiesiny do podawania doustnego 3,0 g;
Spironolakton, kapsułka 100 mg;
Tobramycyna, krople do oczu 0,3% 5ml;
Torasemid, tabletka 10 mg;
Tramadol, roztwór do wstrzykiwań 100 mg / 2 ml;
Tramadol, roztwór doustny (krople) 100 mg / 1 ml 10 ml;
Fentanyl, leczniczy system transdermalny 75 mcg / h (w leczeniu przewlekłego bólu u pacjentów z rakiem);
Kwas foliowy, tabletka, 5 mg;
Furosemid, roztwór do wstrzykiwań 1% 2 ml;
Chloramfenikol, sulfadimetoksyna, metyluracyl, maść trimekainowa do użytku zewnętrznego 40g;
Chlorheksydyna, roztwór 0,05% 100 ml;
Chloropiramina, roztwór do wstrzykiwań 20 mg / ml 1 ml.

Leczenie udzielane na etapie doraźnej pomocy doraźnej:nie przeprowadzono.

Inne zabiegi:
Inne zabiegi ambulatoryjne: nie aplikuj.

Inne typy dostępne na poziomie stacjonarnym:

Przeszczep szpiku kostnego (poziom wiarygodności B)
Wskazania do BMT w PNH są podobne do ciężkiej niedokrwistości aplastycznej.
Podczas gdy ekulizumab kontroluje hemolizę wewnątrznaczyniową i związane z nią powikłania PNH, przede wszystkim zależność od transfuzji, alogeniczny przeszczep szpiku kostnego (BMT) pozostaje jedyną radykalną metodą wyleczenia tej choroby. Jednak BMT wiąże się z wysoką śmiertelnością. Zatem w retrospektywnym badaniu z udziałem 26 pacjentów z PNH z Włoch, którzy otrzymali BMT, 10-letnie przeżycie wyniosło 42%, a prawdopodobieństwo 2-letniego przeżycia u 48 pacjentów, którzy otrzymali BMT od rodzeństwa identycznego pod względem HLA. Międzynarodowy Rejestr Przeszczepów Szpiku kostnego stanowił 56%. Niezależnie od wskazań, przy których wykonywany jest BMT, odsetek powikłań pozostaje bardzo wysoki. Częstość występowania reakcji przeszczep przeciwko gospodarzowi u pacjentów z PNH wynosi 42-54%, u połowy pacjentów rozwija się żylno-okluzyjna choroba wątroby, niezaszczepienie lub odrzucenie, a ponadto istnieje ryzyko ekspansji klonów PNH. BMT i związane z nim powikłania negatywnie wpływają na jakość życia pacjentów.

Inne rodzaje leczenia zapewniane podczas fazy karetki: nie aplikuj.

Cechy postępowania z pacjentkami w ciąży.
Ciąża z PNH wiąże się z wysoką śmiertelnością matek i dzieci (odpowiednio 11,6% i 7,2%).
Obecnie opisano tylko pojedyncze przypadki terapii ekulizumabem w czasie ciąży z korzystnym wynikiem dla matki i płodu. Nie ma działania teratogennego leku. Nie należy przerywać leczenia ekulizumabem w okresie ciąży. Jeśli pacjentka nie otrzymywała wcześniej ekulizumabu, lek można przepisać w czasie ciąży. W takim przypadku terapię ekulizumabem należy kontynuować przez 3 miesiące po porodzie. W przypadku „przełomowej” hemolizy w czasie ciąży może być konieczne dostosowanie dawki leku (na przykład terapia podtrzymująca 900 mg na tydzień).

Interwencja chirurgiczna:
Interwencja chirurgiczna udzielana ambulatoryjnie:nie przeprowadzono.

Chirurgia stacjonarna:
Wraz z rozwojem powikłań infekcyjnych i krwawienia zagrażającego życiu, pacjenci poddawani są pilnym interwencjom chirurgicznym.

Dalsze zarządzanie:
W trakcie terapii ekulizumabem zaleca się wykonanie następujących badań laboratoryjnych: kliniczne badanie krwi z oznaczeniem retikulocytów, LDH, kreatyniny we krwi, mózgowego peptydu natriuretycznego B (jeśli to możliwe), D-dimeru, żelaza w surowicy, ferrytyny, bezpośredni test antyglobulinowy. Wielkość klonów PNH jest monitorowana na podstawie wyników bardzo czułej cytometrii przepływowej.
U pacjentów otrzymujących ekulizumab występuje statystycznie istotny wzrost wielkości klonów PNH. W badaniu TRIUMPH klon PNH erytrocytów typu III wzrósł z 28,1% do 56,9% w ciągu 26 tygodni, podczas gdy w grupie placebo nie zmienił się. W przypadku anulowania ekulizumabu konieczne jest monitorowanie wielkości klonu PNH, poziomu retikulocytów, haptoglobiny, LDH, bilirubiny, D-dimerów w celu szybkiego wykrycia hemolizy i zapobiegania potencjalnym powikłaniom.

Wskaźniki skuteczności leczenia:
Nie opracowano jeszcze jednoznacznego systemu oceny odpowiedzi na terapię PNH. Oceniając efekt leczenia, weź pod uwagę:
· Objawy kliniczne - osłabienie;
· Poziom hemoglobiny;
· Potrzeba transfuzji składników krwi;
· Epizody zakrzepowe;
· Aktywność hemolizy (poziom retikulocytów, LDH, haptoglobina).

Preparaty (składniki aktywne) stosowane w leczeniu

Grupy leków według ATC stosowane w leczeniu

Hospitalizacja

Wskazania do hospitalizacji:
Wskazania do hospitalizacji w nagłych wypadkach:
· Nowo zidentyfikowany APG;
· Powikłania zakrzepowe;
· Kryzys hemolityczny;
· Gorączka neutropeniczna.

Wskazania do planowanej hospitalizacji:
· Badanie, ustalenie taktyki dalszego leczenia;
· Allogeniczny przeszczep szpiku kostnego.

Zapobieganie

Działania zapobiegawcze:nie.

Informacja

Źródła i literatura

1. Protokoły z posiedzeń Rady Ekspertów RCHD MHSD RK, 2015
   1. Lista wykorzystanej literatury: 1. Scottish Intercollegiate Guidelines Network (SIGN). SIGN 50: podręcznik dla programistów wytycznych. Edynburg: SIGN; 2014. (publikacja SIGN nr 50). ... Dostępne pod adresem URL: http://www.sign.ac.uk 2. Kulagin A.D., Lisukov I.A., Ptushkin V.V., Shilova E.R., Tsvetaeva N.V., Mikhailova E. AND. Krajowe wytyczne kliniczne dotyczące diagnostyki i leczenia napadowej nocnej hemoglobinurii, Oncohematology 2/2014 str. 20–28 3. Parker C., Omine M., Richards S. i wsp. Diagnostyka i leczenie napadowej nocnej hemoglobinurii. Blood 2005; 106: 3699-709. 4. de Latour R. P., Mary J. Y., Salanoubat C. i in. Napadowa nocna hemoglobinuria: naturalna historia podkategorii choroby. Blood 2008; 112: 3099-106. 5. Brodsky R. A. Jak leczyć napadową nocną hemoglobinurię. Blood 2009; 113: 6522-7. 6. Movalia M. K., Weitz I., Lim S. H., Illingworth A. Częstość występowania klonów PNH według kodu diagnostycznego wykorzystującego cytometrię przepływową o wysokiej czułości. Blood (Abstrakty z dorocznego zebrania ASH) 2011; 118: 1033. 7. Wanachiwanawin W., Siripanyaphinyo U., Piyawattanasakul N., Kinoshita T. Badanie kohortowe natury klonów napadowej nocnej hemoglobinurii i mutacji PIG-A u pacjentów z niedokrwistością aplastyczną. Eur J. Haematol 2006; 76: 502-9. 8. Hematologia; Najnowsza książka informacyjna. Pod redakcją generalną doktora nauk medycznych. Profesor K.M. Abdulkadyrow. Moskwa: Wydawnictwo Eksmo; St. Petersburg: Wydawnictwo SOVA, 2004; 294-299. 9. Borowitz M. J., Craig F. E., Digiuseppe J. A. i in. Wytyczne dotyczące diagnostyki i monitorowania napadowej nocnej hemoglobinurii i powiązanych zaburzeń metodą cytometrii przepływowej. CytometryB Clin Cytom 2010; 78 (4): 211-30. 10. Schubert J., Alvarado M., Uciechowski P. i in. Rozpoznanie napadowej nocnej hemoglobinurii za pomocą immunofenotypowania komórek krwi obwodowej. Br J Haematol 1991; 79: 487–92 11. Hammons A. H. Diagnostyka chorób narządów wewnętrznych, tom 4, Diagnostyka chorób układu krwionośnego. Wydawnictwo: M: Literatura medyczna 2001. s.67, s.100, s.163. 12. Gardner A, Mattiuzzi G, Faderl S, Borthakur G, Garcia-Manero G, Pierce S, Brandt M, Estey E. Randomized porównanie gotowanych i niegotowanych diet u pacjentów poddawanych terapii indukcyjnej remisji z powodu ostrej białaczki szpikowej. J ClinOncol. 10 grudnia 2008; 26 (35): 5684-8. 13. Carr SE, Halliday V. Badanie stosowania diety neutropenicznej: ankieta wśród brytyjskich dietetyków. Dieta J Hum Nutr. 2014 sierpnia 28,14 Boeckh M. Neutropenic Dieta - dobra praktyka czy mit? Przeszczep szpiku krwi Biol. 2012 Sep; 18 (9): 1318–9. 15. Trifilio, S., Helenowski, I., Giel, M. i in. Kwestionowanie roli diety neutropenicznej po przeszczepie hematopoetycznych komórek macierzystych. Przeszczep szpiku krwi Biol. 2012; 18: 1387-1392. 16. DeMille, D., Deming, P., Lupinacci, P. i Jacobs, L.A. Wpływ diety neutropenicznej w warunkach ambulatoryjnych: badanie pilotażowe. Forum OncolNurs. 2006; 33: 337-343 17. Hillmen P., Hall C., Marsh J. C. i in. Wpływ ekulizumabu na wymagania dotyczące hemolizy i transfuzji u pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią. N Engl J Med 2004; 350: 552-9. 18. Hillmen P., Young N. S., Schubert J. i wsp. The complement inhibitory eculizumab in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, N Engl J Med 2006; 355: 1233–43. 19. Brodsky R. A., Young N. S., Antonioli E. i in. Wieloośrodkowe badanie III fazy dotyczące inhibitora dopełniacza ekulizumabu do leczenia pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią. Blood 2008; 111 (4): 1840-7. 20. Kelly R. J., Hill A., Arnold L. M. i in. Długotrwałe leczenie ekulizumabem w napadowej nocnej hemoglobinurii: trwała skuteczność i zwiększona przeżywalność.Krew 2011; 117: 6786-92. 21. Hillmen P., Muus P., Roth A. i wsp. Długoterminowe bezpieczeństwo i skuteczność długotrwałego leczenia ekulizumabem u pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią, Br J Haemotol 2013; 162 (1): 62–73. 22. Dmytrijuk A, Robie-Suh K, Cohen MH, Rieves D, Weiss K, Pazdur R. Raport FDA: ekulizumab (Soliris) w leczeniu pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią Onkolog. 2008 Sep; 13 (9): 993–1000. 23. Martí-Carvajal AJ, Anand V, Cardona AF, Solà I. Ekulizumab do leczenia pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią. Cochrane Database Syst Rev. 30 października 2014; 10: CD010340. 24. Kelly R, Arnold L, Richards S, Hill A, Bomken C, Hanley J, Loughney A, Beauchamp J, Khursigara G, Rother RP, Chalmers E, Fyfe A, Fitzsimons E, Nakamura R, Gaya A, Risitano AM, Schubert J, Norfolk D, Simpson N, Hillmen P. The management of Pregnancy in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria on long term eculizumab. British Journal of Hematology.2010; 149: 446–450. 25. Risitano AM. Napadowa nocna hemoglobinuria i układ dopełniacza: najnowsze spostrzeżenia i nowe strategie przeciw dopełniaczom Adv Exp Med Biol. 2013; 735: 155-72. 26. Napadowa nocna hemoglobinuria (PNH). Zalecenia towarzystwa dotyczące diagnostyki i terapii chorób hematologicznych i onkologicznych, 2012. www.dgho-onkopedia.de 27. Hall C., Richards S., Hillmen P. Profilaktyka pierwotna warfaryną zapobiega zakrzepicy w napadowej nocnej hemoglobinurii (PNH). Blood 2003; 102: 3587-91. 28. Santarone S., Bacigalupo A., Risitano A. M. i in. Przeszczepienie hematopoetycznych komórek macierzystych w przypadku napadowej nocnej hemoglobinurii: długoterminowe wyniki retrospektywnego badania na zlecenie Gruppo Italiano Trapianto Midollo Osseo (GITMO). Haematologica 2010; 95: 983-8. 29. Saso R., Marsh J., Cevreska L. i in. Przeszczepy szpiku kostnego w przypadku napadowej nocnej hemoglobinurii. Br J Haematol 1999; 104: 392-6. 30. de Latour R. P., Schrezenmeier H., Mary J- Y. et al. Przeszczep komórek macierzystych w przypadku hemoglobinurii napadowej i nocnej: trwające wspólne badanie grupy AAWP EBMT i Francuskiego Towarzystwa Hematologicznego (EBMTabstract 316). Przeszczep szpiku kostnego 2009; 43 (Suplement 1): 57-8. 31. Armitage J. O. Przeszczep szpiku kostnego. N Engl J Med 1994; 330: 827-38. 32. Benavides Lopez E. Ekspansja klonalna PNH po przeszczepie szpiku kostnego: opis przypadku. Haematologica 2011; 96: 524. 33. Fraser C. J., Bhatia S., Ness K. i wsp. Wpływ przewlekłej choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi na stan zdrowia osób, które przeżyły przeszczep komórek krwiotwórczych: raport z Bone Marrow Survivor Study.Blood 2006; 108: 2867-73. 34. Bieri S., Roosnek E., Helg C. i wsp., Jakość życia i integracja społeczna po allogenicznym hematopoetycznym SCT. Przeszczep szpiku kostnego 2008; 42: 819-27.

Informacja

Lista twórców protokołów z danymi kwalifikacyjnymi:

1) Kemaykin Vadim Matveevich - Kandydat Nauk Medycznych, UAB „Narodowe Centrum Naukowe Onkologii i Transplantologii”, Kierownik Kliniki Onkohematologii i Transplantologii Szpiku.
2) Kłodziński Anton Anatoljewicz - Kandydat Nauk Medycznych, UAB „Narodowe Centrum Naukowe Onkologii i Transplantologii”, hematolog Kliniki Onkohematologii i Transplantacji Szpiku Kostnego.
3) Ramazanova Raigul Mukhambetovna - doktor nauk medycznych, profesor JSC Kazachskiego Uniwersytetu Medycznego Kształcenia Ustawicznego, kierownik kursu hematologii.
4) Gabbasova Saule Telembaevna - Republikańskie Przedsiębiorstwo Państwowe przy REM „Kazachski Instytut Badawczy Onkologii i Radiologii”, kierownik oddziału hemoblastozy.
5) Karakulov Roman Karakulovich - doktor nauk medycznych, profesor, akademik Moskiewskiego Instytutu Lotniczego Państwowego Przedsiębiorstwa Republikańskiego w Kazachstańskim Instytucie Badawczym Onkologii i Radiologii, Główny Pracownik Kliniki Hemoblastozy.
6) Tabarov Adlet Berikbolovich - Naczelnik Wydziału Zarządzania Innowacjami Republikańskiego Przedsiębiorstwa Państwowego na REM „Szpital Centrum Medycznego Prezydenta Republiki Kazachstanu”, farmakolog kliniczny, pediatra.
7) Rapilbekova Gulmira Kurbanovna, doktor nauk medycznych. UAB „Narodowe Centrum Badawcze Macierzyństwa i Dzieciństwa” - ordynator oddziału położniczego nr 1.

Oświadczenie o braku konfliktu interesów:nieobecny.

Recenzenci:
1) Afanasyev Boris Vladimirovich - doktor nauk medycznych, dyrektor Instytutu Badań Naukowych Onkologii, Hematologii i Transplantologii Dziecięcej im. R.M. Gorbaczowa, Kierownik Katedry Hematologii, Transfuzjologii i Transplantologii, Państwowa Instytucja Edukacyjna Ogólno-Budżetowa Wyższej Edukacji Zawodowej, Pierwszy Państwowy Uniwersytet Medyczny w Petersburgu I.P. Pavlova.
2) Rakhimbekova Gulnar Ayapbekkyzy - doktor nauk medycznych, profesor, JSC "National Scientific Medical Center", kierownik wydziału.
3) Pivovarova Irina Alekseevna - Medicinae Doctor, Master of Business Administration, Główny niezależny hematolog Ministerstwa Zdrowia i Rozwoju Społecznego Republiki Kazachstanu.

Wskazanie warunków rewizji protokołu:rewizja protokołu po 3 latach i / lub gdy pojawią się nowe metody diagnozy i / lub leczenia o wyższym poziomie dowodów.

Załączone pliki

Uwaga!

• Samoleczenie może spowodować nieodwracalne szkody dla zdrowia.
• Informacje zamieszczone na stronie MedElement oraz w aplikacjach mobilnych „MedElement”, „Lekar Pro”, „Dariger Pro”, „Choroby: Przewodnik terapeuty” nie mogą i nie powinny zastępować osobistej konsultacji z lekarzem. Jeśli masz jakąkolwiek chorobę lub objawy, które Cię niepokoją, skontaktuj się z lekarzem.
• Wybór leków i ich dawkowanie należy omówić ze specjalistą. Tylko lekarz może przepisać niezbędny lek i jego dawkę, biorąc pod uwagę chorobę i stan organizmu pacjenta.
• Strona internetowa MedElement i aplikacje mobilne „MedElement”, „Lekar Pro”, „Dariger Pro”, „Choroby: przewodnik terapeuty” to wyłącznie materiały informacyjne i referencyjne. Informacje zamieszczone na tej stronie nie powinny być wykorzystywane do nieautoryzowanych zmian w recepcie lekarza.
• Redakcja MedElement nie ponosi odpowiedzialności za jakiekolwiek szkody zdrowotne lub materialne wynikające z korzystania z tej witryny.

Napadowa nocna hemoglobinuria jest ciężką nabytą patologią z grupy niedokrwistości hemolitycznych. Choroba Markiafava-Mikeli lub choroba Strubing-Markiafava, inne nazwy tej patologii, powodują niszczenie czerwonych krwinek we krwi. Choroba jest bardzo rzadka, na 500 tysięcy osób może spotkać 1 osoba z tą patologią.

Aby nie martwić się rozwojem ewentualnych powikłań i konsekwencji patologii, powinieneś wiedzieć, na czym polega rozpoznanie napadowej nocnej hemoglobinurii, objawy i leczenie patologii.

Przyczyny hemoglobinurii

Jak wspomniano powyżej, napadowa nocna hemoglobinuria jest chorobą bardzo rzadką, ponadto patologię najczęściej stwierdza się u osób w wieku od 20 do 40 lat. Przypadki rozwoju choroby w podeszłym wieku lub u dzieci są również znane w praktyce lekarskiej, ale stanowią znikomy procent.

Uważa się, że napadowa nocna hemoglobinuria (PNH) jest spowodowana reakcją mutacyjną genu komórki macierzystej (PIG-A), który jest składnikiem chromosomu X w szpiku kostnym, w odpowiedzi na nieokreślone czynniki wpływające. Niektóre źródła podają, że przyczyny mutacji genu są nieznane.

Inni twierdzą, że hemoglobinuria może rozwijać się na tle chorób zakaźnych, zapalenia płuc, urazów, zatrucia, hipotermii i oparzeń, a nawet silnego stresu fizycznego.

Ale jednogłośna opinia na temat etiologii patologii nie została jeszcze ustalona.

Stwierdzono wyraźny związek między rozwojem rozpoznania napadowej nocnej hemoglobinurii jako objawu współistniejących patologii. Badania medyczne wykazały, że PNH rozwija się w wyniku niedokrwistości aplastycznej i innych patologii układu naczyniowego w 30% przypadków.

Dobrze znanym argumentem jest to, że nawet jedna zmutowana komórka może prowadzić do rozwoju ciężkiej postaci stanu patologicznego. Podczas tworzenia się czerwonych krwinek, które ma miejsce w szpiku kostnym, komórki macierzyste dzielą się, dojrzewają i są uwalniane do krwiobiegu. Jeden zmodyfikowany gen jest dzielony na parę, a te na parę itd. Oznacza to, że jedna komórka replikuje się samoczynnie, stopniowo wypełniając krew uszkodzonymi erytrocytami.

Istotą uszkodzenia czerwonych krwinek jest niekompletna lub brakująca błona białkowa, która służy do ochrony komórek przed układem odpornościowym. Przy najmniejszych defektach w komórce odporność organizmu ją niszczy, w wyniku czego rozwija się diagnoza taka jak hemoliza - wewnątrznaczyniowe niszczenie erytrocytów, które charakteryzuje się uwalnianiem czystej hemoglobiny do krwi.

Ten sam proces zachodzi w przewlekłej niedokrwistości hemolitycznej, dlatego jej analogiem jest napadowa nocna hemoglobinuria lub, jak często mówią praktycy, jej ostra postać nabyta. Główną i jedyną różnicą między tymi patologiami jest zasada ich rozwoju.

Niedokrwistość hemolityczna jest wrodzoną patologią, nabywa się hemoglobinurię. Wadliwe erytrocyty mogą również rozprzestrzeniać się na inne stałe elementy płynu naczyniowego: leukocyty i płytki krwi.

Objawy nocnej hemoglobinurii

Objawy choroby Markiafava-Micheli zależą od przyczynowej klasyfikacji patologii. Jak stwierdzono, choroba może być niezależna, w związku z czym wyróżnia się idiopatyczną postać PNH. Ze względu na rozwój patologii na tle niedokrwistości aplastycznej napadowa nocna hemoglobinuria przybiera postać zespołu. Najrzadsza jest idiomatyczna postać PNH, która występuje na tle hipoplazji hematopoezy.

Niemożliwe jest wyodrębnienie odrębnych objawów dla żadnej postaci choroby, ponieważ jest ona bardzo zmienna. Przebieg choroby może być pozornie bezobjawowy, w którym to przypadku patologię można zidentyfikować tylko na podstawie diagnozy laboratoryjnej. Inni pacjenci mają ciężki zespół anemii.

Ogólnie rzecz biorąc, można określić niewielkie uogólnienie wszystkich możliwych objawów nocnej hemogloburii, podkreślając w ten sposób główny obraz objawów.

• Proces hemolizy (niszczenie erytrocytów i hemoglobiny) zachodzi głównie w nocy (hemoglobinuria nocna), dlatego przy porannym oddawaniu moczu kolor moczu nabiera ciemnobrązowego odcienia. W dzień i wieczorem ten znak nie jest przestrzegany.
• Ze względu na ilościowy spadek krwi erytrocytów obserwuje się zespół anemii. Jego objawy są bezpośrednio związane z głodem tlenu w narządach i tkankach. Dlatego pacjent może odczuwać bóle głowy, zawroty głowy, migotanie czarnych plamek przed oczami, ogólne osłabienie, szybkie zmęczenie, napady dusznicy bolesnej i tachykardię.

• W przypadku współistniejących chorób zakaźnych, krwawień, wysiłku fizycznego itp. Może dojść do przełomu hemolitycznego objawiającego się gwałtownym skokiem ilości hemoglobiny w płynie naczyniowym, a także ciężkim złym samopoczuciem, gorączką, bólem w kości, może wystąpić zażółcenie skóry i umiarkowane powiększenie śledziony (powiększenie śledziony).
• Hemoglobinurii towarzyszy naruszenie stężenia tlenku azotu w osoczu, co zarówno na tle kryzysów, jak iw ciężkiej patologii powoduje zaburzenia erekcji u mężczyzn.
• Z powodu defektu płytek krwi (krwinek odpowiedzialnych za krzepnięcie krwi) może dojść do zakrzepicy, którą najczęściej obserwuje się w żyłach. Ten sam proces może sprowokować substancję, która jest uwalniana po zniszczeniu stałych krwinek. Powoduje zwiększoną krzepliwość płynu naczyniowego, od której zależy skłonność do zakrzepicy. Takie naruszenia mogą być śmiertelne.

Najbardziej wyraźne objawy napadowej nocnej hemoglobinurii można uzyskać na podstawie diagnostyki laboratoryjnej. Badania pokażą poziom hemoglobiny we krwi, stan komórek, obecność trombopenii i leukopenii, poziom żelaza i innych mikroelementów itp. Pełne i dokładne zdiagnozowanie hemoglobinurii zajmuje dużo czasu, ponieważ choroba ta może być ostrożnie ukrywanym pod pozorem innych patologii.

Dlatego najbardziej racjonalnym sposobem szybkiego wykrywania choroby Markiafava-Micheli jest regularne badanie profilaktyczne.

Leczenie napadowej nocnej hemoglobinurii

Okres wykrycia napadowej nocnej hemoglobinurii determinuje niezbędne metody terapeutyczne i określa rokowanie wyniku patologicznego, które w większości przypadków jest niekorzystne. Wynika to z braku określonej przyczyny rozwoju i niemożności jej wyeliminowania. Dlatego nie ma określonej metody leczenia PNH.

Wszystkie środki terapeutyczne mają na celu wyeliminowanie objawów objawowych. Jedynym skutecznym sposobem na całkowite pozbycie się zmutowanych komórek jest przeszczep czerwonego szpiku kostnego (miejsce, w którym powstają krwinki).

Wraz z rozwojem kryzysu hemolitycznego, ostrej formy hemolizy, pacjentowi przepisuje się wielokrotne transfuzje masy erytrocytów. Może być 5 lub więcej takich transfuzji. Liczbę zabiegów i ich częstotliwość określa się na podstawie powtarzanych analiz i przeprowadza się przy następnej reprodukcji wadliwych erytrocytów.

W rzadkich przypadkach usuwa się śledzionę. Objawy prowadzące do splenektomii to gwałtowny wzrost narządu i manifestacja rozwoju stanu zawału.

Pozostałe działania terapeutyczne polegają na przyjmowaniu różnych grup leków ułatwiających przebieg patologii. Głównymi lekami są preparaty z grupy hormonów steroidowych, cytostatyki, a także preparaty żelaza i kwasu foliowego.

Nerobol

Najczęstszym w wyznaczaniu lekarzy do zwalczania objawowych objawów napadowej nocnej hemoglobinurii jest lek Nerobol. Jest to lek hormonalny z grupy sterydów anabolicznych. Działanie leku jest skierowane:

• stymulować syntezę białek w organizmie pacjenta, co nie wystarcza w uszkodzonej błonie erytrocytów;
• ma korzystny wpływ na metabolizm azotu;
• opóźnia wydalanie potasu, siarki i fosforu, które są niezbędne do normalnej syntezy białek;
• prowokuje zwiększone wiązanie wapnia w kościach.

Po zażyciu tego leku pacjent odczuwa wzrost apetytu, intensywny przyrost masy mięśniowej, przyspieszenie zwapnienia kości oraz znacznie lepszą ogólną kondycję organizmu.

Stosowanie leku rozpoczyna się od 10 g, stopniowo zwiększając do 30 g, 1-2 dawki dziennie. W przypadku dzieci dawka leku to 1 tabletka co drugi dzień, w ciężkich przypadkach codziennie. Przebieg terapii Nerobolem trwa od 2 do 3 miesięcy.

Po zakończeniu stosowania leku u wielu pacjentów obserwuje się wzrost hemolizy.

Stosowanie Nerobolu może odbywać się ściśle według zaleceń lekarza prowadzącego.

Heparyna

Heparyna jest bezpośrednim antykoagulantem - środkiem hamującym krzepnięcie krwi. W przypadku napadowej nocnej hemoglobinurii jest przepisywany w celu zapobiegania zakrzepom krwi, które komplikują przebieg choroby.

Dawkowanie i częstotliwość podawania są całkowicie zindywidualizowane, w zależności od złożoności patologii i ryzyka powstania zakrzepów w naczyniach.

Pod koniec kursu z heparyną lekarz przepisuje pośrednie antykoagulanty, aby utrzymać normalny poziom krzepnięcia.

Ekulizumab jest lekiem składającym się z humanizowanych przeciwciał jednokanałowych. Zasada działania leku polega na zatrzymaniu hemolizy wewnątrznaczyniowej i bezpośrednim przeciwstawieniu się komplementom krwi. W rezultacie naturalne niszczenie wadliwych erytrocytów przez układ odpornościowy organizmu ustaje.

Ten lek jest najdroższym lekiem na świecie. Jego mechanizm działania i rozwój możliwych konsekwencji stosowania nie zostały dostatecznie zbadane.

Preparaty żelaza i kwasu foliowego

W przypadku zaburzeń pracy czerwonego szpiku kostnego dochodzi do niedoboru żelaza i kwasu foliowego, które są niezbędne do prawidłowej hematopoezy. Terapia PNH obejmuje podawanie preparatów tych mikroelementów w celu wyrównania patologicznych strat.

Dawkowanie i sposób przyjmowania leku określa lekarz prowadzący. Najczęściej przepisywane są Sorbifer, Tardiferron, Ferretab, Fenuls itp. Leki te zawierają kompleks pierwiastków śladowych niezbędnych do normalnego tworzenia stałych cząstek krwi w czerwonym szpiku kostnym.

Wsparcie wątroby

Wzmocniona terapia w walce z napadową nocną hemoglobinurią silnie wpływa na wątrobę. W przypadku braku terapii wspomagającej wątrobę może po prostu odmówić. Dlatego ważne jest, aby przyjmować leki hepatoprotekcyjne. Leki te mogą być:

• Maksar;
• Heptral;
• Carsil.

Ponadto istnieje wiele produktów spożywczych, które mogą pomóc w naprawie komórek wątroby. Należą do nich dynia, suszone morele, wodorosty, oliwa z oliwek, produkty mleczne i inne. Najważniejsze, żeby nie pogarszać go niezdrowym jedzeniem w chwilach osłabienia wątroby.

Po zidentyfikowaniu choroby lekarze podają niedokładne prognozy. Statystyki mówią, że po ustaleniu diagnozy pacjent może żyć na terapii podtrzymującej przez około 5 lat.

Ze względu na nieznane pochodzenie choroby i niedokładności w przyczynach jej rozwoju nie można zapobiec napadowej nocnej hemoglobinurii.

Wyniki

Choroba Markiafava-Micheli lub napadowa nocna hemoglobinuria to poważna choroba, która może zakończyć się śmiercią nawet przy intensywnej terapii. Za jedyne możliwe wyleczenie uważa się przeszczepienie czerwonego szpiku kostnego, w którym powstają krwinki. Ponadto patologia pociąga za sobą rozwój współistniejących chorób, które są nie mniej niebezpieczne dla stanu pacjenta.

Dlatego lekarze jednogłośnie deklarują, że najlepszą metodą zapobiegania jakiejkolwiek patologii jest regularne poddawanie się pełnemu badaniu lekarskiemu. Być może, jeśli choroba znajduje się dopiero na etapie powstawania, można ją trwale usunąć. Przy tak poważnych chorobach najważniejszy jest czas. Zadbaj o siebie i swoje ciało.

W tej grupie chorych nie ma rodzinnej skłonności do niedokrwistości, współistniejących wad wrodzonych i zaburzeń w okresie noworodkowym. Niedokrwistość aplastyczna może wystąpić u dzieci i dorosłych w każdym wieku, czasami może być związana z konkretnym zatruciem lub infekcją, ale często takiego związku nie obserwuje się i wtedy niedokrwistość jest uważana za „idiopatyczną”.

Niektóre leki, takie jak 6-merkaptopuryna, metotreksat, cyklofosfamina i busulfan, mają pewną przewidywalną, zależną od dawki, zdolność hamowania szpiku kostnego. Jeśli depresja będzie się utrzymywać, doprowadzi do aplazji szpiku kostnego, która zwykle ustępuje szybko po odstawieniu leku. Leki te uszkadzają normalne komórki szpiku kostnego poprzez ten sam mechanizm, jak poprzez hamowanie wzrostu komórek białaczkowych. Biochemiczne zasady ich działania są dość dobrze poznane. Uraz radiacyjny szpiku kostnego należy do tej samej kategorii.

Inne leki, takie jak akrichina, chloramfenikol, fenylobutazon i leki przeciwdrgawkowe, podawane w normalnych dawkach terapeutycznych, mogą powodować głęboką aplazję szpiku kostnego u bardzo niewielu osób, a tej aplazji nie można przewidzieć z góry. Często jest nieodwracalny i około połowa pacjentów umiera. Do tej kategorii należy również zatrucie środkami owadobójczymi, takimi jak DDT i niektórymi rozpuszczalnikami organicznymi. Często nie jest jasne, czy niedokrwistość może być związana z konkretnym lekiem. Warunkiem nawiązania takiej relacji jest przyjmowanie leków w ciągu ostatnich 6 miesięcy. Najbardziej znanym i przebadanym z nich jest chloramfenikol. Lek ten znajduje się na czele listy znanych czynników etiologicznych w grupie pacjentów z nabytą niedokrwistością aplastyczną opisaną przez Scotta i wsp., Oraz w tych samych grupach chorych dzieci w Shahidi. Smakosz obserwował 16 przypadków w Sydney przez 8 lat, w których choroba była, jak przypuszcza, związana z przyjmowaniem chloramfenikolu. Bezwzględna częstość występowania śmiertelnej nabytej niedokrwistości aplastycznej w populacjach, w których nie była znana ekspozycja na żaden niebezpieczny lek oraz na różne leki, w tym chloramfenikol.

Leczenie chloramfenikolem zwiększa 13-krotnie prawdopodobieństwo wystąpienia niedokrwistości aplastycznej, ale jest również jasne, że wzrost ten jest niewielki. W przypadku innych leków ryzyko jest jeszcze mniejsze. Jednakże Brytyjski Komitet ds. Bezpieczeństwa Leków zaleca, aby chloramfenikol był stosowany ogólnoustrojowo w przypadku wszystkich chorób innych niż dur brzuszny i hemofilne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych tylko po dokładnych badaniach klinicznych i zwykle laboratoryjnych wskazujących, że inny antybiotyk nie będzie wystarczający. Nigdy nie należy go stosować ogólnoustrojowo w przypadku banalnej infekcji.

Mechanizm rozwoju niedokrwistości aplastycznej pod wpływem chloramfenikolu jest niejasny. Występowanie niedokrwistości aplastycznej nie jest związane z dawką i czasem trwania leczenia, ani nie może być wyjaśnione niewystarczającym wydalaniem u podatnych osób. W warunkach in vitro można wykazać zahamowanie syntezy kwasów nukleinowych w normalnych komórkach szpiku kostnego, ale tylko przy stężeniu leku przekraczającym stężenie stosowane in vivo. Sugerowano, że małe ilości chloramfenikolu mogą być spożywane z mlekiem krów leczonych z powodu zapalenia wymienia i że te małe ilości mogą uwrażliwić szpik kostny na dalsze dawki terapeutyczne. Sugerowano również, że istnieje nieodkryta synergia z innymi lekami, które prawdopodobnie są nieszkodliwe, gdy są stosowane samodzielnie. Omawiając etiologię pancytopenicznej śmiertelnej aplazji wywołanej chloramfenikolem, należy zauważyć, że u znacznej części pacjentów otrzymujących ten lek obserwuje się zupełnie inną, odwracalną i zależną od dawki depresję szpiku kostnego. U 10 z 22 pacjentów otrzymujących chloramfenikol stwierdzono liczne duże wakuole we wczesnych erytroblastach szpiku kostnego, czemu często towarzyszył spadek liczby erytrocytów i retikulocytów. Zmiany te znikają tydzień po odstawieniu leku. Ich rozwojowi najwyraźniej sprzyjają zwiększone dawki, opóźniony klirens z osocza i przyspieszona erytropoeza. Te same wakuole można zobaczyć przy niedoborze fenyloalaniny lub ryboflawiny.

Jeśli chodzi o etiologię aplazji wywołanych innymi lekami, zawsze istniała pokusa sugerowania działania mechanizmów odpornościowych, być może rodzaju leku - haptenu. Jednak te mechanizmy nigdy nie zostały zademonstrowane. Tylko w jednej sytuacji klinicznej, a mianowicie w przypadku reakcji przeszczep przeciwko gospodarzowi u niemowląt z niewydolnością immunologiczną, które otrzymały transfuzję, ustalono immunologiczne pochodzenie niedokrwistości aplastycznej. Rozwój wyraźnej reakcji anafilaktoidalnej po przypadkowym wielokrotnym kontakcie z DDT u wrażliwego pacjenta również sugeruje mechanizm odpornościowy. Newwig zaproponował trzy wyjaśnienia aplazji leków: a) bezpośredni i toksyczny wpływ na komórki szpiku kostnego, na przykład po przewlekłej przemysłowej ekspozycji na benzen; b) prawdziwa alergia, której objawy pojawiają się szybko po kontakcie z małą dawką; c) długotrwały kontakt z wysokimi dawkami, czyli „alergia na wysokie dawki”. To najczęstsza forma. Autor wyjaśnia to przede wszystkim uszkodzeniem błon komórkowych. Można również przypuszczać predyspozycje genetyczne, na co wskazuje przypadek dyskrazji krwi po kontakcie z chloramfenikolem u bliźniąt jednojajowych. Niedawno w Lancet ukazały się artykuły przeglądowe na temat niedokrwistości aplastycznej wywołanej lekami Newwiga.

Podobne problemy pojawiają się w związku z wcześniejszym rozwojem niedokrwistości aplastycznej w wyniku infekcji wirusowej. Zjawisko to jest dobrze zbadane w zakaźnym zapaleniu wątroby. Niedokrwistość aplastyczna u 5 pacjentów w wieku od 4 do 19 lat rozwijała się 1-7 tygodni po wystąpieniu zapalenia wątroby. Opisano szereg podobnych przypadków, w tym 3 przypadki autorstwa Schwartza i wsp. Autorzy ci zauważyli, że w zakaźnym zapaleniu wątroby często występuje przejściowy spadek liczby granulocytów, płytek krwi i hemoglobiny oraz że postępujące zmiany prowadzące do aplazji szpiku kostnego u bardzo małej liczby pacjentów mogą stanowić kontynuację całego procesu, co prawdopodobnie zależy od predyspozycji genetycznych. Tutaj możesz zobaczyć analogię z zatruciem chloramfenikolem. Opisywano również pancytopenię z przemijającą hipoplazją szpiku kostnego w związku z licznymi zakażeniami wywoływanymi przez wirusy RNA, w tym mikrowirusy różyczki i grypy, wirusy paragrypy, świnki i odry. Dwie eksperymentalne infekcje wirusowe u myszy, tj. MVH-3 i Trinidadian szczep wenezuelskiego końskiego zapalenia mózgu, powodują pancytopenię i hipoplazję szpiku kostnego, a wirus można wysiewać ze szpiku kostnego. Podobnie jak w przypadku innych przyczyn niedokrwistości aplastycznej, zakłada się proces autoimmunologiczny.

W około połowie nabytej niedokrwistości aplastycznej nie ma historii wcześniejszej poważnej infekcji lub narażenia na czynniki toksyczne. Wolf opublikował obszerny materiał, obejmujący 334 przypadki nabytej pancytopenii, aw 191 przypadkach, tj. 57,2%, niedokrwistość uznano za idiopatyczną.

W materiale Gurmana względna liczba pacjentów z niedokrwistością idiopatyczną była mniejsza, tj. 28 na 104, którzy cierpieli na aplazję nabytą. W 5 z 17 przypadków opartych na materiałach Shahidi iw 5 na 9 przypadków opartych na materiale Desposito niedokrwistość była idiopatyczna. Nie jest jeszcze jasne, czy choroby w tych przypadkach są spowodowane infekcją niezidentyfikowanym wirusem. Przynajmniej niektóre przypadki idiopatyczne wydają się należeć do specjalnej grupy, którą można by nazwać przedbiałaczką lub białaczką w fazie aplastycznej.

Melhorn i wsp. Opisują 6 dzieci, u których na podstawie mocnych, niepodważalnych dowodów w wieku od 1 roku 11 miesięcy do 6 lat rozpoznano niedokrwistość aplastyczną, ale u wszystkich tych dzieci następnie, po 9 tygodniach do 20 miesięcy, wystąpiły ostre objawy. białaczka limfoblastyczna ... U tych 6 pacjentów zaobserwowano jedną wspólną cechę - szybszy niż zwykle efekt terapeutyczny w porównaniu z niedokrwistością aplastyczną po początkowej terapii kortykosteroidami. Gurman zauważył to samo i zaobserwowaliśmy ten efekt również w jednym przypadku, w którym ostra białaczka limfoblastyczna rozwinęła się po 3 miesiącach. Ta szybka odpowiedź pancytopenii na leczenie wyłącznie kortykosteroidami różni się znacznie od zwykłego braku odpowiedzi w innych przypadkach niedokrwistości aplastycznej. Należy zauważyć, że opisano podobną transformację białaczkową niedokrwistości aplastycznej wywołanej benzenem i chloramfenikolem.

Nabyte objawy niedokrwistości aplastycznej

Newman i wsp. Opisali 14 dzieci z idiopatyczną pancytopenią i zauważyli, że oprócz trzech głównych objawów - niedokrwistości, gorączki i plamicy, istnieją ważne objawy negatywne, tj. Brak powiększenia wątroby i śledziony, powiększenie węzłów chłonnych, owrzodzenia jamy ustnej i żółtaczka. Można jednak zaobserwować plamicę błony śluzowej jamy ustnej i krwawienie z dziąseł. Czasami może wystąpić zapalna limfadenopatia związana z miejscową posocznicą.

Jeśli u dziecka pojawi się czerwony mocz, należy założyć rozwój napadowej nocnej hemoglobinurii.

Diagnostyka laboratoryjna

Aminacyduria, obserwowana u około połowy pacjentów z postacią konstytucyjną, jest nieobecna i nie ma opóźnienia w wieku kostnym.

Ponad połowa dorosłych pacjentów cierpiących na tę chorobę ma limfopenię i hipogammaglobulinemię z niższymi poziomami IgG.

{!LANG-d357b74e578267ddd72d092b11537ed5!}{!LANG-e2009804fddc9e34f9984125ba8e370e!}

{!LANG-32851d89411a118ee6565a5d7b8ffce3!}

{!LANG-1a9634c263c7fc6ce7481568a833ba59!}

Leczenie

{!LANG-3910c97706eed6d02782b0772df01e0d!}

{!LANG-86fc8b9b643e04289d5036ed52a22f54!}{!LANG-98af28f458ee9a6cfebc43a6b42b21b4!}

{!LANG-2ab9f717a328f0d8c9286581c5ef9b2b!}

{!LANG-fa1c71f1ad2c46161792c5648e02010a!}

{!LANG-532a7819240d50e4025045cf424ebd31!}

{!LANG-9ecaf4d87f776974380c5a221f73c3fc!}

{!LANG-6539375da8f29049adcd1d838e134dc0!}

{!LANG-54b2ccd9edb6ad663dcec32c175e1d12!}{!LANG-4e5a94a8b759f14380c63914d78b0ac5!}

{!LANG-74e87a5437dca7c9daf52401934f0c88!}{!LANG-775f2b2e33540f2131bda429b6af9d8b!}

{!LANG-c31e598fb55bfff285b5db024086d65a!}{!LANG-60ee3b92b58a995507661e26c2e77674!}

{!LANG-1c6c3de50cff62f04a59fea413ba2f39!}

{!LANG-57ce85f0eafb61ab0e6773eea96e3597!}