أمراض الدم PNG. داء ماركيافافا ميكيلي (بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية)

حاملو براءة الاختراع RU 2574968:

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد بالتشخيص المختبري ، ويمكن استخدامه لتشخيص بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية. للقيام بذلك ، قم بتلطيخ عينة الدم قيد الدراسة بالأجسام المضادة أحادية النسيلة CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). يتم تقييم وجود استنساخ PNH بين كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية من خلال عدم وجود بروتين CD59 الواقي على غشاء الخلايا الشبكية المعزولة بواسطة بوابة CD235a ، وعلامة لعموم كرات الدم الحمراء ومستقبل الترانسفيرين CD71. لتقييم استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية في بوابة CD71 + ، يتم جمع ما لا يقل عن 20000 حدث ، اعتمادًا على بوابة CD71 + ، يتم رسم رسم بياني FSC (سجل) مقابل SSC (سجل) ، حيث يتم عزل الخلايا الشبكية باستخدام CD71str إضافي البوابة ، وبالتالي تطهير سكان الخلايا الشبكية من الحطام والمضاعفات باستخدام طريقة البوابات المتسلسلة. في ظل وجود 100 ٪ إيجابي للخلايا الشبكية CD59 ، يتم الحكم على غياب استنساخ PNH ويتم تشخيص عدم وجود مرض بيلة الهيموجلوبين الليلي الانتيابي. عند الكشف عنها في مريض أعراض مرضية تعطي الخلايا الشبكية CD59 السلبية وقيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها أكثر من 1٪ استنتاجًا تشخيصيًا حول وجود استنساخ PNH ولتأكيد تشخيص بيلة الهيموجلوبين الليلي الانتيابي ، يوصى بإجراء دراسة إضافية وفقًا للبروتوكول القياسي الدولي. عند الكشف عن الخلايا الشبكية CD59 السلبية وقيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها هي 0.1-1٪ ، يتم الحكم على وجود استنساخ PNH طفيف ويوصى بإعادة تحديد استنساخ PNH بعد 6 أشهر لزيادة قيمته و تطور بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية ، وعند تأكيد هذا الحجم ، يتم تشخيص الاستنساخ بشكل تحت الإكلينيكي من الهيموغلوبين الانتيابي الليلي بدون علامات طبيه... يتيح استخدام بوابات متعددة المعلمات لخلايا CD71 + استبعاد الحطام ، والمزدوجة ، والأجسام المضادة أحادية النسيلة غير المرتبطة على وجه التحديد من التحليل. 1 مريض.

يتعلق الاختراع بالطب ، أي طرق التشخيص السريرية والمخبرية ، ويمكن استخدامه لفحص تشخيص بيلة الهيموغلوبين الانتيابي الليلي (PNH).

نوبة مرضية شديدة بيلة الهيموغلوبينية الليلية يعود الى أمراض نادرة.

ينتج PNH عن طفرة في جين PIG-A. نتيجة لذلك ، يتم تعطيل تركيب مرساة glycosylphosphatidylinnositol (GPI) ، مما يؤدي إلى تثبيت العديد من الجزيئات على غشاء خلايا الدم (بما في ذلك CD24 على الخلايا المحببة ، و CD14 على الخلايا الوحيدة ، و CD59 على خلايا الدم الحمراء وسلائفها) ، والتي تحمي خلايا الدم من نظام كامل.

يتأثر غشاء كرات الدم الحمراء بأغشية المجمع المهاجم ، وفي غياب البروتين الواقي CD59 ، تخضع كريات الدم الحمراء لانحلال الدم.

يتميز PNH بانحلال الدم داخل الأوعية ، وفقر الدم ، وبيلة \u200b\u200bالهيموغلوبين ، ومضاعفات التخثر ، وعسر البلع ، والخمول ، وضعف الانتصاب ، والفشل الكلوي المزمن ، وارتفاع ضغط الدم الرئوي.

بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يحدث استنساخ PNH في فقر الدم اللاتنسجي ، وفقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي ، ومتلازمة خلل التنسج النقوي. متوسط \u200b\u200bعمر حدوث PNH هو 30-35 سنة. تتراوح نسبة حدوث بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية من 1 إلى 10: 1 مليون شخص. تبلغ نسبة الوفيات دون علاج من بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية حوالي 35٪ في غضون 5 سنوات من بداية المرض.

ظهرت الآن التقنيات الخلوية التي جعلت من الممكن تطويرها الأساليب الحديثة علاج هذا المرض.

في هذا الصدد ، أصبح من الضروري إنشاء طرق تشخيص دقيقة. تعتمد فعالية وكفاية العلاج على المعلوماتية والموضوعية والأدلة للتدابير التشخيصية ، واكتمال المعلومات الواردة ، مما يجعل من الممكن تقييم وجود استنساخ PNH وتوضيح التشخيص.

طريقة معروفة للكشف عن PNH بواسطة طريقة Hem لتشخيص بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية (Abdulkadyrov KM ، Clinical Hematology ، Handbook - St. Petersburg: Peter، 2006، p.82) ، بناءً على تحفيز تعطيل النظام التكميلي نتيجة تحمض عينة الدم وزيادة الحساسية له من كريات الدم الحمراء لمرضى الهيموجلوبين الانتيابي الليلي. يتم تقييم نتيجة اختبار Hem's بصريًا.

تتكون الطريقة من حقيقة أن 0.2 محلول حمض الهيدروكلوريك العادي يضاف إلى مصل دم المتبرع ، والذي يمكن مقارنته بمصل المريض وفقًا لنظام مستضد ABO ، سيتغير الرقم الهيدروجيني للمصل إلى 6.4 ، وبالتالي يحدث تنشيط المكمل ( نسبة المصل والحمض 9: واحد). بعد ذلك ، يتم خلط عشرة أحجام من المصل المحمض مع حجم واحد من تعليق 50٪ من كريات الدم الحمراء المغسولة. ثم قم بإجراء تقييم مرئي للتعليق الناتج. مع بيلة الهيموغلوبين الليلي الانتيابي ، يحدث انحلال الدم في كريات الدم الحمراء ويصبح التعليق محمرًا أو أحمر اللون ، في حين أن كريات الدم الحمراء الطبيعية لا تنحل في نفس الظروف.

ومع ذلك ، لا تحتوي هذه التقنية على حساسية كافية للكشف عن استنساخ PNH الطفيفة: الحد الأدنى لحجم الاستنساخ القابل للاكتشاف هو 4.2-5٪. لا توفر طريقة Hem's معلومات حول حجم الاستنساخ.

كل هذا لا يجعل من الممكن تقدير استنساخ PNH كنسبة مئوية ، والتي عند اكتشاف مرض أثناء الفحص ، تكون نقطة البداية للمراقبة اللاحقة والعلاج المناسب.

بالإضافة إلى ذلك ، فإن هذه التقنية شاقة للغاية ولا تلبي متطلبات التشخيص الحديثة.

هناك أيضًا طريقة معروفة لتشخيص بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية باستخدام اختبار السكروز ("مشاكل أمراض الدم ونقل الدم" ، 1972 ، 17 (8) 55-7 ، "تقييم اختبار السكروز لتشخيص بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية" ، Idelson LI ، Benisovich V.I. ، Savina L.S. ، Radzhivilovskaya E.G.).

تعتمد الطريقة على زيادة حساسية كريات الدم الحمراء للمريض المصاب بالهيموغلوبين الانتيابي الليلي لبروتينات النظام التكميلي ، في هذه الحالة بسبب إضافة السكروز.

يضاف مصل المتبرع الطازج ، المتطابق في فصيلة دم المريض ، إلى كريات الدم الحمراء للمريض. تُغسل كريات الدم الحمراء ثلاث مرات في محلول فسيولوجي (0.145 مولار كلوريد الصوديوم) ، ويضاف 100 ميكرولتر من الدم المُستقر أو منزوع الليف إلى 900 مل من محلول السكروز ويتم الحضانة لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية أو 23 درجة مئوية. ثم يتم طرد الأنابيب ثم يتم تقييم المادة الطافية لتحلل الدم المرئي. في حالة حدوث انحلال الدم ، يتم حساب درجته ، معبرًا عنها كنسبة مئوية ، من تركيز الهيموجلوبين في المادة الطافية ، والتي يتم تحديدها بواسطة طريقة السيانميثيموغلوبين.

يتم خلط عينات الدم الكامل بنسبة 9: 1 مع 3.2٪ سيترات الصوديوم أو محلول أكسالات 0.1 مولار ، ويتم نزع الألياف من الدم بالكامل عن طريق إضافة حبة زجاجية 4 مم لكل 2 مل من الدم. يتم خلط قسامات من الدم الكامل والبلازما الخالية من الصفائح الدموية بنسب مختلفة. يتم تحضير محلول السكروز متساوي التوتر عن طريق إذابة 0.27 مول من كاشف سكروز خاص في 91 مل من 50 ملي NaH 2 PO 4 و 9 مل من NaHPO 4. يتم ضبط الأس الهيدروجيني إلى 6.1 إذا لزم الأمر مع تركيزات صغيرة من هيدروكسيد الصوديوم. يملأ الحجم النهائي بـ 1000 مل من الماء.

يتم طرد الأنابيب ويتم تقييم المادة الطافية لانحلال الدم المرئي. النسبة المئوية لانحلال الدم هي قيمة محسوبة ، محسوبة من تركيز الهيموجلوبين للمادة الطافية ، والتي تحددها طريقة السيانميثيموغلوبين. كما تم تحضير قسمتين أخريين ، انحلال دم بنسبة 100٪ وانحلال دم "صفري" (بدون كريات حمراء) لتقييم العينة.

عيب هذه الطريقة هو عدم وجود حساسية ونوعية لتشخيص المرض: الحد الأدنى لحجم الاستنساخ القابل للاكتشاف - 4.2-5٪ لا يعطي فكرة دقيقة عن حجم الاستنساخ ، بينما قد يكون موجودًا في المريض الدم بقيم أقل - أقل من 4.2٪. يمكن أيضًا أن تُعزى عيوب هذه الطريقة إلى تعقيدها.

هناك أيضًا طريقة معروفة لتشخيص استنساخ PNH (Rosse WF. الاختلافات في الخلايا الحمراء في بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية. Br J Haematol 1973 ؛ 24: 327-42. 12) ، بما في ذلك قياس وتحليل درجة انحلال الدم بتركيزات مختلفة من المكمل. يوضح هذا التحليل أن خلايا PNH يتم تحليلها بتركيزات أقل من الخلايا الطبيعية.

باستخدام هذا الاختبار ، يتم تحديد مجموعات الخلايا ذات الحساسية المتوسطة لبروتينات النظام التكميلي (النوع الثاني) بين كريات الدم الحمراء الطبيعية (النوع الأول) وكريات الدم الحمراء غير الطبيعية في الهيموغلوبين الانتيابي الليلي (النوع الثالث). ومع ذلك ، فإن الطريقة شاقة ويصعب توحيدها. يمكن تفويت مجموعات صغيرة من الخلايا غير الطبيعية عند استخدام الاختبار.

هناك طريقة معروفة لعزل الخلايا الشبكية وفقًا لـ CD71 لتحديد استنساخ PNH عن طريق قياس التدفق الخلوي بين الخلايا الشبكية والخلايا المحببة (Tsagarakis NJ ، Paterakis G. مقايسة التدفق الخلوي Asimple لاختبار البيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية الروتينية على أساس الخلايا الشبكية غير الناضجة و 2012 07. 259-263) (http: //onlinelibrary.wiley.coni/doi/10.1002/cyto.b.21030/full).

يتم فحص دم المريض بالكامل ، والذي يتم تخفيفه في محلول ملحي مخزّن بالفوسفات بنسبة 1: 100. يضاف 50 ميكرولتر من الدم المخفف إلى أنبوبين ، ثم يتم إجراء التلوين: في الأنبوب الأول 10 ميكرولتر من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة (MCA) إلى CD71 و 20 ميكرولتر من MCA إلى CD59 ؛ يضاف 10 ميكرولتر من التحكم المتماثل IgGl إلى الأنبوب الثاني. يتم تقييم النتائج على الرسوم البيانية ذات المعلمة الواحدة.

بالإضافة إلى ذلك ، تحلل الطريقة أيضًا الخلايا المحببة باستخدام مجموعات من MCA: 1) CD59-FITC / CD24-PE / CD45-PE-Cy5 / ؛ 2) CD66b-FITC / CD16-PE / CD45-PE-Cy5.

وفقًا لهذه الطريقة ، تبلغ حساسية تحديد استنساخ PNH بين الخلايا المحببة 1٪ ، وتكون حساسية تحديد استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية 5٪. ومع ذلك ، تم اختبار الطريقة المقترحة على عدد صغير من المرضى الذين يعانون من بيلة هيموجلوبينية ليلية انتيابية (ن \u003d 8) ومع استنساخ PNH أقل من 1٪ (عند تقييمه على الخلايا المحببة ، وبالتالي أقل من 5٪ عند تحديده على الخلايا الشبكية) (ن \u003d 7). كذلك ، فإن حساسية تحديد الاستنساخ على الخلايا الشبكية (5٪) لا تسمح باستخدام تقنية التقييم المتزامن للنسخة بين الخلايا المحببة والخلايا الشبكية. في الوقت نفسه ، من بين عينات الدم للمرضى المشتبه في إصابتهم بـ PNH ، لم يكن هناك أي منها بحجم استنساخ يتراوح من 1 إلى 24٪ ، مما لا يعطي صورة كاملة عن ارتباط القيم في هذا النطاق. مع هذا النهج ، يكون بوابات الخلايا الشبكية أمرًا صعبًا بسبب عدم وجود علامة لعموم كرات الدم الحمراء (CD235a) في اللوحة ، وهو أمر ضروري بشكل خاص لعزل مجموعة نقية وقطع الحطام والمضاعفات. بالإضافة إلى ذلك ، لإجراء تقييم موضوعي لاستنساخ PNH ، من الضروري تقييم عشرات الآلاف من الخلايا. اختبار واحد وفقًا للطريقة المقترحة يستهلك عددًا كبيرًا من الأجسام المضادة. قد لا يكون العدد الإجمالي لأحداث البوابة المجمعة (وفقًا لـ CD71) (أحداث 2000) كافيًا لتحديد نسخة.

وهكذا ، تم اختبار الطريقة المعروفة على عدد صغير من المرضى الذين يعانون من بيلة هيموجلوبينية انتيابية ليلية و PNH-clone ، والخلايا غير المرتبطة بشكل خاص بـ MCA إلى CD71 ، على الأرجح ، ستشوه نتائج التحليل. بالإضافة إلى ذلك ، يتم استخدام 6 أنواع من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لهذا التحليل ، يتم استخدام 2 منها مرتين ، وهو ما ينعكس في التكلفة العالية للوحة MCA المستخدمة. تم اختبار الطريقة على 8 مرضى مصابين بـ PNH ، 7 منهم لديهم قيمة استنساخ أقل من عتبة الحساسية (1٪ للخلايا المحببة ، 5٪ للخلايا الشبكية). لا تحل هذه الطريقة مشكلة الكشف الموثوق به عن استنساخ PNH الطفيفة وليست دليلًا على الحساسية العالية للطريقة.

باعتبارها أقرب نظير ، هناك طريقة معروفة لتشخيص بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية عن طريق قياس التدفق الخلوي ، اقترحتها الرابطة الدولية للقياس الخلوي السريري (ICCS). (مايكل ج.بوروويتز ، فيونا إي. كريج ، جوزيف أ.ديجيوسيبي ، أندريا ج.إلينجورث ، وندل روس ، د. روبرت ساذرلاند ، كارل تي ويتوير ، ستيفن ج.ريتشاردز. إرشادات لتشخيص ورصد الهيموجلوبين الانتيابي الليلي و الاضطرابات ذات الصلة عن طريق قياس التدفق الخلوي ، عبر الإنترنت: 28 أبريل 2010 DOI: 10.1002 / cyto.b.20525).

تتضمن الطريقة فحص وجود البروتينات المرتبطة بـ GPI على الخلايا المحببة والوحيدات وكريات الدم الحمراء. تتكون الدراسة من مرحلتين: تحضير العينة والتحليل اللاحق على مقياس التدفق الخلوي.

لتحليل كريات الدم الحمراء ، يتم تخفيف الدم الكامل باستخدام برنامج تلفزيوني بنسبة 1: 100 ، يضاف 10 ميكرولتر من الدم الكامل إلى 990 ميكرولتر من محلول ملحي مخزّن بالفوسفات ؛ بعد ذلك ، يضاف 40 ميكرولتر من تعليق الخلية الناتج إلى الأنبوب المسمى. لتلطيخ كريات الدم الحمراء ، تتم إضافة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المقترنة بالفلوروكرومات CD235FITC المسمى PE والمسمى CD59 ، على التوالي ، إلى تعليق الخلية. بعد الحضانة بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة لمدة 30 دقيقة في الظلام ، يتم غسل العينات من الأجسام المضادة أحادية النسيلة غير المرتبطة. لتحليل كريات الدم الحمراء ، يتم الغسل مرتين عن طريق الطرد المركزي للعينة في 4 مل من محلول الفوسفات الملحي في 1500 حوالي 5 دقائق ، ثم يتم أخذ المادة الطافية ، وتعليق الخلايا ، ويضاف 500 ميكرولتر من محلول ملحي للفوسفات لمزيد من التحليلات.

لجمع كريات الدم الحمراء وتحليلها على مقياس التدفق الخلوي باستخدام برنامج الأداة ، يتم إنشاء الرسوم البيانية:

Plot-FS (log) مقابل (ضد) SS (log) ، حيث يتم عزل مجموعة كريات الدم الحمراء (إنشاء بوابة RBC) ويتم التخلص من الحطام والصفائح الدموية ومجموعات خلايا الدم الحمراء ؛

CD235a (سجل) مقابل FS (سجل) يرسم الأحداث من بوابة RBC لتسليط الضوء بشكل أكثر وضوحًا على CD235a إيجابي خلايا الدم الحمراء ، وإنشاء بوابة جديدة (CD235a +)

CD59 (سجل) مقابل CD235a ، (يعرض الرسم البياني الأحداث المسورة بواسطة CD235a +). يعكس الرسم البياني مستوى التعبير عن CD59 على كريات الدم الحمراء. الخلايا التي لا تحتوي على نقص CD59 - النوع الأول هي كريات الدم الحمراء الطبيعية ، والخلايا ذات النقص الجزئي في تعبير CD59 - النوع الثاني من استنساخ PNH ، والخلايا التي لا تعبر عن CD59 ، أي أن كريات الدم الحمراء مع نقص CD59 الكامل هي النوع الثالث من استنساخ PNH.

وفقًا للمنهجية ، يتم جمع ما لا يقل عن 50000 حدث خلوي.

للتحضير لتحليل الخلايا المحببة والوحيدات ، أضف 100 ميكرولتر من الدم المحيطي إلى أنبوبين معنونين. علاوة على ذلك ، للتلوين باستخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المسمى ، أضف مجموعتك الخاصة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة إلى كل أنبوب:

مجموعة من الأجسام المضادة أحادية النسيلة المسمى لتحديد استنساخ PNH بين الخلايا الحبيبية FLAER (AlexaFluor700) / CD15 (PE) / CD24 (PerCP) / CD45 (PE-Cy7) (علامات البوابات: CD45 و CD15 ، GPI - العلامات المرتبطة FLAER و CD24) ؛

مزيج من الأجسام المضادة أحادية النسيلة المسمى لتحديد استنساخ PNH بين حيدات FLAER (AlexaFluor700) / CD14PE / CD64PerCP / CD45PE-Cy7 ، حيث تكون علامات البوابة هي CD45 و CD64 ، GPI هي علامات مرتبطة FLAER و CD14 ؛

يتم تحضين العينات الملطخة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام ، وبعد ذلك يضاف 1 مل من محلول التحلل إلى العينة للتخلص من كريات الدم الحمراء. بعد الحضانة بمحلول التحلل ، يتم طرد العينات لمدة 5 دقائق عند 1500 دورة في الدقيقة ، وبعد الطرد المركزي يتم تصريف المادة الطافية ، ويتم تعليق الكريات البيض في قاع الأنبوب. بعد ذلك ، يتم غسل العينات من محلول التحلل بإضافة 2 مل من محلول الفوسفات الملحي إلى العينة والطرد المركزي اللاحق لمدة 5 دقائق عند 1500 دورة في الدقيقة. بعد الطرد المركزي ، يتم صب المادة الطافية ، ويتم تعليق الخلايا ، ثم يضاف 500 ميكرولتر من المحلول الملحي المخزن بالفوسفات لمزيد من التحليل.

لتحليل وتجميع الخلايا المحببة والوحيدة على مقياس التدفق الخلوي باستخدام برنامج الأداة ، تم إنشاء الرسوم البيانية التالية:

على الرسم البياني CD45 (سجل) مقابل SS ، مناطق الخلايا الليمفاوية CD45 + LY (خلايا منطقة التعبير العالي لـ CD45 ، قيم منخفضة لـ SS) ، وحيدات CD45 + MON (خلايا منطقة الوسط التعبير عن CD45 ، والقيم الأعلى لـ SS) والخلايا الحبيبية CD45 + GRAN (مناطق الخلايا ذات تعبير CD45 المنخفض ، قيم SS العالية).

لتحليل استنساخ PNH بين الخلايا المحببة ، يتم رسم رسم بياني للقرص المضغوط 15 (سجل) مقابل SS اعتمادًا على البوابة (CD45 + GRAN). باستخدام بوابة CD15 + ، يتم عزل مجموعة من الخلايا المحببة بدون حطام وخلايا لا ترتبط بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة بـ CD15 ؛

رسم بياني FLAER (سجل) مقابل CD24 (سجل) (مرسوم مقابل البوابة CD15 +. يرسم هذا الرسم البياني بوابة PNH GRAN ، التي تلتقط المنطقة السلبية للتعبير عن CD24 و FLAER. يشير عدم وجود هذه العلامات على الخلايا الحبيبية إلى أن الخلايا تنتمي إلى استنساخ PNH.

لتقييم استنساخ PNH بين حيدات ، يتم رسم مؤامرة -CD64 (سجل) مقابل SS مقابل بوابة CD45 MON. في هذا الرسم البياني ، تقتصر الأحداث الإيجابية لـ C064 على بوابة CD64 + MON. اعتمادًا على بوابة CD64 + MON ، يتم رسم رسم بياني -FLAER (سجل) مقابل CD14 (سجل) (اعتمادًا على السكان المختارين لـ CD64 + monocytes - البوابة). في هذا الرسم البياني ، تم بناء بوابة PNH MON ، التي تغطي المنطقة ، سلبية للتعبير عن CD14 و FLAER. يشير غياب هذه العلامات على الخلايا الوحيدة إلى أن الخلايا تنتمي إلى استنساخ PNH.

قيمة استنساخ PNH هي النسبة المئوية للخلايا (الخلايا المحببة ، الخلايا الوحيدة ، كريات الدم الحمراء) التي لا يوجد بينها بروتينات مرساة مرتبطة بـ GPI.

تعتبر دراسة استنساخ PNH وفقًا للبروتوكول الدولي "المعيار الذهبي" في تشخيص PNH. ومع ذلك ، فإن البحث مكلف ويستغرق وقتا طويلا. يستغرق التحضير والتحليل وفقًا لهذه الطريقة 2.5-3 ساعات على الأقل.

نظرًا لحقيقة أن PNH مرض نادر ، وفقًا لمصادر مختلفة ، فإنه يصيب من 1 إلى 10 أشخاص لكل مليون من السكان ، فإن معظم المرضى المحولين لتشخيص استنساخ PNH لن يكونوا إيجابيين PNH. وبالتالي ، فإن التحليل الشاق والمكلف وفقًا للبروتوكول الدولي غير مناسب للمرضى الذين ليس لديهم PNH ، ويكفي فقط للإجابة على سؤال ما إذا كان استنساخ PNH موجودًا أم لا. مع تكلفة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المسمى تبدأ من 500 دولار مقابل عنصر واحد ، ستتكلف مجموعة كاملة من الأجسام المضادة والكواشف لتشخيص PNH وفقًا للنهج الدولي من 5000 دولار أمريكي. بالنظر إلى العمر الافتراضي القصير لبعض الكواشف المطلوبة ، حتى في مدينة يبلغ عدد سكانها مليون شخص ، يمكن فحص من 10 إلى 100 مريض باستخدام مجموعة واحدة في السنة ، على التوالي ، يمكن أن تصل تكلفة اختبار واحد إلى دولار 500.

الهدف من الاختراع هو إنشاء طريقة دقيقة وحساسة ومبنية على الأدلة للتشخيص المختبري لبيلة الهيموجلوبين الانتيابية الليلية ، والتي تكون سهلة الأداء وميسورة التكلفة وتسمح بفحص بيلة الهيموجلوبين الليلي الانتيابية بأقل تكاليف مادية.

يكمن جوهر الاختراع في حقيقة أنه في طريقة التشخيص المختبري لبيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية ، بما في ذلك تلطيخ دم المريض الكامل بأجسام مضادة وحيدة النسيلة في محلول ملحي مخزّن بالفوسفات ، والحضانة ، وغسل خلايا الدم من الأجسام المضادة أحادية النسيلة غير المقيدة عن طريق الطرد المركزي ، وإعادة تعليق العينة النهائية ، أو التقييم اللاحق لحجم الاستنساخ ، غيابه في برنامج قياس التدفق الخلوي بسبب غياب أو وجود بروتينات واقية ، مزيج ثلاثي الألوان من الأجسام المضادة أحادية النسيلة CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) ، الذي يضاف إلى أنبوب العينة ، يتم تقييم وجود استنساخ PNH بين كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية من خلال عدم وجود بروتين CD59 الواقي على غشاء الخلايا الشبكية المعزولة بواسطة بوابة CD235a - علامة شاملة لكريات الدم الحمراء ومستقبلات CD71-ترانسفيرين ؛ لتقييم استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية في بوابة CD71 + ، يتم جمع ما لا يقل عن 20000 حدث ، اعتمادًا على بوابة CD71 + رسم بياني لـ FSC (سجل) مقابل SSC (سجل) ، حيث يتم عزل الخلايا الشبكية باستخدام بوابة إضافية CD71str ، وبالتالي تطهير عدد الخلايا الشبكية من الحطام والمضاعفات بطريقة البوابات المتسلسلة ، تتم مقارنة قيم المؤشرات التي تم الحصول عليها وفقًا لمعايير القاعدة ، وفي ظل وجود خلايا شبكية CD59 إيجابية بنسبة 100 ٪ ، يُحكم على عدم وجود استنساخ PNH ويتم تشخيص عدم وجود بيلة هيموغلوبينية ليلية انتيابية. إذا تم الكشف عن مريض مصاب بأعراض سريرية للخلايا الشبكية CD59 السلبية وكانت قيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها أكثر من 1٪ ، فإنهم يعطون استنتاجًا تشخيصيًا حول وجود استنساخ PNH ولتأكيد تشخيص بيلة الهيموجلوبينية الليلية الانتيابية ، دراسة إضافية يوصى به وفقًا للبروتوكول القياسي الدولي ، عند الكشف عن الخلايا الشبكية CD59 السلبية والقيمة.تحكم المؤشرات التي تم الحصول عليها من 0.1-1 ٪ على وجود استنساخ PNH طفيف وتوصي بإعادة تحديد استنساخ PNH بعد 6 أشهر لزيادة في قيمته وتطور بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية ؛ عندما يتم تأكيد حجم الاستنساخ هذا ، يتم تشخيص شكل تحت الإكلينيكي من الهيموجلوبين الانتيابي الليلي بدون علامات سريرية ...

يتيح استخدام الاختراع الحصول على النتيجة الفنية التالية.

تتميز الطريقة المقترحة لاكتشاف استنساخ PNH بموثوقية عالية ودقة وحساسية - 0.1 ٪ ، مقارنة بالطريقة الموحدة الدولية ، وهي قائمة على الأدلة.

يسمح بتحديد وجود استنساخ PNH بحجم كبير في المرضى الذين يعانون من بيلة هيموغلوبينية ليلية انتيابية حقيقية ، وقاصر - من 0.01 إلى 1 ٪ ، في المرضى الذين يعانون من فقر الدم اللاتنسجي ومتلازمة خلل التنسج النقوي.

الطريقة أبسط في التنفيذ ، ولا تتطلب تكاليف مادية كبيرة مقارنة بالطريقة القياسية الدولية.

تتيح تقنية اكتشاف استنساخ PNH إمكانية استخدام أقل عدد (ثلاثة) من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة في فحص PNH (CD235a ، CD71 ، CD59).

يتم استخدام أنبوب واحد فقط لدراسة دم مريض واحد ، مما يبسط عملية التحليل ويسرعها.

الوقت المطلوب لاختبار واحد هو 40-50 دقيقة. استخدام عدد أقل من الأجسام المضادة دون استخدام محاليل تحلل يجعل المقايسة أرخص بنحو 75٪ لكل اختبار. في الوقت نفسه ، يتم الحفاظ على حساسية عالية ودقة تشخيصية.

في معظم الحالات ، تتجنب الطريقة التكاليف الإضافية المرتبطة باستخدام المزيد من الأجسام المضادة ، نظرًا لحدوث المرض النادر ، غالبًا ما تكون النتيجة سلبية. هذه التقنية مناسبة تمامًا لفحص المرضى وهي متاحة للمؤسسات الطبية من مختلف التشكيلات ، وكذلك لجميع فئات المواطنين.

يتم تقديم النتيجة النهائية للتحليل في الطريقة المقترحة في شكل نسبة مئوية من كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية مع وجود خلل في البروتينات المرتبطة بـ GPI ، أي استنساخ PNH. تجعل هذه التقنية من الممكن تحديد الخطر المتزايد لتكوين الجلطة ، بناءً على النسبة المئوية لاستنساخ PNH المحدد.

الطريقة المقترحة هي الأفضل بالمقارنة مع بعض الطرق الأخرى المعروفة - اختبار هيم ، اختبار السكروز ، قياس درجة انحلال الدم عند تركيزات مختلفة من بروتينات النظام التكميلي.

يتم تحقيق النتيجة التقنية بفضل التكنولوجيا الجديدة التي طورها المؤلفون لتحديد استنساخ PNH في بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حيث تنص خوارزمية على تحديد هذا الاستنساخ على الخلايا الشبكية وكريات الدم الحمراء (على عكس المعيار المحدد على العدلات والوحيدات وكريات الدم الحمراء). في هذه الحالة ، استخدم المؤلفون لأول مرة مجموعة من الأجسام المضادة CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). وفقًا للطريقة المقترحة ، في وقت تحليل البيانات ، يتم استخدام إجراء إضافي للبوابات متعددة المعلمات لخلايا + CD71 والاستبعاد من تحليل الحطام والمضاعفات والتخلص من الأجسام المضادة أحادية النسيلة غير المرتبطة بشكل خاص.

النقطة الأساسية هي إجراء دراسة على الخلايا الشبكية ، والتي ، وفقًا للتقنية التي طورها المؤلفون ، يتم عزلها باستخدام الأجسام المضادة لـ CD71 ويتم فحصها باستخدام مجموعة من ثلاثة أضداد أحادية النسيلة CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 ( APC) التي اختارها المؤلفون. يعكس استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية القيمة الحقيقية لاستنساخ PNH ؛ قارن المؤلفون استنساخ PNH الذي تم الحصول عليه بين الخلايا الشبكية مع القيم التي تم الحصول عليها باستخدام نهج دولي موحد لتشخيص PNH. الارتباط بين حجم الخلايا الشبكية الإيجابية لـ PNH مع الخلايا الوحيدة هو 0.95 ، مع الخلايا المحببة - 0.93. وفقًا للطريقة المقترحة ، يتم قياس النسبة المئوية لكريات الدم الحمراء الإيجابية لـ PNH بحساسية أعلى مقارنة بالنهج القياسي الدولي ، لأن باستخدام الطريقة المقترحة ، يتم فحص ما لا يقل عن 1،000،000 من كريات الدم الحمراء ، ووفقًا لـ ICCS ، يتم فحص 500،000 فقط.

لأول مرة ، تمت دراسة استنساخ PNH على الخلايا الشبكية باستخدام مجموعة من الأجسام المضادة أحادية النسيلة CD235a / CD71 / CD59 ، مما جعل من الممكن تقدير حجم هذا الاستنساخ بحساسية 100٪.

نتيجة لذلك ، أصبح من الممكن فحص PNH باستخدام ثلاثة أجسام مضادة وحيدة النسيلة. استخدام مرحلة إضافية من عزل الخلايا الشبكية و "قطع" الخلايا غير المرتبطة على وجه التحديد بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة (على الرسم البياني FS مقابل SS ، الشكل.) إعطاء نتيجة دقيقة ، والتي تسمح ، بناءً على الفحص ، بتأكيد تشخيص PNH وإجراء العلاج المناسب الفعال.

يتم تنفيذ الطريقة على النحو التالي.

للدراسة ، يتم أخذ الدم الوريدي للمريض في أنبوب اختبار مع مضاد التخثر K 2 EDTA. يتم تسليم أنبوب الاختبار إلى المختبر من غرفة العلاج في مؤسسة طبية وقائية (LPU).

لتحليل كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية ، يتم تخفيف الدم الكامل في أنبوب بوليسترين منفصل. للتخفيف بالمحلول الملحي المخزن بالفوسفات بنسبة 1:10 ، يضاف 50 ميكرولتر من الدم الكامل إلى 450 ميكرولتر من المحلول الملحي المخزن بالفوسفات ويخلط جيدًا لمدة 5 ثوانٍ على دوامة ، ثم يتم إدخال 40 ميكرولتر من المعلق الخلوي الناتج في الأنبوب المسمى.

يتم استخدام مزيج ثلاثي الألوان من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة - CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) لتلطيخ العينة. يتم التلوين عن طريق إضافة 3 ميكرولتر من الأجسام المضادة أحادية النسيلة المسمى إلى العينة ، وبعد ذلك يتم اهتزاز الأنبوب لمدة 5 ثوانٍ على دوامة. ثم تتم الحضانة لمدة 15 دقيقة في الظلام في درجة حرارة الغرفة.

ثم يتم غسل خلايا الدم مرتين في 4 مل من المحلول الملحي المخزن بالفوسفات في وضع الطرد المركزي لمدة 5 دقائق بتردد 1500 دورة في الدقيقة. بعد كل عملية طرد مركزي باستخدام ماصة ، قم بجمع المادة طافية بعناية بحيث تظل الخلايا في الجزء السفلي من الأنبوب.

يتم تعليق العينة النهائية لمدة 5 ثوانٍ على دوامة ويتم إضافة 750 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني ، وبعد ذلك تكون العينة جاهزة للتحليل على مقياس التدفق الخلوي.

بعد ذلك ، يتم تقييم النتائج وتسجيلها باستخدام قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان. يمكن إجراء التحليل على أي مقياس تدفق خلوي مزود بأجهزة كشف لثلاث قنوات فلورية على الأقل.

يتم إجراء القياسات على مقياس التدفق الخلوي BD FACSCanto ™ II Becton-Dickinson (الولايات المتحدة الأمريكية).

يتم إجراء تقييم وجود أو عدم وجود استنساخ PNH على كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية ، وكذلك حجم استنساخ PNH ، على مقياس التدفق الخلوي باستخدام برنامج خاص.

لتقييم استنساخ PNH بين كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية ، يتم رسم رسم بياني - FSC (سجل) مقابل SSC (سجل) ، باستخدام قيد منطقي ، يتم عزل منطقة من كريات الدم الحمراء ، باستثناء الحطام والمضاعفات (الشكل 1 أ).

يتم بعد ذلك إنشاء بوابة CD235a + على مخطط FSC (السجل) مقابل CD235a (الشكل 1 ب) ، وبالتالي الحد من الخلايا الإيجابية واستبعاد الأحداث غير المرتبطة على وجه التحديد بـ CD235a (الحطام والخلايا التي لا تنتمي إلى CD235a + السكان).

يتم تحليل الأحداث المدرجة في بوابة CD235a + على الرسم البياني CD71 مقابل FSC (سجل) (الشكل 1 هـ) ، ويتم تحديد السكان الموجبين لـ CD71.

لإجراء تقييم موضوعي لاستنساخ PNH بين الخلايا الشبكية ، يتم جمع ما لا يقل عن 20000 حدث في بوابة CD71 +.

اعتمادًا على بوابة CD71 + ، يتم رسم مخطط FSC (سجل) مقابل SSC (سجل) (الشكل 1f) ، حيث يتم عزل الخلايا الشبكية باستخدام بوابة CD71str إضافية وبالتالي يتم تنقية السكان أخيرًا من الحطام والمضاعفات بواسطة التسلسل طريقة البوابة.

بعد ذلك ، تم رسم رسم بياني لـ CD235a مقابل CD59 (الشكل 1g) مقابل بوابة CD71str (الخلايا الشبكية المعزولة). في هذا الرسم البياني ، تم تمييز منطقتين ، Norm ° Ret و PNH ° Ret ، (الشكل 1g) ، وهذه هي حدود الخلايا الشبكية العادية و PNH الإيجابية ، على التوالي. يتم التعبير عن الإحصائيات بالقيم المطلقة والنسبة المئوية للبوابة (الشكلان 1 د و 1 س).

يتم إعداد بروتوكولات جمع البيانات مرة واحدة ، ولا يلزم سوى تعديلات طفيفة في وقت لاحق.

بوابة CD235a + في المرحلة الأولى من جمع البيانات هي بوابة توقف ، أي تجمع 1000000 حدث. تم تطبيق بوابة CD235a + على الرسم البياني CD235a مقابل CD59 (الشكل 1 ج). إذا لم يكن هناك أكثر من 10 أحداث في منطقتي PNH Type II و PNH Type III على الرسم البياني CD235a مقابل CD59 ، فسيتم إيقاف جمع البيانات والاستنتاج بأن استنساخ PNH غير موجود.

مع وجود عدد أكبر من الأحداث في المجموع في هذه المناطق ، يستمر البحث.

استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية هو النسبة المئوية للخلايا الشبكية التي تفتقر إلى البروتين الوقائي CD59.

في ظل وجود 100 ٪ إيجابي للخلايا الشبكية CD59 ، يتم الحكم على غياب استنساخ PNH ويتم تشخيص عدم وجود مرض بيلة الهيموجلوبين الليلي الانتيابي.

إذا تم تحديد مريض يعاني من أعراض سريرية للخلايا الشبكية CD59 السلبية وكانت قيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها أكثر من 1٪ ، فإنهم يعطون استنتاجًا تشخيصيًا حول وجود استنساخ PNH ولتأكيد تشخيص بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية ، دراسة إضافية يوصى به وفقًا للبروتوكول القياسي الدولي (مايكل ج. بورويتز ، فيونا إي كريج ، جوزيف أ. ديجيوسيبي ، أندريا جيه إلينجورث ، ويندل روسي ، د. روبرت ساذرلاند ، كارل تي ويتوير ، ستيفن ج.ريتشاردز. تشخيص ورصد الهيموجلوبين الانتيابي الليلي والاضطرابات ذات الصلة عن طريق قياس التدفق الخلوي).

إذا لم يتم الكشف عن أي خلايا شبكية CD59 سلبية وكانت قيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها 0.1-1 ٪ ، يتم الحكم على وجود استنساخ PNH طفيف. في هذه الحالة ، يوصى بإعادة تحديد استنساخ PNH بعد 6 أشهر من أجل زيادة قيمته وتطوير بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية.

عندما يتم تأكيد حجم الاستنساخ هذا عن طريق قياس التدفق الخلوي وفقًا للبروتوكول الدولي ، يتم تشخيص شكل تحت الإكلينيكي من بيلة الهيموجلوبينية الليلية الانتيابية بدون علامات سريرية ، أو يتم الحكم على استنساخ PNH المصاحب لـ AA و MDS عند إجراء التشخيصات المناسبة وفقًا لتوصيات International مجموعة مصالح PNH (I-PIG).

اجتازت الطريقة تجارب سريرية في قسم التشخيص المختبري السريري التابع للأكاديمية الطبية الروسية للتعليم العالي. قمنا بفحص 572 مريضًا تم إحالتهم من مؤسسات رعاية صحية مختلفة مع تشخيص أولي أو اشتباه في بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية (PNH) ، وفقر الدم اللاتنسجي (AA) ، ومتلازمة خلل التنسج النقوي (MPS) ، وفقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي (AIHA) ، الذين تتراوح أعمارهم بين 12 و 82 عامًا.

خضع جميع المرضى للتشخيص وفقًا للطريقة المقترحة باستخدام طريقة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان ، وكذلك وفقًا للنهج القياسي الدولي.

تم تحديد عدم وجود البروتين الوقائي CD59 على غشاء الخلايا الشبكية المعزولة بواسطة CD235a (علامة عموم كرات الدم الحمراء) و CD71 (مستقبلات الترانسفيرين) وتنقيته بشكل إضافي بواسطة طريقة البوابات المتسلسلة وفقًا لمعلمات تشتت الضوء FS / SS ، تم إثبات الارتباط بين حجم استنساخ PNH المقاس بين الخلايا الشبكية ، وفقًا لطريقة استنساخ PNH المقترحة بين الخلايا المحببة وحيدة الخلية ، والتي تم قياسها وفقًا لنهج معياري دولي.

شمل الاستطلاع 572 شخصًا تتراوح أعمارهم بين 15 و 64 عامًا ، منهم 248 من الرجال و 324 من النساء. من بين 572 تم فحصها ، تم العثور على استنساخ PNH في 175 مريضًا ، وتراوحت القيم من 0.1 ٪ إلى 99.7 ٪ (متوسط \u200b\u200b41.6 ٪). ومن بينهم 78 رجلا و 97 امرأة. خضع جميع المرضى لدراسات موازية لاستنساخ PNH وفقًا للنهج القياسي الدولي وباستخدام الطريقة المقترحة. كان الارتباط بين قيمة استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية والخلايا الحبيبية 0.93 ، بين الخلايا الشبكية والوحيدات 0.95 ، على التوالي. كانت حساسية الطريقة 98.9٪ ، والنوعية 99.8٪ ، والدقة الكلية 99.7٪.

في الأساس ، في فقر الدم اللاتنسجي ومتلازمة خلل التنسج النقوي ، يكون استنساخ PNH أقل من 1٪. وفقًا للتوصيات ، يجب دراسة الحيوانات المستنسخة بهذا الحجم في ديناميكيات بتكرار مرة واحدة في 6 أشهر. مع زيادة حجم الاستنساخ والعلامات السريرية المقابلة ، فإننا نتحدث عن إجراء تشخيص لـ PNH.

مثال. كان المريض M. ، 34 عامًا ، تحت إشراف أخصائي أمراض الدم. بعد المعاناة من الالتهابات الفيروسية التنفسية الحادة لوحظت زيادة في الضعف واليرقان واغمق لون البول.

تم إدخال المريض إلى قسم المؤسسة الطبية والوقائية (LPU) مع شكاوى من ضعف وتغميق البول.

تم إجراء فحص مخطط في قسم العيادة بالمنشأة الطبية. كشف الفحص الموضوعي عن وجود اليرقان في الجلد والأغشية المخاطية المرئية. تم إدخال المريض إلى قسم أمراض الدم مع شكاوى من الضعف العام ، والتوعك ، وضيق التنفس ، وعدم انتظام دقات القلب ، والبول الداكن ، وانخفاض عدد الهيموجلوبين والكريات الحمراء.

تم إرسال أنبوب اختبار مع عينة من الدم المحيطي المستقر بواسطة K 2 EDTA إلى قسم التشخيص المختبري السريري التابع للأكاديمية الطبية الروسية للتعليم العالي في المركز المرجعي لـ PNH لتحديد استنساخ PNH عن طريق قياس التدفق الخلوي. تم إجراء تحليل استنساخ PNH بين الخلايا المحببة والوحيدات والكريات الحمراء وفقًا للبروتوكول الدولي ، وأجريت دراسة استنساخ PNH باستخدام الطريقة المقترحة على كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية.

في الوقت نفسه ، تمت دراسة استنساخ PNH وفقًا للبروتوكول الدولي ووفقًا للطريقة المقترحة (تكرار الجملة السابقة!). وفقًا للبروتوكول الدولي ، تم تلوين العينة لتحديد استنساخ PNH بين الخلايا المحببة والوحيدات وكريات الدم الحمراء ، ووفقًا للطريقة التي اقترحها المؤلفون ، لتحديد استنساخ PNH بين كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية. وفقًا للطريقة المقترحة ، كانت العينة ملطخة بأجسام مضادة وحيدة النسيلة لـ CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) عن طريق إضافتها بالتناوب إلى 40 ميكرولتر من الدم الكامل المخفف بنسبة 1:10.

بعد الحضانة لمدة 15 دقيقة في الظلام ، تم غسل الخلايا مرتين في 4 مل من محلول ملحي مخزّن بالفوسفات في وضع الطرد المركزي لمدة 5 دقائق بتردد 1500 دورة في الدقيقة.

بعد كل عملية طرد مركزي ، يتم أخذ المادة الطافية ، بينما تظل الخلايا في قاع الأنبوب.

تم إعادة تعليق العينة المحضرة لمدة 5 ثوانٍ على دوامة ، وتمت إضافة 750 ميكرولتر من PBS.

لدراسة كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية ، تم تسليط الضوء على منطقة كريات الدم الحمراء باستثناء الحطام والمضاعفات على الرسم البياني FSC (log) مقابل SSC (log).

حددت مؤامرة FSC (السجل) مقابل CD235a بعد ذلك CD235a - الخلايا الإيجابية ، باستثناء الحطام والخلايا غير CD235a + التي لا ترتبط بشكل خاص بالأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة لـ CD235a. تم تحليل الأحداث المدرجة في بوابة CD235a + على الرسم البياني CD71 مقابل FSC (سجل) ، وتم تحديد مجموعة CD71 إيجابية.

للحصول على تقييم موضوعي لاستنساخ PNH بين الخلايا الشبكية ، تم جمع ما لا يقل عن 20000 حدث في بوابة CD71 +.

تم رسم FSC (log) مقابل SSC (log) اعتمادًا على بوابة CD71 +. بعد ذلك ، في هذا الرسم البياني ، تم عزل مجموعة من الخلايا الشبكية باستخدام بوابة إضافية CD71str ، والتي تمت تنقيتها من الحطام والمضاعفات بطريقة البوابات المتسلسلة.

علاوة على ذلك ، على الرسم البياني CD235a مقابل CD59 ، اعتمادًا على بوابة CD71str (الخلايا الشبكية المعزولة) ، تم تقييم الخلايا الشبكية لوجود بروتين CD59 المرتبط بـ GPI على أغشية الخلايا الشبكية ، على التوالي ، الخلايا الإيجابية والسلبية PNH. تم الإبلاغ عن الإحصائيات كقيم مطلقة ونسبة مئوية من البوابة.

مع عزل الخلايا الشبكية بواسطة CD71 والتنقية اللاحقة من الحطام ، بلغت خلايا CD59-السكان 97.6 ٪. وهكذا ، باستخدام الطريقة المقترحة ، تم العثور على استنساخ PNH.

أكدت الدراسة وفقًا للبروتوكول الدولي للكشف عن PNH أن استنساخ PNH موجود على الخلايا المحببة والوحيدات وكريات الدم الحمراء بنسبة 99.2٪ و 97.6٪ و 71.0٪ على التوالي ، مما يشير إلى إمكانية تكرار نتائج النتائج المقترحة و الطرق القياسية. خدم هذا الاختبار كأساس لتشخيص بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية.

أظهرت التجارب السريرية أن الطريقة المقترحة تتمتع بموثوقية عالية ودقة وحساسية (0.1٪ استنساخ PNH) ، مما يسمح لك بتحديد وجود كل من القيم العالية للاستنساخ في المرضى الذين يعانون من الهيموغلوبين الانتيابي الليلي الانتيابي والقيم الثانوية (من 0.1٪) في المرضى الذين يعانون من فقر الدم اللاتنسجي ، متلازمة خلل التنسج النقوي. التقنية المقترحة سهلة الأداء ، ولا تتطلب تكاليف مادية كبيرة ، ويستغرق اختبار واحد 40-50 دقيقة.

هذه التقنية مناسبة تمامًا لفحص المرضى وهي متاحة للمؤسسات الطبية من مختلف القطاعات ، وكذلك لجميع فئات المواطنين.

طريقة للتشخيص المختبري لبيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية ، بما في ذلك تلطيخ دم المريض بالكامل بأجسام مضادة وحيدة النسيلة في محلول ملحي مخزّن بالفوسفات ، والحضانة ، وغسل خلايا الدم من الأجسام المضادة أحادية النسيلة غير المقيدة عن طريق الطرد المركزي ، وإعادة تعليق العينة النهائية ، والتقييم اللاحق لحجم الاستنساخ أو غيابه في برنامج قياس التدفق الخلوي أو وجود بروتينات واقية ، والتي تتميز بأن توليفة ثلاثية الألوان من الأجسام المضادة أحادية النسيلة CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) ، والتي تضاف إلى أنبوب العينة ، هي تستخدم لتلطيخ عينة الدم قيد الدراسة ، يتم تقييم وجود استنساخ PNH بين كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية من خلال عدم وجود البروتين الواقي CD59 على غشاء الخلايا الشبكية المعزولة بواسطة بوابة CD235a - علامة شاملة لكريات الدم الحمراء ومستقبلات CD71-ترانسفيرين ، لتقييم استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية في بوابة CD71 + ، يتم جمع ما لا يقل عن 20000 حدث ، اعتمادًا على بوابة CD71 + ، يتم إنشاء رسم بياني FSC (سجل) مقابل SSC (سجل) ، حيث يتم عزل الخلايا الشبكية باستخدام بوابة CD71str إضافية ، وبالتالي إزالة تجمعات الخلايا الشبكية من الحطام والمزدوجة بطريقة البوابات المتسلسلة ، تتم مقارنة القيم التي تم الحصول عليها مع المعايير العادية ، وفي وجود من 100 ٪ CD59 الخلايا الشبكية الإيجابية ، يتم الحكم على عدم وجود PNH - استنساخ وتشخيص عدم وجود مرض بيلة الهيموغلوبين الليلي الانتيابي ، إذا تم الكشف عن مريض مصاب بأعراض إكلينيكية لخلايا شبكية CD59 سلبية وقيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها أكثر من 1 ٪ ، يعطون استنتاجًا تشخيصيًا حول وجود استنساخ PNH ولتأكيد تشخيص بيلة الهيموجلوبين الليلي الانتيابي ، يوصى بإجراء دراسة إضافية وفقًا للبروتوكول القياسي الدولي ، عند الكشف عن الخلايا الشبكية CD59 السلبية وقيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها 0.1-1 ٪ ، يتم الحكم على وجود استنساخ PNH ثانوي ويوصى بإعادة تحديد استنساخ PNH بعد 6 أشهر من أجل زيادة قيمته وتطوير الانتيابي بيلة الهيموغلوبينية داخل الأعصاب ، عندما يتم تأكيد حجم الاستنساخ هذا ، يتم تشخيص شكل تحت الإكلينيكي من بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية بدون علامات سريرية.

براءات اختراع مماثلة:

يتعلق الاختراع بالطب ، أي طب العيون ، ويمكن استخدامه لتشخيص الأمراض الوراثية اعتلال العصب البصري (عدم). لهذا الغرض ، يتم إجراء دراسات سريرية وخلوية ، وبالإضافة إلى ذلك ، يتم الحصول على مزرعة من الخلايا الليفية بكثافة 5000-10000 خلية لكل سم 2 من جلد المريض ، ملطخة بصبغة فلورية تعتمد على الجهد الميتوكوندريا TMRE إلى التركيز النهائي من 25 نانومتر.

يتعلق الاختراع بالدواء ويصف كاشف مضيء كيميائيًا لتحديد وجود و / أو كمية مادة تحليلية في عينة ذات محتوى تقديري من مادة تحليلية ، حيث يكون الكاشف غير مشتت وقابل للذوبان في وسط مائي ويحتوي على شريك ربط للتحليل والتركيب الكيميائي الذي يحتوي على مركب أوليفين ومخلب معدني ، حيث يكون المركب الأوليفيني مركبًا قادرًا على التفاعل مع الأكسجين المفرد 2 + 2 بالإضافة إلى تكوين ديوكسيتان أو يكون قادرًا على التفاعل مع الأكسجين المفرد مع 4 + 2 cycloaddition مع dienes ، وحيث يكون المعدن أو المعدن المخلّب عبارة عن فلز أرضي نادر أو معدن المجموعة VIII ، وحيث يكون المعدن متناسقًا مع ذرتين أو أكثر من نفس الجزيء أو عامل مخلب ، حيث يتم اختيار ذرتين أو أكثر من مجموعة تتكون من الأكسجين والنيتروجين والكبريت.

تتعلق مجموعة الاختراعات بالطب ، أي علم المناعة ، ويمكن استخدامها لتحديد فعالية علاج السرطان خارج الجسم الحي. لهذا ، بعد إعطاء جرعة واحدة أو أكثر من التركيب المناعي للموضوع ، يتم قياس مستوى الخلايا اللمفاوية التائية المنشطة (CD3 + CD69 +) في الجسم.

يتعلق الاختراع بمجال التكنولوجيا الحيوية ويمكن استخدامه لتحديد التركيب الوراثي البشري عن طريق تعدد الأشكال في مصفوفة الجينات metalloproteinase MMP9-1562 C\u003e T (rs3918242).

يتعلق الاختراع بطريقة لتحديد النشاط البيولوجي لبويضات Trichuris الجنينية. تتضمن الطريقة الموصوفة إجراء 3 تحليلات على الأقل تم اختيارها من: - تقييم و / أو تأكيد مرحلة التطور الجنيني للبيض باستخدام طريقة PCR الكمي باستخدام تسلسل علامة مناسب لتحديد عدد نسخ الحمض النووي الجيني ، - تقييم النشاط الأيضي لـ بويضات جنينية باستخدام طرق بيوكيميائية و / أو جزيئية بيولوجية ، - تقييم قابلية التعبير الجيني في البويضات الجنينية ، - تقييم تنقل يرقات Trichurs باستخدام مجهر لفترات مراقبة طويلة بعد الحضانة المسبقة في درجات حرارة مرتفعة و / أو - تقييم الفقس معدل يرقات Trichuris في حيوان مختبر ...

يتعلق الاختراع بالطب ، أي طب القلب ، ويمكن استخدامه للتنبؤ بخطر الموت القلبي الوعائي في المرضى الذين يعانون من قصور القلب المزمن التالي للاحتشاء ، بالإضافة إلى السكرى 2 أنواع.

يتعلق الاختراع بالطب ، أي علم الأورام والكيمياء الحيوية السريرية. جوهر هذه الطريقة هو أن خلايا الدم المحيطية الثابتة يتم معالجتها بأجسام مضادة أولية لبروتين رابط للإستروجين والذي يتفاعل بشكل خاص مع المستضدات على سطح الخلايا الحبيبية المقسمة ، ثم تضاف الأجسام المضادة الثانوية التي تحمل علامات الفلورسنت إلى مركب الجسم المضاد الناتج. ، وفي ظل وجود تلطيخ على سطح الخلايا الحبيبية المجزأة يتم تشخيصها الأورام الخبيثة، وفي حالة عدم وجود تلطيخ على سطح الخلايا المحببة المجزأة ، يتم تشخيص الأورام الحميدة.

يتعلق الاختراع بالطب ، أي علم الأورام ، ويمكن استخدامه للتنبؤ بتطور النقائل الدموية بعد العلاج المشترك لسرطان الكلى.

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد طب التوليد وأمراض النساء ، ويمكن استخدامه للتنبؤ بتأخر نمو الجنين داخل الرحم. لهذا الغرض ، في الدم الوريدي للمرأة في بداية الحمل ، يتم تحديد المحتوى النسبي لـ CD3 + CD16 + 56 + الخلايا الليمفاوية ، ومستوى مكون C3 للمكمل ومستقبل عامل نخر الورم القابل للذوبان (sTNF-R).

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد طب الجهاز الهضمي ، ويمكن استخدامه لتشخيص كيس البنكرياس الكاذب القيحي التالي للنخر. لهذا ، يتم تحديد نشاط البالعات في دم المريض بمستوى التعبير عن CD 14 + / HLA-DR + عن طريق قياس التدفق الخلوي وتحليل ROC الإحصائي. إذا كان محتوى CD14 + / HLA-DR + أقل من 85٪ ، يتم تشخيص كيس البنكرياس الكاذب القيحي. إن استخدام هذه الطريقة يجعل من الممكن تشخيص كيس البنكرياس الكاذب القيحي التالي للتخدير ، مما يجعل من الممكن تحديد أساليب إدارة هؤلاء المرضى واختيار التدخل الجراحي. 2 مثال ، 1 جدول

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد علم الأورام الدموية ، ويمكن استخدامه للتنبؤ بتطور البقاء على قيد الحياة بدون انتكاس في المرضى الذين يعانون من المايلوما المتعددة بعد زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم ذاتيًا. الهدف من الاختراع هو تبسيط طريقة التنبؤ بالبقاء الخالي من الأمراض في المرضى المصابين بالورم النخاعي المتعدد بعد ATHSC. تتضمن طريقة التنبؤ بالبقاء على قيد الحياة بدون انتكاس في المرضى الذين يعانون من المايلوما المتعددة بعد زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم (ATHSC) قياس التدفق الخلوي وتقييم المحتوى النسبي لإحدى مجموعات الخلايا الليمفاوية باستخدام قيمته الحدية. في الطريقة المقترحة ، بعد إجراء الفصادة ، قبل الزرع ، يتم تحديد العدد النسبي لخلايا CD45 + CD19 + B في منتج فصادة المريض ، وإذا كان محتوى خلايا CD45 + CD19 + B أكثر من 2.5٪ ، يكون أقصر فترة البقاء على قيد الحياة خالية من الانتكاس بعد توقع ATHSC ، ومع محتوى خلايا CD45 + CD19 + B أقل من 2.5 ٪ يتوقع بقاء أطول خالية من الأمراض بعد ATHSC. 1 مريض.

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد في علم المناعة ، ويمكن استخدامه لتقييم رد فعل تحول الانفجار للخلايا الليمفاوية. لهذا الغرض ، يتم استخدام البروسلين للتنشيط المحدد للخلايا الليمفاوية. يتم الكشف عن أشكال الانفجار من الخلايا الليمفاوية باستخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة لـ CD34 ، متبوعًا بعد الخلايا عن طريق قياس التدفق الخلوي. يسمح استخدام هذه الطريقة بحساب الخلايا الليمفاوية المنشطة بالبروسلين في RBTL باستخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة CD34 في مرضى الحمى المالطية والمتبرعين الأصحاء. علامة تبويب واحدة.

يتعلق الاختراع بالطب ، أي علم المناعة ، ويمكن استخدامه لتحديد الأجسام المضادة لـ HLA-G الخيفي في مصل الدم. لهذا ، يتم استخدام اختبار المطابقة المتقاطعة للخلايا أحادية النواة المانحة مع مصل المستلم. يتم تحليل المجموعات السكانية الفرعية من الخلايا أحادية النواة عن طريق قياس التدفق الخلوي لربط الأجسام المضادة وحيدة النسيلة HLA-G ويتم تقدير درجة التعبير عن HLA-G على الخلايا أحادية النواة التجريبية والمتبرع بها. في الوقت نفسه ، تعتبر المجموعات السكانية الفرعية CD3-HLA-G + و CD3 + HLA-G + مهمة ، وفقًا لذلك يتم حساب معامل القمع (CP) في الإعداد التجريبي بالنسبة إلى عنصر التحكم وفقًا للصيغة: CP HLA-G \u003d (HLA - G О П - HLA - G K ON T) HLA - GK ON T × 100 ، حيث HLA-Gon هو إجمالي العدد النسبي للمجموعات السكانية الفرعية التي تعبر عن HLA-G: (CD3-HLA-G ++ CD3 + HLA-G +) في بيئة تجريبية ،٪ ؛ HLA-Gcont هو العدد الإجمالي النسبي للمجموعات السكانية الفرعية التي تعبر عن HLA-G: (CD3-HLA-G ++ CD3 + HLA-G +) في إعداد التحكم ،٪. في هذه الحالة ، يتم تشخيص وجود التحسس لـ HLA-G الخيفي بقيمة CPHLA-G سلبية. يسمح استخدام هذه الطريقة باكتشاف التحسس الخيفي لـ HLA-G باستخدام قياس التدفق الخلوي ، وتحديد المجموعات السكانية الفرعية لـ CD3-HLA-G + و CD3 + HLA-G +. 3 مثال ، 3 dwg. ، 2 tbl.

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد طب التوليد وأمراض النساء ، ويمكن استخدامه للتنبؤ بتكرار تهديد الإجهاض. لهذا الغرض ، يتم إجراء دراسة مناعية للدم الوريدي المحيطي في 7-12 أسبوعًا من الحمل لدى النساء المعرضات لخطر الإجهاض. بعد علاج التهديد بإنهاء الحمل ، يتم تحديد المحتوى النسبي لـ CD45RA-CD62L- في مجموعة الخلايا الليمفاوية CD8 +. إذا كانت قيمته أكثر من 23.9٪ ، فإنهم يتوقعون حدوث إجهاض مهدد في الثلث الثاني من الحمل لدى النساء اللواتي لديهن تاريخ من الإجهاض المتكرر. يتيح استخدام هذه الطريقة إمكانية التنبؤ بتكرار حدوث إجهاض مهدد في الثلث الثاني من الحمل ، مما سيسمح باختيار الأساليب الصحيحة لإدارة المرأة الحامل ، وتقليل تكرار هذه المضاعفات. 1 طبل ، 4 مثال

يتعلق الاختراع بالطب ، أي نقل الدم ، ويمكن استخدامه للتحكم في فعالية تشعيع دم المتبرع. تتضمن الطريقة إجراء تفاعل تحول انفجار لخلايا الدم باستخدام ميتوجين فيتوهماجلوتينين مع مراعاة نتائج التفاعل من خلال تحديد مؤشر تحفيز الخلايا الليمفاوية. يتم إجراء التفاعل فيما يتعلق بدم المتبرع المشع ، ويتم تسجيل النتائج باستخدام مقياس التدفق الخلوي باستخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة الموصوفة بفلوروكرومات مختلفة ، مع بوابات الخلايا الليمفاوية المنشطة مع انخفاض التعبير عن علامة الكريات البيض العامة CD45 وتحديد نسبة السالبة المزدوجة بينهم الخلايا الليمفاوية التائية ذات النمط المناعي CD3 CD4-CD8- ، بينما يتم أخذ عينة غير مشعة من نفس الدم كعنصر تحكم. بعد ذلك ، يتم تحديد فعالية التشعيع من خلال نسبة محتوى الخلايا اللمفاوية التائية المزدوجة السلبية مع النمط الظاهري المناعي CD3 + CD4-CD8- في الدم المشع الذي تم اختباره ونفس دم التحكم غير المشع مثل Eob \u003d Cdntlo-Sdntlk ، حيث Eob هي كفاءة التشعيع ، Cdntlo هي النسبة المئوية للخلايا اللمفاوية التائية المزدوجة السلبية ذات النمط المناعي CD3 + CD4-CD8 في التجربة (في الدم المشع المختبَر) ، Sdntlc - النسبة المئوية لمحتوى T- سلبي مزدوج الخلايا الليمفاوية مع CD3 + CD4-CD8- النمط الظاهري المناعي في السيطرة (في عينة غير مشععة من نفس الدم). إذا كان الاختلاف مع عنصر التحكم أكثر من 50٪ ، يتم التوصل إلى استنتاج حول الدونية الوظيفية للخلايا اللمفاوية التائية في الدم المشعَّع والسلامة المناعية لمنتج الدم هذا للمتلقي. يتيح استخدام هذه الطريقة تحديد كفاءة تشعيع دم المتبرع عن طريق قياس التدفق الخلوي.

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد طب التوليد وأمراض النساء ، ويسمح بالتنبؤ بتهديد الإجهاض المتأخر عند النساء الحوامل. لهذا ، في فترة 5-12 أسبوعًا من الحمل ، يتم تحديد العدد النسبي لـ CD178 + وحيدات الحمل في الدم الوريدي المحيطي. إذا كانت قيمته تساوي 37.7٪ أو أقل في بوابة الخلية الأحادية ، فمن المتوقع حدوث إجهاض متأخر عند النساء مع خطر إنهاء الحمل التواريخ المبكرة وتاريخ من الإجهاض المتكرر. يتيح لك استخدام هذه الطريقة اختيار الأساليب الصحيحة لإدارة الحمل ، وتنفيذ مجموعة من الإجراءات العلاجية والوقائية وتقليل مخاطر حدوث مضاعفات ونتائج الحمل السلبية في مجموعة من النساء المعرضات لخطر الإجهاض. 3 مثال ، 1 جدول

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد طب التوليد ، ويتعلق باختيار التكتيكات لإدارة النساء الحوامل المصابات بقصور المشيمة ومتلازمة تأخر نمو الجنين (FGRS). للقيام بذلك ، في المرضى الذين يعانون من قصور الجنين و IGR في مصل الدم ، يتم استخدام المقايسة المناعية للإنزيم لتحديد نشاط ديسموتاز الفائق ، ومحتوى عامل النمو المشيمي ، والإندوجلين والميلاتونين. بالنسبة لهذه المؤشرات ، يتم حساب المعامل التنبئي P باستخدام الصيغة: P \u003d (0.0001 * COD + 0.0255 * Mel + 0.1636 * CD105 + (- 0.0487 * PGF) -8.5389 ، حيث COD هو ديسموتاز الفائق ، pg / ml ، Mel - الميلاتونين ، pg / ml ، CD 105 - endoglin ، pg / ml ، PGF - عامل النمو المشيمي ، pg / ml مع قيمة P 0.64 أو أكثر ، من المتوقع حدوث مخاطر عالية لتطوير حالة الجنين الحرجة في فترة ما قبل الولادة ، مما يتطلب إكمال الحمل عن طريق الجراحة العملية القيصرية على أساس طارئ لصالح الجنين. توفر الطريقة زيادة في دقة التنبؤ بالحالة الحرجة للجنين عن طريق الوريد ، مما يجعل من الممكن تحديد تكتيكات مناسبة لإدارة المريض في الوقت المناسب. 2 مثال

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد طب الأنف والأذن والحنجرة ، ويمكن استخدامه للتشخيص السريع التفاضلي لالتهاب اللوزتين الفيروسي والبكتيري الحاد عند البالغين. لهذا ، يتم أخذ الدم المحيطي ويتم تحديد المحتوى النسبي للمجموعات السكانية الفرعية من الخلايا الحبيبية العدلات ، التي تعبر في نفس الوقت عن CD16 ، CD11b على الغشاء السطحي. يعتبر وجود مجموعة سكانية فرعية من CD16brightCD11bdimNG٪ من 80 إلى 99.9٪ بكثافة عالية لتعبير CD16 وكثافة منخفضة لتعبير CD11b أمرًا طبيعيًا. إذا تم الكشف عن مجموعة سكانية فرعية من CD16brightCD11bbrightNG أو CD16dimCD11bbrightNG بمقدار 40٪ أو أكثر ، فإن العدوى الفيروسية الحادة أو الحادة عدوى بكتيرية... يتيح لك استخدام هذه الطريقة ضمان الدقة تشخيص متباين التهاب اللوزتين الفيروسي والبكتيري الحاد عند البالغين. 3 مثال ، 1 جدول

تتعلق مجموعة الاختراعات بالطب ، وبالتحديد في التشخيص المختبري ، ويمكن استخدامها للكشف المتزامن لممثلي مجموعات التصنيف الشرطي للكائنات الدقيقة المسببة للأمراض للإنسان والحيوان. يتميز باستخدام ما لا يقل عن خمسة اختبارات شريطية مناعية في جسم واحد. في الوقت نفسه ، توجد في القناتين الأولى والثانية من جسم الجهاز اختبارات شريطية للكشف عن السموم ، في القناة الثالثة - اختبار شريطي للكشف عن الأشكال النباتية للبكتيريا ، في القناة الرابعة - لأشكال الجراثيم البكتيرية ، وفي القناة الثالثة القناة الخامسة - اختبار شريطي لتحديد وسط استزراع لزراعة الفيروسات والريكتسيا. يتم إجراء الاختبار عن طريق وضع جسم اختبارات الكروماتوغرافيا المناعية في كيس ceflen عازل للحرارة ، يتكون من طبقتين من ceflen ، مع حشية عازلة للحرارة مصنوعة من مادة عازلة للحرارة مسامية بينهما ، وجسم اختبارات الشريط المناعي يتم تسخين الكيس داخل الكيس بمصدر حرارة ثابت ، ويتم إغلاق فتحة الكيس بمشبك ميكانيكي وتعتبر هذه اللحظة بداية الاختبار. كما تم اقتراح جهاز لتحليل الكروماتوغرافي المناعي. التأثير: تسمح مجموعة الاختراعات بزيادة إنتاجية التحليل المناعي ، لتوسيع نطاق درجة حرارة التحليل المناعي من 20 إلى 50 درجة مئوية تحت الصفر ، لتقليل وقت الحصول على النتيجة إلى 10 دقائق مقارنة بالتحليل في درجة حرارة الغرفة ( 20 دقيقة) ، بشرط تحقيق نفس الحساسية ، لزيادة حساسية التحليل مقارنة بالتحليل الذي يتم إجراؤه في درجة حرارة الغرفة. 2 ن. و 7 ص. بلورات f ، 5 dwg. ، 4 tbl. ، 8 ex.

يتعلق الاختراع بالطب ، وبالتحديد بالتشخيص المختبري ، ويمكن استخدامه لتشخيص بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية. للقيام بذلك ، قم بتلطيخ عينة الدم قيد الدراسة بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة CD235a CD59CD71. يتم تقييم وجود استنساخ PNH بين كريات الدم الحمراء والخلايا الشبكية من خلال عدم وجود بروتين CD59 الواقي على غشاء الخلايا الشبكية المعزولة بواسطة بوابة CD235a ، وعلامة لعموم كرات الدم الحمراء ومستقبل الترانسفيرين CD71. لتقييم استنساخ PNH بين الخلايا الشبكية ، يتم جمع ما لا يقل عن 20000 حدث في بوابة CD71 + ، اعتمادًا على بوابة CD71 + ، يتم رسم رسم بياني FSC مقابل SSC ، حيث يتم عزل الخلايا الشبكية باستخدام بوابة CD71str إضافية ، وبالتالي تنقية الخلايا الشبكية السكان من الحطام والمزدوجة بطريقة البوابات المتسلسلة. في ظل وجود 100 خلية شبكية إيجابية CD59 ، يتم الحكم على غياب استنساخ PNH وتشخيص عدم وجود بيلة هيموغلوبينية ليلية انتيابية. إذا تم الكشف عن مريض يعاني من أعراض سريرية للخلايا الشبكية CD59 السلبية وكانت قيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها أكثر من 1 ، يتم التوصل إلى استنتاج تشخيصي حول وجود استنساخ PNH ويوصى بإجراء دراسة إضافية وفقًا لبروتوكول موحد دولي للتأكيد تشخيص بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية. عند الكشف عن الخلايا الشبكية CD59 السلبية وقيمة المؤشرات التي تم الحصول عليها 0.1-1 ، يتم الحكم على وجود استنساخ PNH طفيف ويوصى بإعادة تحديد استنساخ PNH بعد 6 أشهر لزيادة قيمته و تطور بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية ، وعند تأكيد حجم الاستنساخ هذا ، يتم تشخيص شكل تحت الإكلينيكي من بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية بدون علامات سريرية يتيح استخدام بوابات متعددة المعلمات لخلايا CD71 + استبعاد الحطام والمزدوجة والأجسام المضادة وحيدة النسيلة غير المرتبطة على وجه التحديد من التحليل. 1 مريض.

بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية (PNH) هي مرض مكتسب يتجلى في فقر الدم الانحلالي المستمر ، وبيلة \u200b\u200bالهيموغلوبين الانتيابي أو المستمر ، وانحلال الدم داخل الأوعية. ندرة هذا النوع من فقر الدم الانحلالي تتميز بحقيقة أن شخصًا واحدًا من كل نصف مليون يعاني من PNH ، معظمهم من الشباب.

أسباب المرض غير معروفة حاليًا على وجه اليقين. من المفترض أنه يحدث بسبب ظهور نسخة غير طبيعية من خلايا الدم الحمراء ، عرضة لانحلال الدم داخل الأوعية الدموية. في المقابل ، فإن دونية كريات الدم الحمراء هي نتيجة لعيوب بنيوية وكيميائية حيوية في غشاءها. من المعروف أن بيروكسيد الدهون يتم تنشيطه في الغشاء المعيب ، مما يساهم في التحلل المبكر لكريات الدم الحمراء ، بالإضافة إلى أن النسخ غير الطبيعية للخلايا الحبيبية والصفائح الدموية تشارك في العملية المرضية. الدور الرئيسي في أصل المضاعفات الخثارية لـ PNH ينتمي إلى التدمير داخل الأوعية الدموية للكريات الحمراء وبدء تخثر الدم بواسطة العوامل المنبعثة في هذه الحالة. يبدأ PNH ، كقاعدة عامة ، بالتدريج ، ويمضي بشكل مزمن مع الأزمات الدورية. الأزمات تثير العدوى الفيروسية، التدخلات الجراحية ، الإجهاد النفسي والعاطفي ، الحيض ، استخدام عدد المخدرات والمنتجات الغذائية.

أعراض بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية

أعراض PNH أثناء الأزمة:

• الألم الانتيابي في تجويف البطن;
• ألم في منطقة أسفل الظهر.
• اليرقان بشرة والصلبة. ارتفاع الحرارة؛ وجه فطري
• تلون البول باللون الأسود ، خاصة في الليل ؛
• انخفاض حاد في ضغط الدم.
• تضخم عابر في الطحال.
• توقف تدفق البول.

في بعض الحالات ، تكون أزمة انحلال الدم قاتلة.

أعراض PNH خارج الأزمة:

• ضعف عام؛
• شاحب ، مع مسحة إيقاعية ، لون الجلد ؛
• فقر دم؛
• الميل لتشكيل الجلطة. بول دموي؛ زيادة الضغط الشرياني؛ تضخم الكبد ضيق التنفس؛ الخفقان. الأمراض المعدية المتكررة.

التشخيص

• تحاليل الدم: فقر الدم (عادي اللون ، لاحقًا ، ناقص اللون) ، الكريات البيض المعتدل ونقص الصفيحات ، ينخفض \u200b\u200bمستوى الحديد في الدم بشكل كبير.
• فحص البول: تلطيخه باللون الأسود ، بيلة هيموجلوبينية ، بيلة دموية ، بيلة بروتينية. اختبار جريجرسن بنزيدين في البول إيجابي.
• اختبار هام الخاص إيجابي.
• اختبار هارتمان المحدد إيجابي.
• علامات ترقيم نخاع العظم: تضخم جرثومة المكونة للدم الحمراء ، ولكن في الحالات الشديدة ، يمكن أيضًا ملاحظة نقص تنسج نخاع العظم ، وزيادة في كمية الأنسجة الدهنية في نخاع العظام.

علاج بيلة الهيموجلوبين الانتيابية الليلية

علاج PNH عرضي ويتكون بشكل أساسي من عمليات نقل الدم البديلة ، والتي يعتمد حجمها وتواترها على "الاستجابة" لهذه التدابير. في علاج PNH ، يتم استخدام ميثاندروستينولون بجرعة 30-50 مجم / يوم لمدة 2-3 أشهر على الأقل. يتم مكافحة نقص تنسج نخاع العظم عن طريق الحقن الوريدي للغلوبولين المناعي المضاد للخلايا بجرعة 150 مجم / يوم لمدة 4 إلى 10 أيام. يوصى بتناول مستحضرات الحديد في جرعات صغيرة. بعض الأحيان تأثير جيد إعطاء جرعات عالية من الكورتيكوستيرويدات. يعتبر نقص تنسج نخاع العظم مع تطور المضاعفات الخثارية مؤشرًا على زراعته. تم وصف حالات الشفاء المعزولة من PNH ؛ في بعض الحالات ، تكون مدة المسار الإيجابي للمرض عدة عقود.

الأدوية الأساسية

هناك موانع. مطلوب استشارة متخصصة.

RCHD (المركز الجمهوري لتطوير الرعاية الصحية التابع لوزارة الصحة في جمهورية كازاخستان)
الإصدار: البروتوكولات السريرية MH RK - 2015

بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية [markaafava-mikeli] (D59.5)

علم الأورام

معلومات عامة

وصف قصير

موصى به
مجلس الخبراء
RSE على REM "المركز الجمهوري
التنمية الصحية "
وزارة الصحة
والتنمية الاجتماعية
جمهورية كازاخستان
بتاريخ 9 يوليو 2015
بروتوكول رقم 6

تصنيف

التصنيف السريري:

هناك 3 أشكال رئيسية من APG.
1. شكل كلاسيكيتتميز بعلامات سريرية ومخبرية لانحلال الدم داخل الأوعية الدموية دون علامات لأمراض أخرى مرتبطة بفشل نخاع العظام (فقر الدم اللاتنسجي (AA) ، متلازمة خلل التنسج النقوي (MDS) ، تليف نخاع العظم مجهول السبب).
2. تشخيص PNH في مرضى AA (AA / PNG) ،MDS (MDS / APG)ونادرًا ما يصاب بالتليف النقوي (تليف نخاع العظم) (تليف نخاع العظم مجهول السبب / PNH) ،عندما يكون لهذه الأمراض علامات سريرية و / أو معملية على انحلال الدم داخل الأوعية الدموية ، ويتم تحديد استنساخ خلية مع النمط الظاهري PNH في الدم المحيطي.
3. شكل تحت الإكلينيكيالأمراض ( AA / cPNG ، MDS / cPNG ، التليف النقوي مجهول السبب / cPNG)، يتم تشخيصه في المرضى الذين ليس لديهم علامات سريرية ومخبرية لانحلال الدم ، ولكن في وجود استنساخ ثانوي من الخلايا ذات النمط الظاهري PNH (عادةً<1 %). Следует отметить, что субклиническое течение ПНГ может отмечаться и при большем размере клона.

إن عزل الشكل تحت الإكلينيكي لـ PNH ليس له أهمية سريرية مستقلة ، ولكن من الضروري ضمان مراقبة هؤلاء المرضى فيما يتعلق باحتمالية زيادة حجم الاستنساخ وتطور انحلال الدم ، والتي قد تهيمن بين المظاهر السريرية وتتطلب العلاج المناسب.
مع الأخذ في الاعتبار أن الشكل تحت الإكلينيكي لـ PNH في AA و / أو MDS ليس له أهمية سريرية مستقلة.

الشكل الكلاسيكي لـ APG.
في المرضى الذين يعانون من PNH الكلاسيكي ، كقاعدة عامة ، لوحظ انحلال الدم داخل الأوعية الدموية مع زيادة في مستوى اللاكتات ديهيدروجينيز (LDH) في مصل الدم ، وكثرة الخلايا الشبكية ، وانخفاض في مستوى الهابتوغلوبين. في هذا البديل من PNH ، لا توجد علامات مورفولوجية محددة لأمراض نخاع العظام الأخرى (AA ، MDS ، تليف نخاع العظم) ولا توجد تشوهات في النمط النووي

PNH على خلفية متلازمات قصور نخاع العظم (AA / PNH ، MDS / PNH).
يتم تشخيص المرضى الذين يعانون من AA / PNH و MDS / PNH بعلامات سريرية ومخبرية لانحلال الدم داخل الأوعية الدموية. في مراحل مختلفة من تطور المرض ، قد تسود أعراض فشل نخاع العظم أو انحلال الدم داخل الأوعية الدموية ، وفي بعض الحالات يكون هناك مزيج منهما. على الرغم من حقيقة أنه في المرضى الذين يعانون من استنساخ PNH صغير ، فإن المرض عادة ما يستمر مع الحد الأدنى من الأعراض ويلاحظ فقط العلامات المختبرية لانحلال الدم داخل الأوعية الدموية ، والمراقبة ضرورية (مرتين في السنة). ويرجع ذلك إلى حقيقة أن توسع الاستنساخ ممكن بمرور الوقت مع تطور انحلال الدم الشديد وارتفاع مخاطر حدوث مضاعفات الجلطة.

الشكل تحت السريري لـ APG (AA / sPNG ، MDS / sPNG).
المرضى الذين يعانون من PNH تحت الإكلينيكي ليس لديهم أي دليل سريري أو معمل على انحلال الدم. لا يمكن اكتشاف مجموعات صغيرة من الخلايا التي تعاني من نقص GPIAP إلا باستخدام قياس التدفق الخلوي عالي الحساسية. يمكن تشخيص PNH تحت الإكلينيكي على خلفية الأمراض التي تتميز بخلل في النخاع العظمي ، بشكل رئيسي AA و MDS. من المهم جدًا مراقبة هؤلاء المرضى بعناية من أجل اكتشاف علامات انحلال الدم وتوسع الاستنساخ ، منذ 15-17٪ من المرضى مع AA / PNH تحت الإكلينيكي مع مرور الوقت يتطور الشكل الانحلالي لـ AA / PNH.

التشخيص

قائمة تدابير التشخيص الأساسية والإضافية:
الفحوصات التشخيصية الأساسية (الإلزامية) التي يتم إجراؤها في العيادات الخارجية:
فحص الدم العام (عد الخلايا الشبكية في اللطاخة) ؛
· التنميط المناعي للدم المحيطي لتحديد نسبة PNH في كريات الدم الحمراء من الأنواع الأول والثاني والثالث عن طريق قياس التدفق الخلوي.
· فحص الدم البيوكيميائي (البيليروبين الكلي ، البيليروبين المباشر ، LDH).
· اختبار كومبس.
· تصوير النخاع.

إجراء فحوصات تشخيصية إضافية على مستوى العيادات الخارجية:



· تحديد تركيز حمض الفوليك وفيتامين ب 12.
· مخطط تجلط الدم.
· الفحص الوراثي الخلوي القياسي لنخاع العظام.
· تحليل البول العام
إليسا لعلامات التهاب الكبد الفيروسي ؛
• إليسا لعلامات فيروس نقص المناعة البشرية ؛
· إليسا لعلامات فيروسات مجموعة الهربس.
· HLA - الكتابة.
تخطيط كهربية القلب.
· الموجات فوق الصوتية لأعضاء البطن (الكبد ، الطحال ، البنكرياس ، المرارة ، العقد الليمفاوية ، الكلى ، عند النساء - الحوض الصغير.

الحد الأدنى من قائمة الفحوصات التي يجب إجراؤها عند الإشارة إلى الاستشفاء المخطط له:
فحص الدم العام (عد الكريات البيض والصفائح الدموية والخلايا الشبكية في اللطاخة) ؛
تصوير النخاع.
فصيلة الدم وعامل الريسوس
· فحص الدم البيوكيميائي (البروتين الكلي ، الألبومين ، البيليروبين الكلي ، البيليروبين المباشر ، الكرياتينين ، اليوريا ، ALaT ، ASaT ، GGTP ، الجلوكوز ، LDH ، البروتين التفاعلي C ، الفوسفاتاز القلوي).
· اختبار كومبس.
• الموجات فوق الصوتية لتجويف البطن والطحال.
· الموجات فوق الصوتية لأعضاء الحوض - للنساء.

الفحوصات التشخيصية الأساسية (الإلزامية) التي يتم إجراؤها على المستوى الثابت:

فحص الدم العام (عد الكريات البيض والصفائح الدموية والخلايا الشبكية في اللطاخة) ؛
- التنميط المناعي للدم المحيطي لتحديد نسبة PNH في كريات الدم الحمراء من الأنواع الأول والثاني والثالث عن طريق قياس التدفق الخلوي ؛
- فحص الدم البيوكيميائي (البيليروبين الكلي ، البيليروبين المباشر ، LDH) ؛
- اختبار كومبس
- تصوير النخاع.
- الفحص الوراثي الخلوي القياسي لنخاع العظام ؛
- إليسا لعلامات التهاب الكبد الفيروسي ؛
- ELISA لعلامات فيروس نقص المناعة البشرية ؛
- إليسا لعلامات فيروسات الهربس.
· أشعة لأعضاء الصدر.
إجراء فحوصات تشخيصية إضافية على مستوى ثابت:
· تحديد مستوى الهابتوجلوبين.
· فصيلة الدم وعامل الريزوس.
· فحص الدم البيوكيميائي (البروتين الكلي ، الألبومين ، البيليروبين الكلي ، البيليروبين المباشر ، الكرياتينين ، اليوريا ، ALaT ، ASaT ، الجلوكوز ، LDH ، GGTP ، البروتين التفاعلي C ، الفوسفاتيز القلوي).
· التمثيل الغذائي للحديد (تحديد مستوى الحديد في الدم ، القدرة الكلية على الارتباط بالحديد في المصل ومستوى الفيريتين).
· تحديد تركيز حمض الفوليك وفيتامين ب 12.
· مخطط تجلط الدم.
· HLA - الكتابة.
· تحليل البول العام.
· تحديد مستوى الهيموسيديرين في البول.
· اختبار Reberg-Tareev (تحديد معدل الترشيح الكبيبي).
تخطيط كهربية القلب.
· الموجات فوق الصوتية لأعضاء البطن (الكبد ، الطحال ، البنكرياس ، المرارة ، العقد الليمفاوية ، الكلى ، عند النساء - الحوض الصغير.
· الأشعة السينية الصدر؛
· USDG للشرايين والأوردة.
· تخطيط صدى القلب.
EGDS (تمدد أوردة المريء) ؛
· المراقبة اليومية لضغط الدم.
· مراقبة تخطيط القلب على مدار 24 ساعة.

إجراءات التشخيص المنفذة في مرحلة الرعاية الطبية الطارئة:
· جمع الشكاوى وسجلات المرض.
· الفحص البدني.

معايير التشخيص للتشخيص:

الشكاوى والسوابق:
- ضعف؛
- التعب السريع.


- زيادة النزيف.

سوابق المريض: يجب الانتباه إلى:
- ضعف طويل الأمد ؛
- التعب السريع
- الأمراض المعدية المتكررة.
- نوبات ألم حادة في منطقة أسفل الظهر.
- سواد البول ، خاصة في الليل وفي الصباح ؛
- متلازمة بود تشياري (تجلط الأوردة الكبدية).
- تجلط مختلف المواقع.
- زيادة النزيف.
- ظهور طفح جلدي نزفي على الجلد والأغشية المخاطية.
- محاسبة مستوصف AA أو MDS.

الفحص البدني[ 8 ]:
- مزيج من الشحوب والصفرة في الجلد.
- الطفح الجلدي النزفي - نمشات ، كدمات من مواقع مختلفة ؛
ضيق في التنفس؛
- عدم انتظام دقات القلب
- تضخم الكبد.
- تضخم الطحال.

البحث المخبري:
في حالة الاشتباه في وجود PNH ، يوفر قياس التدفق الخلوي تشخيصًا دقيقًا. يعد قياس التدفق الخلوي هو الطريقة الأكثر حساسية وإفادة.
· تحليل الدم العام:عادة ما يزداد عدد الخلايا الشبكية ، ولا تختلف كريات الدم الحمراء شكليًا عن القاعدة وفقًا لمسحات الدم المحيطية. نتيجة لانحلال الدم ، غالبًا ما تكون الأرومة السوية موجودة في الدم ، ويلاحظ تعدد الألوان. نتيجة الفقد الكبير للحديد في البول في مرضى الهيموغلوبين النيلي ، هناك احتمال كبير للإصابة بنقص الحديد ، ومن ثم تكتسب كريات الدم الحمراء المظهر المميز لـ IDA - ناقص الصبغة مع ميل إلى كثرة الكريات الصغرى. عدد الكريات البيض والصفائح الدموية هو في كثير من الأحيان. يمكن أيضًا ملاحظة قلة الكريات الشاملة متفاوتة الشدة. ومع ذلك ، على عكس فقر الدم اللاتنسجي ، تحدث كثرة الشبكيات عادة مع قلة الكريات البيض.
· كيمياء الدم:في مصل الدم ، تزداد كمية البيليروبين والهيموغلوبين الحر والميثيموغلوبين. هناك علامات على انحلال الدم داخل الأوعية الدموية ، أي انخفاض أو عدم وجود هابتوغلوبين ، وزيادة في LDH ، وزيادة مستوى الهيموغلوبين والحديد في البول. لوحظ انخفاض مستويات الهابتوجلوبين باستمرار مع انحلال الدم داخل الأوعية الدموية ، ولكنه يحدث أيضًا في حالات انحلال الدم خارج الأوعية الدموية ، وخاصة المزمنة. نظرًا لأن الهابتوغلوبين هو أيضًا كاشف طور حاد ، فإن انخفاضه الحاد أو غيابه يكون مفيدًا للغاية.
· في البول:يمكن تحديد بيلة دموية وبروتينية. البول الدموي واكتشاف مخلفات الدم في البول هي علامات ثابتة للقيمة التشخيصية.
· البحث المورفولوجي:تم الكشف عن تضخم الغدة الدرقية في نخاع العظام. في كثير من الأحيان ، يتم تحديد نقص تنسج نخاع العظم ، ومحتوى منخفض من الخلايا الحديدية والأرومات الحديدية.
· التنميط المناعي: يعد التعبير المبكر والموثوق عن النمط الظاهري لـ PNH هو التعبير عن البروتينات المرتبطة بـ GPI: يتم تحديد التعبير عن CD14 و CD48 على الخلايا الوحيدة ، CD16 و CD66b - على الخلايا الحبيبية ، CD48 و CD52 - على الخلايا الليمفاوية ، CD55 و CD59 - على كريات الدم الحمراء ، CD55 ، CD58.

البحث الآلي:
· الموجات فوق الصوتية لأعضاء البطن: زيادة حجم الكبد والطحال.
· تصوير الشرايين والأوردة بالموجات فوق الصوتية دوبلر:وجود تجلط في الشرايين والأوردة
· تخطيط كهربية القلب: انتهاك لتوصيل النبضات في عضلة القلب.
· EchoCG:علامات قصور القلب (EF<60%), снижение сократимости, диастолическая дисфункция, легочная гипертензия, пороки и регургитации клапанов.
· التصوير المقطعي المحوسب / التصوير بالرنين المغناطيسي للجسم كله:الكشف عن تجلط الدم (المخ ، البوابة ، إلخ)
· التصوير المقطعي للجزء الصدري:تغيرات ارتشاحية في أنسجة الرئة ، علامات ارتفاع ضغط الدم الرئوي.
· FGDS: دوالي المريء.
· تصوير التنفس: اختبار وظائف الرئة.

مؤشرات لاستشارة المتخصصين الضيقين:
· طبيب لتشخيص وعلاج الأوعية الدموية الداخلية - وضع قسطرة وريدية مركزية من منفذ طرفي (PICC) ؛
· أخصائي أمراض الكبد - لتشخيص وعلاج التهاب الكبد الفيروسي.
· طبيب أمراض النساء - الحمل ، النزيف الرحمي ، غزارة الطمث ، استشارة عند وصف موانع الحمل الفموية المركبة ؛
طبيب الجلدية والتناسلية - متلازمة الجلد
· أخصائي الأمراض المعدية - الالتهابات الفيروسية المشتبه بها.
· طبيب قلب - ارتفاع ضغط الدم غير المنضبط ، قصور القلب المزمن ، نظم القلب واضطرابات التوصيل.
· أمراض الأعصاب الحادة والأوعية الدموية الدماغية والتهاب السحايا والتهاب الدماغ واللوكيميا العصبية.
· جراح الأعصاب - اضطراب حاد في الدورة الدموية الدماغية ، متلازمة الخلع.
· أخصائي أمراض الكلى - الفشل الكلوي.
· طبيب الأورام - اشتباه الأورام الصلبة.
أخصائي أنف وأذن وحنجرة - لتشخيص وعلاج الأمراض الالتهابية للجيوب الأنفية والأذن الوسطى.
طبيب عيون - ضعف البصر والأمراض الالتهابية في العين والملاحق.
· أخصائي أمراض المستقيم والشرج - الشق الشرجي ، التهاب الشبكية.
• طبيب نفساني - ذهان.
· طبيب نفساني - اكتئاب ، فقدان الشهية ، إلخ.
· أخصائي العناية المركزة - علاج الإنتان الشديد والصدمة الإنتانية ومتلازمة الإصابة الرئوية الحادة مع متلازمة التمايز والحالات النهائية وتركيب القسطرة الوريدية المركزية.
· أخصائي أمراض الروماتيزم - متلازمة سويت.
· جراح الصدر - التهاب الجنبة النضحي ، استرواح الصدر ، داء الزيجوميك الرئوي.
· اختصاصي نقل الدم - لاختيار وسائط نقل الدم مع اختبار مضاد الغلوبولين الإيجابي غير المباشر ، وعدم فعالية عمليات نقل الدم ، وفقدان الدم الشديد الحاد ؛
طبيب المسالك البولية - الأمراض المعدية والتهابات الجهاز البولي.
· طبيب أمراض الدم - يشتبه في إصابته بالسل.
· الجراح - المضاعفات الجراحية (معدية ، نزفية).
· جراح الوجه والفكين - الأمراض المعدية والتهابات جهاز الأسنان والفك.

تشخيص متباين

تشخيص متباين.
يتم إجراء التشخيص التفريقي مع أنواع أخرى من فقر الدم الانحلالي ومع PNH السيتوبيني - مع فقر الدم اللاتنسجي.

فقر الدم بعوز B-12.غالبًا ما تكون هناك حاجة للتشخيص التفريقي لـ PNH الذي يحدث مع قلة الكريات الشاملة وانحلال الدم ، مع فقر الدم بعوز B12 مع متلازمة الانحلال. في كلا هذين المرضين ، يكون انحلال الدم واضحًا تمامًا. يتم عرض الاختلافات بين هذه الأمراض في الجدول:

طاولة. الاختلافات التشخيصية التفاضلية بين فقر الدم بعوز B12 و PNH.

علاج

أهداف العلاج:
تحقيق مغفرة والحفاظ عليها (انظر النقطة 15 - مؤشرات فعالية العلاج).

تكتيكات العلاج:
العلاج غير الدوائي:
الوضع الثاني:الحماية العامة.
حمية غذائية:لا يُنصح مرضى العدلات باتباع نظام غذائي محدد ( مستوى الدليل ب).

العلاج الطبي.
يظهر في الشكل الخوارزمية العامة لعلاج مرضى الهيموغلوبين النيلي ، اعتمادًا على شكل المرض وشدة انحلال الدم.

خوارزمية لعلاج مرضى PNH.


علاج إكليزوماب.
Eculizumab هو جسم مضاد أحادي النسيلة متوافق مع البشر يرتبط بمكون C5 من المكمل. هذا يمنع انقسام C5 إلى C5a و C5b ، وبالتالي يمنع تكوين السيتوكينات المسببة للالتهابات (عبر C5a) و MAC (عبر C5b).
يوجد حاليًا دراسة TRIUMPH متعددة المراكز وعشوائية ومزدوجة التعمية وخاضعة للتحكم الوهمي قيمت فعالية عقار الإيكوليزوماب في تثبيت مستويات الهيموغلوبين وتقليل الاعتماد على نقل الدم في 87 مريضًا يعتمدون على نقل الدم خلال 6 أشهر من العلاج.
شملت الدراسة المرضى الذين تزيد أعمارهم عن 18 عامًا والذين خضعوا لما لا يقل عن 4 عمليات نقل للوسائط المحتوية على كريات الدم الحمراء في العام الماضي ، مع استنساخ من النوع الثالث من خلايا الدم الحمراء PNH بنسبة 10 ٪ على الأقل ، ومستوى الصفائح الدموية على الأقل 100 ألف / ميكرولتر ، وزيادة LDH من ³1.5 عادي. تلقى جميع المرضى لقاح المكورات السحائية قبل بدء العلاج.
كانت النتيجة الرئيسية للدراسة هي استقرار مستوى الهيموجلوبين في 49٪ من المرضى الذين عولجوا مع عقار الإيكوليزوماب (p<0,001) и снижение необходимости в трансфузиях в этой группе до нуля (в группе плацебо за 6 месяцев потребовалось от 6 до 16 трансфузий), а также улучшение качества жизни.
كانت نتائج هذه الدراسة بمثابة أساس لموافقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية على استخدام عقار الإيكوليزوماب في PNH المعتمد على نقل الدم مع انحلال الدم.
بحث بواسطة R. Hillmen et al. والدراسات المستقبلية اللاحقة لها قيود معينة تجعل من الصعب استقراء نتائجها لجميع مرضى PNH ، والتي تم تفصيلها في تقرير FDA ومراجعة Cochrane بواسطة Arturo J Martí-Carvajal:
· تم فحص الفعالية فقط في المرضى الذين تزيد أعمارهم عن 18 سنة.
· البيانات الخاصة بالمرضى المسنين محدودة أيضًا (15 مريضًا فقط في الدراسة تجاوزوا 65 عامًا) ؛
- شملت الدراسة فقط المرضى المعتمدين على نقل الدم والذين يعانون من انحلال الدم.
· قلة عدد المرضى الذين يعانون من نوبات الجلطة ، والتكرار العالي لوصف العلاج الوقائي المضاد للتخثر لا يسمح بتقييم تأثير عقار إيكوليزوماب على خطر حدوث مضاعفات الجلطة والتوصية بالتوقف عن استخدام مضادات التخثر في المرضى الذين يتلقون عقار إيكوليزوماب. الانخفاض النسبي في حدوث نوبات التخثر على خلفية العلاج الوقائي بمضادات التخثر وعلاج الإيكوليزوماب هو 81 ٪ ؛
· لم يتم التحقق من صحة استبيان جودة الحياة المستخدم لمرضى الهيموغلوبين التوليفي الطبيعي ، والتحسن في نوعية الحياة لا يمكن أن يرتبط إلا بزيادة في مستويات الهيموجلوبين.
· فترة مراقبة قصيرة.
- تمت رعاية الدراسة من قبل الشركة المصنعة للدواء.
· لا توجد بيانات حول تأثير عقار إيكوليزوماب مقابل الدواء الوهمي على البقاء على قيد الحياة بشكل عام ، وخطر التحول إلى AML و MDS. تم إظهار زيادة في البقاء الكلي في دراسة تاريخية واحدة فقط (الفترة 1997-2004). في عام 2013 ، تم نشر بيانات من ثلاث دراسات مستقبلية لـ 195 مريضًا مصابًا بـ PNH وانحلال الدم وأظهرت معدل بقاء 97.6٪ عند 36 شهرًا ، ولكن لم تكن هناك مقارنة مع مجموعة الدواء الوهمي.
· محدودية البيانات حول استخدام عقار إيكوليزوماب لدى النساء الحوامل. يزيد الحمل من حدوث المضاعفات الخطيرة التي تهدد الحياة من PNH. هناك احتمال كبير أن يعبر عقار إيكوليزوماب حاجز الدم المشيمي وحليب الثدي. نظرًا لندرة المرض ، لا توجد حاليًا دراسات مضبوطة حول فعالية عقار الإيكوليزوماب في النساء الحوامل. تم وصف حالتين من حالات وصف عقار الإيكوليزوماب للحوامل من 4 إلى 5 أسابيع من الحمل ، تلاهما مسار غير معقد للحمل وولادة أطفال أصحاء
· حتى مع العلاج طويل الأمد الذي يستمر حوالي 30 شهرًا ، يظل حوالي 18٪ من المرضى معتمدين على نقل الدم. التفسير المحتمل لهذه الظاهرة هو المشاركة في عمليات انحلال الدم داخل الأوعية الدموية لـ C3 للجزء التكميلي ، والذي لا يمنعه إيكوليزوماب.

يمكن التوصية بـ Eculizumab لإدراجها في برنامج العلاج للفئات التالية من المرضى الذين يعانون من PNH الكلاسيكي فوق سن 18 عامًا:
الاعتماد على نقل الدم بسبب انحلال الدم المزمن ( مستوى الدليل أ);
وجود مضاعفات الجلطة ( مستوى الأدلةد);
الحمل عند مرضى PNH ( مستوى الأدلةد).

عند تحديد مؤشرات العلاج بـ eculizumab ، لا ينبغي للمرء أن يأخذ في الاعتبار مستوى LDH فقط.

طريقة التطبيق والجرعة من عقار إيكوليزوماب
يتم إعطاء الدواء عن طريق الوريد ، بالتنقيط ، في غضون 25-45 دقيقة - للبالغين.
يتضمن مسار العلاج دورة أولية مدتها 4 أسابيع تليها دورة صيانة. الدورة الأولية هي 600 ملغ من الدواء مرة واحدة في الأسبوع لمدة 4 أسابيع. علاج الصيانة - 900 مجم في الأسبوع الخامس ، يليها إدخال 900 مجم من الدواء كل (14 ± 2) يوم.

انحلال الدم "الاختراق".
النظام المعياري للعلاج بالأكوليزوماب كافٍ للحصار الكامل والمستقر لانحلال الدم التكميلي. في بعض المرضى ، بسبب
قد تتطور خصائص التمثيل الغذائي للدواء أو العدوى إلى انحلال دم "اختراق". في هذه الحالة ، تظهر علامات انحلال الدم في 2-3 أيام.
قبل الإدارة القادمة من عقار إيكوليزوماب. قد يصاب المرضى ببول الهيموجلوبين ، ويعيدون الأعراض الأصلية (ضيق التنفس ، والضعف ، وتشنج العضلات الملساء ، وما إلى ذلك) ، والحاجة إلى عمليات نقل الدم ، وزيادة مستوى LDH ، والخلايا الشبكية وانخفاض مستوى الهبتوغلوبين. يتضمن علاج انحلال الدم الاختراقي تقليل الفترة الفاصلة بين حقن إيكوليزوماب إلى 12 يومًا أو زيادة الجرعة إلى 1200 مجم بمقدار 1-2 حقنة.

الوقاية والعلاج من عدوى المكورات السحائية.
أثناء العلاج باستخدام eculizumab ، من الضروري التحكم في ظهور أعراض العدوى والالتهابات البكتيرية ، ووصف المضادات الحيوية في الوقت المناسب. عند تشخيص عدوى المكورات السحائية ، يتم إلغاء الإدارة التالية للدواء.
تشير آلية عمل عقار eculizumab إلى زيادة خطر الإصابة بعدوى المكورات السحائية ( النيسرية السحائية) على خلفية استخدامه (مستوى الدليل ب).
يحتاج جميع المرضى إلى التطعيم ضد المكورات السحائية قبل أسبوعين من بدء العلاج ، وكذلك إعادة التطعيم بين 2.5-3 سنوات من العلاج. الأكثر تفضيلاً هو لقاح متقارن رباعي التكافؤ ضد الأنماط المصلية A و C و Y و W135. في حالة الحاجة الملحة إلى علاج إيكوليزوماب في مريض غير مُلقح ، من الممكن بدء العلاج بالوقاية من المضادات الحيوية المناسبة ، والتي يجب أن تستمر لمدة أسبوعين بعد التطعيم ضد عدوى المكورات السحائية.

علاج الأعراض.
في علاج إيكوليزوماب ، يشمل علاج الأعراض تعيين حمض الفوليك (5 ملغ / يوم) ، وفيتامين ب 12 (مع نقص) ، ومستحضرات الحديد (مع نقص) ، ومضادات التخثر (الوارفارين ، والهيبارين منخفض الوزن الجزيئي) لمضاعفات التخثر ، نقل منتجات الدم اعتمادًا على الأعراض السريرية ، والإماهة مع تطور أزمة انحلال الدم. يجب أن توصف مستحضرات الحديد بحذر بسبب احتمال زيادة انحلال الدم.

العلاج المضاد للتخثر.
بعد حدوث الجلطة ، قد يوصى بالعلاج طويل الأمد (مدى الحياة) بمضادات التخثر (مشتقات الكومارين أو الهيبارين). يتطلب علاج متلازمة بود تشياري أن يكون المريض في قسم جراحي متخصص من أجل تحلل الجلطات الموضعي والجهازي. يمكن الإشارة إلى العلاج المضاد للتخثر للوقاية الأولية من تجلط الدم في بعض الحالات عندما يتم الكشف عن استنساخ PNH في 50 ٪ من الخلايا المحببة وفي وجود مخاطر إضافية لمضاعفات التخثر ، باستثناء المرضى الذين يعانون من عدم تنسج نخاع العظم.

دعم نقل الدم.
مؤشرات لنقل مكونات الدم:

تعليق / كتلة كرات الدم الحمراء.
· فيما يتعلق بتعليق / كتلة كريات الدم الحمراء ، فإن الاختيار حسب فصيلة الدم وعامل Rh ضروري.
· فيما يتعلق بالمرضى الذين لديهم عمليات نقل دم متعددة في التاريخ ، فمن المستحسن اختيار المستضدات التالية: Kell ، Duffy ، Kidd ، MNSs ؛
· مباشرة قبل نقل الدم المعلق / الكتلة في كرات الدم الحمراء ، من الضروري إجراء اختبار للتوافق مع الأمصال القياسية ؛
مؤشرات العتبة التي يتم عندها اعتبار الحاجة لنقل الدم لتعليق / كتلة كرات الدم الحمراء: Hb<80 г/мл, Ht <25%;
· يتم حساب الحجم الأقصى لتعليق / كتلة كرات الدم الحمراء بالصيغة التالية: Hb (g / dl) x4 x وزن المستقبِل (kg).

تركيز الصفائح الدموية.
· يجب اختيار تركيز الصفائح الدموية وفقًا لفصيلة الدم وعامل Rh.
يتم نقل مركز الصفائح الدموية لمنع النزيف على مستوى Tr<10 тыс кл/мкл;
بالنسبة للمرضى الذين يعانون من الحمى ونزيف الأغشية المخاطية ، يوصى بنقل تركيز الصفائح الدموية في Tr<20 тыс кл/мкл;
عند التخطيط لتدخل غازي لمريض ، يوصى بنقل تركيز الصفائح الدموية في Tr<50 тыс кл/мкл;
- الجرعة العلاجية للصفائح الدموية للبالغين: 3 × 10 11 خلية / لتر بحجم 200-300 مل.

تقييم فعالية نقل الدم:
· وقف النزيف.
تحديد مستوى الصفائح الدموية في اليوم التالي - مستوى Tr المستمر<20 тыс кл/мкл свидетельствует о рефрактерности к трансфузиям;
إذا تم استبعاد جميع أسباب قلة الصفيحات ، فمن الضروري اختبار وجود الأجسام المضادة لكرات الدم البيضاء ؛
· إذا تم الكشف عن الأجسام المضادة ، يجب إجراء نقل الصفائح الدموية من متبرع متوافق مع HLA.

بلازما طازجة مجمدة.
نظرًا لأن FFP يحتوي على مكمل ، فإن نقله يمكن أن يثير تطور انحلال الدم لدى مرضى PNH. يجب تجنب نقل FFP في PNH.

العلاج الطبي المقدم في العيادة الخارجية:
- قائمة الأدوية الأساسية مع بيان شكل الإطلاق (مع احتمال استخدام 100٪):

الأدوية المضادة للأورام والمناعة
... eculizumab * 300 مجم ، مركز لمحلول التسريب ، 10 مجم / مل.

Filgrastim ، محلول للحقن 0.3 مجم / مل ، 1 مل ؛
- أوندانسيترون محلول للحقن 8 مجم / 4 مل.

عوامل مضادة للجراثيم
أزيثروميسين أقراص / كبسولة ، 500 مجم
أموكسيسيلين / حمض كلافولانيك ، أقراص مغلفة بالفيلم ، 1000 مجم ؛
أقراص موكسيفلوكساسين ، 400 ملغ
أوفلوكساسين ، أقراص ، 400 ملغ ؛
قرص سيبروفلوكساسين ، 500 مجم ؛
ميترونيدازول أقراص 250 مجم ، جل أسنان 20 جم ؛
إريثروميسين 250 مجم أقراص.

Anidulafungin ، مسحوق مجفف بالتجميد لمحلول الحقن ، 100 مجم / قارورة ؛



كلوتريمازول ، محلول للاستخدام الخارجي 1٪ 15 مل ؛

كبسولة فلوكونازول 150 مجم.

Acyclovir ، قرص ، 400 مجم ، هلام في أنبوب 100000 ED 50 جم ؛


أقراص فامسيكلوفير ، 500 مجم

الحلول المستخدمة لتصحيح انتهاكات توازن الماء والكهارل والحمض القاعدي

دكستروز ، محلول للتسريب 5٪ 250 مل.
· كلوريد الصوديوم محلول للتسريب 0.9٪ 500 مل.

الهيبارين ، محلول للحقن 5000 وحدة دولية / مل ، 5 مل ؛ (لغسل القسطرة)

قرص Rivaroxaban
كبسولة حمض الترانيكساميك / قرص 250 مجم ؛

أمبروكسول ، محلول للإعطاء عن طريق الفم والاستنشاق ، 15 مجم / 2 مل ، 100 مل ؛

أقراص أتينولول 25 ملجم



Drotaverine ، قرص 40 ملغ ؛


ليفوفلوكساسين أقراص ، 500 ملغ

ليسينوبريل ، قرص 5 ملغ ؛
قرص ميثيل بريدنيزولون ، 16 ملغ ؛

أوميبرازول ، كبسولة 20 ملغ ؛

بريدنيزولون ، أقراص ، 5 ملغ ؛
· السميكتايت ثنائي الاوكتاهدال ، مسحوق لتحضير المعلق للإعطاء عن طريق الفم ، 3.0 غرام ؛

Torasemide ، قرص 10 ملغ ؛
الفنتانيل ، نظام عبر الجلد العلاجي 75 ميكروغرام / ساعة ؛ (لعلاج الآلام المزمنة لدى مرضى السرطان)

علاج المخدرات للمرضى الداخليين:
- قائمة الأدوية الأساسية مع بيان شكل الإطلاق (مع احتمال استخدام 100٪):

Eculizumab * 300 مجم ، مركز لمحلول التسريب ، 10 مجم / مل.

- قائمة الأدوية الإضافية مع الإشارة إلى شكل الإطلاق (احتمال الاستخدام أقل من 100٪):

الأدوية التي تضعف التأثير السام للأدوية المضادة للسرطان
... filgrastim ، محلول للحقن 0.3 مجم / مل ، 1 مل ؛
... أوندانسيترون ، محلول للحقن 8 مجم / 4 مل.

عوامل مضادة للجراثيم
أزيثروميسين ، قرص / كبسولة ، 500 مجم ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول للتسريب في الوريد ، 500 مجم ؛
أميكاسين ، مسحوق للحقن ، 500 مجم / 2 مل أو مسحوق لتحضير محلول الحقن ، 0.5 جم ؛
أموكسيسيلين / حمض كلافولانيك ، قرص مغلف بالفيلم ، 1000 مجم ، مسحوق لتحضير محلول للإعطاء عن طريق الوريد والعضل 1000 مجم + 500 مجم ؛
مسحوق فانكومايسين / lyophilisate لتحضير محلول للتسريب 1000 مجم ؛
· جنتاميسين ، محلول للحقن 80 مجم / 2 مل 2 مل ؛
Imipinem ، مسحوق cilastatin لمحلول التسريب ، 500 مجم / 500 مجم ؛
· كوليستيميثات الصوديوم * ، lyophilisate لتحضير محلول التسريب 1 مليون وحدة / قارورة ؛
· قرص ميترونيدازول 250 ملغ ، محلول للتسريب 0.5٪ 100 مل ، جل أسنان 20 غ ؛
ليفوفلوكساسين ، محلول للتسريب 500 مجم / 100 مل ، قرص 500 مجم ؛
Linezolid ، محلول للتسريب 2 مجم / مل ؛
Meropenem ، lyophilisate / مسحوق لمحلول الحقن 1.0 جم ؛
موكسيفلوكساسين أقراص 400 ملغ ، محلول للتسريب 400 ملغ / 250 مل
أوفلوكساسين ، أقراص 400 مجم ، محلول للتسريب 200 مجم / 100 مل ؛
Piperacillin ، مسحوق تازوباكتام لتحضير محلول الحقن 4.5 جم ؛
Tigecycline * ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول للحقن 50 مجم / قارورة ؛
Ticarcillin / clavulanic acid ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول التسريب 3000mg / 200mg ؛
مسحوق Cefepime لمحلول الحقن 500 مجم ، 1000 مجم
· سيفوبيرازون ، مسحوق سولباكتام لمحلول الحقن 2 غرام ؛
سيبروفلوكساسين ، محلول للتسريب 200 ملغ / 100 مل ، 100 مل ، 500 ملغ لوحي ؛
إريثروميسين 250 مجم أقراص
إرتابينيم lyophilisate ، لتحضير محلول للحقن الوريدي والعضلي من 1 جم.

الأدوية المضادة للفطريات
أمفوتريسين ب * ، مسحوق مجفف بالتجميد لمحلول الحقن ، 50 مجم / قارورة ؛
Anidulofungin ، مسحوق مجفف بالتجميد لمحلول الحقن ، 100 مجم / قارورة ؛
Voriconazole ، مسحوق لمحلول التسريب 200 مجم / قارورة ؛
قرص Voriconazole ، 50 مجم ؛
إيتراكونازول ، محلول فموي 10 ملغ / مل 150.0 ؛
Caspofungin ، lyophilisate لتحضير محلول للتسريب 50 مجم ؛
· كلوتريمازول كريم للاستخدام الخارجي 1٪ 30 جم محلول خارجي 1٪ 15 مل.
Micafungin ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول للحقن 50 مجم ، 100 مجم ؛
فلوكونازول ، كبسولة / قرص 150 ملغ ، محلول للتسريب 200 ملغ / 100 مل ، 100 مل.

الأدوية المضادة للفيروسات
Acyclovir ، كريم للاستخدام الخارجي ، 5٪ - 5.0 ، قرص - 400 مجم ، مسحوق لمحلول التسريب ، 250 مجم ؛
قرص فالاسيكلوفير ، 500 ملغ ؛
فالغانسيكلوفير أقراص 450 ملغ
Ganciclovir * ، lyophilisate لتحضير محلول التسريب 500mg ؛
فامسيكلوفير أقراص ، 500 مجم رقم 14.

الأدوية المستخدمة في علاج تكيسات الرئة
سلفاميثوكسازول / تريميثوبريم ، مركز لمحلول التسريب (80 مجم + 16 مجم) / مل ، 5 مل ؛
سلفاميثوكسازول / تريميثوبريم ، قرص 480 مجم.

الأدوية المثبطة للمناعة الإضافية:
ديكساميثازون ، محلول للحقن 4 مجم / مل 1 مل ؛
ميثيل بريدنيزولون ، قرص 16 مجم ، حقن 250 مجم ؛
بريدنيزولون ، محلول للحقن 30 ملغ / مل 1 مل ، قرص 5 ملغ.

الحلول المستخدمة لتصحيح انتهاكات توازن الماء والكهارل وتوازن الحمض القاعدي والتغذية الوريدية
· الألبومين ، محلول للتسريب 10٪ ، 100 مل.
- الزلال: محلول للتسريب 20٪ 100 مل.
· ماء للحقن ، محلول للحقن 5 مل.
دكستروز ، محلول للتسريب 5٪ - 250 م ، 5٪ - 500 مل ؛ 40٪ - 10 مل ، 40٪ - 20 مل ؛
كلوريد البوتاسيوم ، محلول للإعطاء في الوريد 40 مجم / مل ، 10 مل ؛
غلوكونات الكالسيوم ، محلول للحقن 10٪ ، 5 مل.
· كلوريد الكالسيوم محلول للحقن 10٪ 5 مل.
كبريتات المغنيسيوم ، محلول للحقن 25٪ 5 مل ؛
· مانيتول ، محلول للحقن 15٪ -200.0 ؛
كلوريد الصوديوم ، محلول للتسريب 0.9٪ 500 مل ؛
· كلوريد الصوديوم ، محلول للتسريب 0.9٪ 250 مل ؛
· كلوريد الصوديوم ، كلوريد البوتاسيوم ، محلول حمض أسيتيك الصوديوم للتسريب في قارورة 200 مل ، 400 مل ؛
· كلوريد الصوديوم ، كلوريد البوتاسيوم ، محلول أسيتات الصوديوم للتسريب 200 مل ، 400 مل ؛
كلوريد الصوديوم ، كلوريد البوتاسيوم ، محلول بيكربونات الصوديوم للتسريب 400 مل ؛
إل-ألانين ، إل-أرجينين ، جلايسين ، إل-هيستيدين ، إل-إيسولوسين ، إل-ليسين ، إل-ليسين هيدروكلوريد ، إل-ميثيونين ، إل-فينيل ألانين ، إل-برولين ، إل-سيرين ، إل-ثريونين ، إل-تريبتوفان ، L-tyrosine ، L-valine ، أسيتات الصوديوم ثلاثي هيدرات ، جلسيروفوسفات الصوديوم pentihydrate ، كلوريد البوتاسيوم ، كلوريد المغنيسيوم هيكساهيدرات ، الجلوكوز ، كلوريد الكالسيوم ، مستحلب زيت الزيتون وزيت فول الصويا د / إنف.
نشا هيدروكسي إيثيل (خماسي النشا) ، محلول للتسريب 6 ٪ 500 مل ؛
مجمع الأحماض الأمينية ، مستحلب للتسريب يحتوي على خليط من زيت الزيتون وزيت فول الصويا بنسبة 80:20 ، محلول من الأحماض الأمينية مع الإلكتروليتات ، محلول سكر العنب ، بقيمة إجمالية من السعرات الحرارية 1800 سعرة حرارية 1500 حاوية مل ثلاثة أقسام.

الأدوية المستخدمة في حالة teprapy الشديدة (الأدوية المقوية للقلب لعلاج الصدمة الإنتانية ، ومرخيات العضلات ، ومضادات الأوعية الدموية وأدوية التخدير):
- أمينوفيلين محلول للحقن 2.4٪ 5 ميليلتر ؛
أميودارون ، محلول للحقن ، 150 مجم / 3 مل ؛
أقراص أتينولول 25 ملجم
أتراكوريوم بيسيلات ، محلول للحقن ، 25 مجم / 2.5 مل ؛
الأتروبين ، محلول للحقن ، 1 مجم / مل ؛
ديازيبام ، محلول للإعطاء العضلي و الوريدي ، 5 ملغ / مل 2 مل.
الدوبوتامين * ، محلول للحقن 250 مجم / 50.0 مل ؛
الدوبامين ، محلول / مركز لتحضير محلول للحقن 4٪ ، 5 مل ؛
• الأنسولين البسيط.
- كيتامين محلول للحقن 500 ملغ / 10 مل.
- مورفين محلول للحقن 1٪ 1 مل.
نوربينفرين * ، محلول للحقن 20 مجم / مل 4.0 ؛
بروميد Pipecuronium ، مسحوق مجفف بالتجميد للحقن 4 ملغ ؛
- بروبوفول ، مستحلب للإعطاء عن طريق الوريد 10 ملغ / مل 20 مل ، 10 ملغ / مل 50 مل ؛
- روكورونيوم بروميد محلول عن طريق الوريد 10 ملغ / مل 5 مل.
· ثيوبنتال الصوديوم ، مسحوق لتحضير محلول للإعطاء في الوريد ، 500 ملغ.
فينيليفرين محلول للحقن 1٪ 1 مل.
فينوباربيتال ، قرص 100 ملغ ؛
· الغلوبولين المناعي البشري الطبيعي ، محلول التسريب.
الإبينفرين محلول للحقن 0.18٪ 1 مل.

الأدوية التي تؤثر على جهاز تخثر الدم
حمض أمينوكابرويك ، محلول 5٪ -100 مل ؛
· مركب مضاد للتخثر ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول الحقن ، 500 وحدة دولية ؛
الهيبارين ، محلول للحقن 5000 وحدة دولية / مل ، 5 مل ، هلام في أنبوب 100000 ED 50 جم ؛
· إسفنج مرقئ مقاس 7 * 5 * 1 ، 8 * 3 ؛
Nadroparin ، محلول للحقن في محاقن مملوءة مسبقًا ، 2850 IU anti-Xa / 0.3 ml ، 5700 IU anti-Xa / 0.6 ml ؛
Enoxaparin ، محلول للحقن في محاقن 4000 anti-Xa IU / 0.4 ml ، 8000 anti-Xa IU / 0.8 ml.

أدوية أخرى
بوبيفاكين ، محلول للحقن 5 مجم / مل ، 4 مل ؛
- ليدوكائين ، محلول للحقن ، 2٪ ، 2 مل ؛
- بروكين ، محلول للحقن 0.5٪ ، 10 مل ؛
· محلول طبيعي من الغلوبولين المناعي البشري للإعطاء عن طريق الوريد 50 مجم / مل - 50 مل ؛
أوميبرازول ، كبسولة 20 ملغ ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول للحقن 40 ملغ ؛
فاموتيدين ، مسحوق مجفف بالتجميد لتحضير محلول للحقن 20 ملغ ؛
أمبروكسول ، محلول للحقن ، 15 مجم / 2 مل ، محلول عن طريق الفم والاستنشاق ، 15 مجم / 2 مل ، 100 مل ؛
أملوديبين أقراص / كبسولة 5 ملغ ؛
Acetylcysteine \u200b\u200b، مسحوق لمحلول عن طريق الفم ، 3 جم ؛
ديكساميثازون ، قطرات للعين 0.1٪ 8 مل ؛
ديفينهيدرامين ، محلول للحقن 1٪ 1 مل ؛
- دروتافيرين ، محلول للحقن 2٪ ، 2 مل ؛
كابتوبريل 50 ملجم أقراص
- كيتوبروفين ، محلول للحقن 100 مجم / 2 مل.
لاكتولوز ، شراب 667 جم / لتر ، 500 مل لكل منهما ؛
الكلورامفينيكول ، سلفاديميثوكسين ، ميثيلوراسيل ، مرهم تريميكين للاستخدام الخارجي 40 جم ؛
ليسينوبريل ، قرص 5 ملغ ؛
ميثيلوراسيل ، مرهم موضعي في أنبوب 10٪ 25 جم ؛
النفازولين ، قطرات الأنف 0.1٪ 10 مل ؛
Nicergoline ، lyophilisate لتحضير محلول الحقن 4 ملغ ؛
· بوفيدون اليود ، محلول للاستخدام الخارجي 1 لتر ؛
• سالبوتامول ، محلول البخاخات 5 ملغ / مل -20 مل.
· Smectite ثنائي الاوكتاهدرا ، مسحوق لتحضير المعلق للإعطاء عن طريق الفم 3.0 غرام ؛
سبيرونولاكتون ، كبسولة 100 مجم ؛
توبراميسين ، قطرات للعين 0.3٪ 5 مل ؛
Torasemide ، قرص 10 ملغ ؛
ترامادول ، محلول للحقن 100 مجم / 2 مل ؛
ترامادول ، محلول عن طريق الفم (قطرات) 100 مجم / 1 مل 10 مل ؛
فينتانيل ، نظام علاجي عبر الجلد 75 ميكروغرام / ساعة (لعلاج الآلام المزمنة لمرضى السرطان) ؛
حمض الفوليك ، أقراص ، 5 ملغ ؛
فوروسيميد ، محلول للحقن 1٪ 2 مل ؛
كلورامفينيكول ، سلفاديميثوكسين ، ميثيلوراسيل ، مرهم تريميكين للاستخدام الخارجي 40 جم ؛
الكلورهيكسيدين ، محلول 0.05٪ 100 مل ؛
كلورو بيرامين ، محلول للحقن 20 مجم / مل 1 مل.

العلاج الدوائي المقدم في مرحلة رعاية الطوارئ الطارئة:لم تنفذ.

علاجات أخرى:
علاجات العيادات الخارجية الأخرى: لا تنطبق.

الأنواع الأخرى المتوفرة في المستوى الثابت:

زرع نخاع العظم (مستوى الدليل ب)
مؤشرات BMT في PNH مشابهة لفقر الدم اللاتنسجي الحاد.
بينما يتحكم عقار إيكوليزوماب في انحلال الدم داخل الأوعية الدموية والمضاعفات المرتبطة به ، والاعتماد بشكل أساسي على عمليات نقل الدم ، يظل زرع نخاع العظم الخيفي (BMT) هو الطريقة الجذرية الوحيدة لتحقيق علاج لهذا المرض. ومع ذلك ، يرتبط BMT بارتفاع معدل الوفيات. وهكذا ، في دراسة بأثر رجعي على 26 مريضًا مصابًا بـ PNH من إيطاليا والذين تلقوا زرع نخاع العظم ، كان معدل البقاء على قيد الحياة لمدة 10 سنوات 42 ٪ ، واحتمال البقاء على قيد الحياة لمدة عامين في 48 مريضًا تلقوا زرع نخاع العظم من شقيق مماثل لـ HLA ، وفقًا لـ السجل الدولي لزراعة النخاع العظمي. بلغت نسبته 56٪. بغض النظر عن المؤشرات التي يتم إجراء زراعة نخاع العظم من أجلها ، يظل معدل المضاعفات مرتفعًا جدًا. تواتر تفاعلات الكسب غير المشروع مقابل المضيف في مرضى PNH هو 42-54 ٪ ، نصف المرضى يصابون بمرض انسداد الكبد الوريدي ، عدم التطعيم أو الرفض ، بالإضافة إلى وجود خطر توسع استنساخ PNH. يؤثر زرع نخاع العظم والمضاعفات المرتبطة به سلبًا على نوعية حياة المرضى.

أنواع العلاج الأخرى المقدمة خلال مرحلة الإسعاف: لا تنطبق.

ميزات إدارة المرضى الحوامل.
يرتبط الحمل مع PNH بمستوى عالٍ من وفيات الأمهات والأطفال (11.6٪ و 7.2٪ على التوالي).
في الوقت الحالي ، تم وصف عدد قليل فقط من حالات العلاج بـ eculizumab أثناء الحمل مع نتائج إيجابية للأم والجنين. لا توجد آثار ماسخة للدواء. لا ينبغي إيقاف العلاج بالـ Eculizumab أثناء الحمل. إذا لم يكن المريض قد تلقى عقار إيكوليزوماب من قبل ، فقد يتم وصف الدواء أثناء الحمل. في هذه الحالة ، يجب أن يستمر العلاج بـ eculizumab لمدة 3 أشهر بعد الولادة. في حالات انحلال الدم "الاختراقي" أثناء الحمل ، قد يلزم تعديل جرعة الدواء (على سبيل المثال ، العلاج الوقائي 900 مجم في الأسبوع).

تدخل جراحي:
التدخل الجراحي المقدم في العيادة الخارجية:لم تنفذ.

جراحة المرضى الداخليين:
مع تطور المضاعفات المعدية والنزيف الذي يهدد الحياة ، يخضع المرضى لتدخلات جراحية عاجلة.

مزيد من إدارة:
في سياق العلاج بـ eculizumab ، يوصى بإجراء الفحوصات المخبرية التالية: CBC مع تحديد الخلايا الشبكية ، LDH ، الكرياتينين في الدم ، ببتيد الدماغ المدر للصوديوم B (إن أمكن) ، D-dimer ، مصل الحديد ، الفيريتين ، اختبار مضاد الجلوبيولين المباشر . يتم رصد حجم استنساخ PNH بناءً على نتائج قياس التدفق الخلوي شديد الحساسية.
يعاني المرضى الذين يتلقون عقار الإيكوليزوماب من زيادة ذات دلالة إحصائية في حجم استنساخ PNH. في دراسة TRIUMPH ، زاد استنساخ PNH من النوع الثالث من كريات الدم الحمراء من 28.1٪ إلى 56.9٪ خلال 26 أسبوعًا ، بينما لم يتغير في المجموعة الثانية. إذا تم إيقاف عقار الإيكوليزوماب ، فمن الضروري مراقبة حجم استنساخ PNH ، ومستوى الخلايا الشبكية ، و haptoglobin ، و LDH ، و bilirubin ، و D-dimers للكشف في الوقت المناسب عن انحلال الدم والوقاية من المضاعفات المحتملة.

مؤشرات فعالية العلاج:
لم يتم بعد تطوير نظام محدد لتقييم الاستجابة للعلاج في PNH. عند تقييم تأثير العلاج ، يجب مراعاة ما يلي:
· المظاهر السريرية ـ الضعف.
· مستوى الهيموجلوبين.
- الحاجة إلى نقل مكونات الدم.
· نوبات الجلطة.
· نشاط انحلال الدم (مستوى الخلايا الشبكية ، LDH ، هابتوجلوبين).

المستحضرات (المكونات الفعالة) المستخدمة في العلاج

مجموعات الأدوية حسب ATC المستخدمة في العلاج

العلاج في المستشفيات

مؤشرات لدخول المستشفى:
مؤشرات لدخول المستشفى في حالات الطوارئ:
· APG المحدد حديثا.
· المضاعفات الخثارية.
· أزمة انحلال الدم.
· قلة العدلات الحموية.

مؤشرات الاستشفاء المخطط لها:
· الفحص وتحديد التكتيكات لمزيد من العلاج.
· زرع نخاع العظم الخيفي.

وقاية

إجراءات إحتياطيه:ليس.

معلومة

المصادر والأدب

1. محضر اجتماعات مجلس خبراء RCHRH MHSD RK ، 2015
   1. قائمة الأدبيات المستخدمة: 1. شبكة المبادئ التوجيهية الاسكتلندية المشتركة بين الكليات (SIGN). تسجيل 50: كتيب مطور الدليل. ادنبره: سيغن ؛ 2014 (توقيع توقيع رقم 50). ... متاح من URL: http://www.sign.ac.uk 2. Kulagin A.D.، Lisukov I.A.، Ptushkin V.V.، Shilova E.R.، Tsvetaeva NV، Mikhailova E. AND. المبادئ التوجيهية السريرية الوطنية لتشخيص وعلاج الهيموجلوبين الانتيابي الليلي ، علم الأورام 2/2014 ص 20-28 3. باركر سي ، أومين م ، ريتشاردز س. وآخرون. تشخيص وعلاج الهيموغلوبين الانتيابي الليلي. الدم 2005 ؛ 106: 3699-709. 4. de Latour R. P. ، Mary J. Y. ، Salanoubat C. et al. بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية: التاريخ الطبيعي لفئات المرض الفرعية. الدم 2008 ؛ 112: 3099-106. 5. برودسكي ر. أ. كيف أعالج بيلة الهيموجلوبين الانتيابية الليلية. الدم 2009 ؛ 113: 6522-7. 6. Movalia M. K. و Weitz I. و Lim S. H. و Illingworth A. معدل حدوث استنساخ PNH عن طريق كود التشخيص باستخدام قياس التدفق الخلوي عالي الحساسية. الدم (ملخصات الاجتماع السنوي ASH) 2011 ؛ 118: 1033. 7. Wanachiwanawin W. ، Siripanyaphinyo U. ، Piyawattanasakul N. ، Kinoshita T. دراسة جماعية لطبيعة استنساخ الهيموجلوبين الليلي الانتيابي وطفرات PIG-A في مرضى فقر الدم اللاتنسجي. Eur J. Haematol 2006 ؛ 76: 502-9. 8. أمراض الدم. أحدث كتاب مرجعي. تحت التحرير العام لدكتور في العلوم الطبية. الأستاذ ك. عبد القديروف. موسكو: دار إكسمو للنشر ؛ سانت بطرسبرغ: دار نشر سوفا ، 2004 ؛ 294-299. 9. Borowitz M. J.، Craig F. E.، Digiuseppe J. A. et al. إرشادات لتشخيص ورصد الهيموجلوبين الانتيابي الليلي والاضطرابات ذات الصلة عن طريق قياس التدفق الخلوي. قياس الخلايا B Clin Cytom 2010 ؛ 78 (4): 211-30. 10. Schubert J.، Alvarado M.، Uciechowski P. et al. تشخيص بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية باستخدام التنميط المناعي لخلايا الدم المحيطية. Br J Haematol 1991 ؛ 79: 487-92 11. هامون أ. تشخيص أمراض الأعضاء الداخلية ، المجلد 4 ، تشخيص أمراض جهاز الدم. دار النشر: م: الأدب الطبي 2001 م ، ص 67 ، ص 100 ، ص 163. 12. Gardner A و Mattiuzzi G و Faderl S و Borthakur G و Garcia-Manero G و Pierce S و Brandt M و Estey E. مقارنة عشوائية للأنظمة الغذائية المطبوخة وغير المطبوخة في المرضى الذين يخضعون للعلاج التعريفي لمرض سرطان الدم النخاعي الحاد. ياء كلينونكول. 2008 10 ديسمبر ؛ 26 (35): 5684-8. 13. كار إس إي ، هاليداي ف. التحقيق في استخدام نظام قلة العدلات: دراسة استقصائية لأخصائيي التغذية في المملكة المتحدة. حمية J Hum Nutr. 2014 28.14 أغسطس Boeckh M. نظام غذائي نيوتروبينيك - ممارسة جيدة أم أسطورة؟ زرع نخاع الدم بيول. 2012 سبتمبر ؛ 18 (9): 1318-9. 15. Trifilio، S.، Helenowski، I.، Giel، M. et al. التشكيك في دور النظام الغذائي العدلات بعد زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم. زرع نخاع الدم بيول. 2012 ؛ 18: 1387-1392. 16. DeMille، D.، Deming، P.، Lupinacci، P.، and Jacobs، L.A. تأثير نظام قلة العدلات في العيادات الخارجية: دراسة تجريبية. منتدى OncolNurs. 2006 ؛ 33: 337-343 17. هيلمن ب ، هول سي ، مارش جيه سي وآخرون. تأثير عقار إيكوليزوماب على متطلبات انحلال الدم ونقل الدم في المرضى الذين يعانون من بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية. إن إنجل جي ميد 2004 ؛ 350: 552-9. 18. هيلمن ب ، يونغ إن إس ، شوبرت ج وآخرون. المثبط التكميلي eculizumab في بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية N Engl J Med 2006 ؛ 355: 1233–43. 19. برودسكي آر أ ، يونغ إن إس ، أنتونيولي إي وآخرون. دراسة متعددة المراكز للمرحلة الثالثة لمثبط الإيكوليزوماب المكمل لعلاج المرضى الذين يعانون من الهيموغلوبين الانتيابي الليلي. الدم 2008 ؛ 111 (4): 1840-7. 20. كيلي آر جيه ، هيل أ ، أرنولد إل إم وآخرون. العلاج طويل الأمد باستخدام الإيكوليزوماب في بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية: فعالية مستدامة وتحسين البقاء على قيد الحياة. دم 2011 ؛ 117: 6786-92. 21. Hillmen P. ، Muus P. ، Roth A. et al. الأمان والفعالية على المدى الطويل للعلاج المستمر بالاكوليزوماب في المرضى الذين يعانون من بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية. 22. Dmytrijuk A، Robie-Suh K، Cohen MH، Rieves D، Weiss K، Pazdur R. FDA report: eculizumab (Soliris) لعلاج المرضى الذين يعانون من بيلة الهيموجلوبين الهيموجلوبينية الليلية الانتيابية. 2008 سبتمبر 13 (9): 993-1000. 23. Martí-Carvajal AJ، Anand V، Cardona AF، Solà I. Eculizumab لعلاج مرضى بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية. قاعدة بيانات كوكرين القس. 2014 أكتوبر 30 ؛ 10: CD010340. 24. Kelly R، Arnold L، Richards S، Hill A، Bomken C، Hanley J، Loughney A، Beauchamp J، Khursigara G، Rother RP، Chalmers E، Fyfe A، Fitzsimons E، Nakamura R، Gaya A، Risitano AM، شوبرت ج ، نورفولك د ، سيمبسون إن ، هيلمن ب. إدارة الحمل في بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية على إيكوليزوماب طويل الأمد. المجلة البريطانية لأمراض الدم .2010 ؛ 149: 446-450. 25. Risitano AM. بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية والنظام التكميلي: رؤى حديثة واستراتيجيات جديدة مضادة للتكميل Adv Exp Med Biol. 2013 ؛ 735: 155-72. 26. بيلة الهيموجلوبينية الليلية الانتيابية (PNH). توصيات من الجمعية لتشخيص وعلاج أمراض الدم والأورام ، 2012. www.dgho-onkopedia.de 27. Hall C.، Richards S.، Hillmen P. الوقاية الأولية باستخدام الوارفارين تمنع تجلط الدم في بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية (PNH). الدم 2003 ؛ 102: 3587-91. 28. Santarone S. ، Bacigalupo A. ، Risitano A. M. et al. زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم من أجل بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية: نتائج طويلة الأجل لدراسة استعادية نيابة عن Gruppo Italiano Trapianto Midollo Osseo (GITMO). هيماتولوجيكا 2010 ؛ 95: 983-8. 29. Saso R. ، Marsh J. ، Cevreska L. et al. عمليات زرع نخاع العظام للبول الانتيابي الليلي الهيموجلوبيني. Br J Haematol 1999 ؛ 104: 392-6. 30. de Latour R. P.، Schrezenmeier H.، Mary JY. وآخرون. زرع الخلايا الجذعية في بيلة الهيموجلوبينية الانتيابية: دراسة مشتركة مستمرة لمجموعة AAWP EBMT والجمعية الفرنسية لأمراض الدم (EBMTabstract 316). زرع نخاع العظام 2009 ؛ 43 (ملحق 1): 57-8. 31. أرميتاج ج.أو زرع نخاع العظام. إن إنجل جي ميد 1994 ؛ 330: 827-38. 32. بينافيدس لوبيز E. PNH التوسع النسيلي بعد زرع نخاع العظم: تقرير حالة. هيماتولوجيكا 2011 ؛ 96: 524. 33. Fraser C. J.، Bhatia S.، Ness K. et al. Impact of المزمنة مقابل مرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف على الحالة الصحية للناجين من زرع الخلايا المكونة للدم: تقرير من دراسة الناجين من زرع نخاع العظام ، الدم 2006 ؛ 108: 2867-73. 34. Bieri S. ، Roosnek E. ، Helg C. et al. جودة الحياة والتكامل الاجتماعي بعد الخيفي المكونة للدم SCT. زرع نخاع العظام 2008 ؛ 42: 819-27.

معلومة

قائمة مطوري البروتوكول مع بيانات التأهيل:

1) Kemaykin Vadim Matveevich - مرشح العلوم الطبية ، JSC "المركز العلمي الوطني للأورام وزراعة الأعضاء" ، رئيس قسم طب الأورام وزرع نخاع العظام.
2) Klodzinsky Anton Anatolyevich - مرشح العلوم الطبية ، JSC "المركز العلمي الوطني للأورام وزراعة الأعضاء" ، أخصائي أمراض الدم في قسم طب الأورام وزراعة نخاع العظام.
3) Ramazanova Raigul Mukhambetovna - دكتوراه في العلوم الطبية ، وأستاذ في جامعة JSC الكازاخستانية الطبية للتعليم المستمر ، ورئيس دورة أمراض الدم.
4) Gabbasova Saule Telembaevna - RSE في REM "معهد أبحاث الأورام والأشعة الكازاخستانية" ، رئيس قسم داء الأرومة الدموية.
5) كاراكولوف رومان كاراكولوفيتش - دكتوراه في العلوم الطبية ، أستاذ ، أكاديمي في معهد موسكو للطيران التابع للمؤسسة الجمهورية الحكومية في معهد أبحاث الأورام والأشعة الكازاخستانية ، كبير الباحثين في قسم داء الأرومة الدموية.
6) Tabarov Adlet Berikbolovich - رئيس قسم إدارة الابتكار في المؤسسة الحكومية الجمهورية في "مستشفى المركز الطبي REM ، القسم الإداري لرئيس جمهورية كازاخستان" ، أخصائي الصيدلة السريرية ، طبيب الأطفال.
7) رابيلبيكوفا غولميرا كوربانوفنا ، دكتوراه في العلوم الطبية. JSC "المركز القومي للبحوث للأمومة والطفولة" - رئيس قسم التوليد №1.

بيان عدم تضارب المصالح:غائب.

المراجعون:
1) أفاناسييف بوريس فلاديميروفيتش - دكتوراه في العلوم الطبية ، مدير معهد البحث العلمي لأورام الأطفال وأمراض الدم وزراعة الأعضاء الذي يحمل اسم R.M. جورباتشيفا ، رئيس قسم أمراض الدم وعلم نقل الدم وزراعة الأعضاء في مؤسسة التعليم العام للميزانية الحكومية للتعليم المهني العالي في الجامعة الطبية الحكومية الأولى في سانت بطرسبرغ والتي سميت باسم ف. ا. بافلوفا.
2) Rakhimbekova Gulnar Ayapbekkyzy - دكتوراه في العلوم الطبية ، أستاذ ، JSC "المركز الطبي العلمي الوطني" ، رئيس القسم.
3) بيفوفاروفا إيرينا أليكسييفنا - طبيبة ، ماجستير في إدارة الأعمال ، رئيسة اختصاصي أمراض الدم في وزارة الصحة والتنمية الاجتماعية في جمهورية كازاخستان.

بيان شروط مراجعة البروتوكول:مراجعة البروتوكول بعد 3 سنوات و / أو عند ظهور طرق جديدة للتشخيص و / أو العلاج بمستوى أعلى من الأدلة.

الملفات المرفقة

انتباه!

• يمكن أن يسبب العلاج الذاتي ضررًا لا يمكن إصلاحه لصحتك.
• المعلومات المنشورة على موقع MedElement وفي تطبيقات الهاتف المحمول "MedElement" و "Lekar Pro" و "Dariger Pro" و "Diseases: Therapist's Guide" لا يمكن ولا ينبغي أن تحل محل الاستشارة الشخصية مع الطبيب. تأكد من الاتصال بمقدم الرعاية الصحية إذا كان لديك أي مرض أو أعراض تزعجك.
• يجب مناقشة اختيار الأدوية وجرعاتها مع أخصائي. يمكن للطبيب فقط أن يصف الدواء اللازم وجرعته ، مع مراعاة المرض وحالة جسم المريض.
• موقع MedElement وتطبيقات الهاتف المحمول "MedElement" و "Lekar Pro" و "Dariger Pro" و "Diseases: Therapist's Guide" هي معلومات ومراجع حصرية. لا ينبغي استخدام المعلومات المنشورة على هذا الموقع لإجراء تغييرات غير مصرح بها في وصفة الطبيب.
• لا يتحمل محررو MedElement المسؤولية عن أي ضرر يلحق بالصحة أو مادي ناتج عن استخدام هذا الموقع.

بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية هي أمراض مكتسبة شديدة من مجموعة فقر الدم الانحلالي. يتسبب مرض Markiafava-Mikeli أو مرض Strubing-Markiafava ، وهي أسماء أخرى لهذا المرض ، في تدمير خلايا الدم الحمراء في الدم. المرض نادر جدًا ، حيث يمكن أن يلتقي شخص واحد مصاب بهذا المرض في 500 ألف نسمة.

لكي لا تقلق بشأن تطور المضاعفات والعواقب المحتملة لعلم الأمراض ، يجب أن تعرف ما هو تشخيص الهيموغلوبين الانتيابي الليلي وأعراض وعلاج الأمراض.

أسباب الهيموجلوبين

كما ذكر أعلاه ، فإن بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية هي مرض نادر جدًا ، علاوة على ذلك ، غالبًا ما توجد الأمراض في الأشخاص الذين تتراوح أعمارهم بين 20 إلى 40 عامًا. من المعروف أيضًا أن حالات تطور المرض في سن الشيخوخة أو عند الأطفال معروفة للممارسة الطبية ، لكنها تمثل نسبة ضئيلة.

يُعتقد أن بيلة الهيموغلوبين الانتيابية الليلية (PNH) ناتجة عن تفاعل طفري لجين الخلية الجذعية (PIG-A) ، وهو أحد مكونات الكروموسوم X في نخاع العظم ، استجابةً لعوامل مؤثرة غير محددة. تزعم بعض المصادر أن أسباب الطفرة الجينية غير معروفة.

يجادل آخرون بأن بيلة الهيموغلوبين يمكن أن تتطور على خلفية الأمراض المعدية والالتهاب الرئوي والصدمات والتسمم وانخفاض درجة حرارة الجسم والحروق وحتى الإجهاد البدني الشديد.

لكن لم يتم بعد تكوين رأي بالإجماع حول مسببات علم الأمراض.

تم الكشف عن علاقة واضحة بين تطوير تشخيص بيلة الهيموجلوبين الانتيابية الليلية كعرض من أعراض الأمراض المصاحبة. أظهرت الأبحاث الطبية أن PNH يتطور نتيجة لفقر الدم اللاتنسجي وأمراض أخرى في نظام الأوعية الدموية في 30٪ من الحالات.

حجة معروفة هي أنه حتى خلية واحدة متحولة يمكن أن تؤدي إلى تطور شكل حاد من الحالات المرضية. أثناء تكوين خلايا الدم الحمراء ، التي تحدث في نخاع العظام ، تنقسم الخلايا الجذعية وتنضج ويتم إطلاقها في مجرى الدم. ينقسم أحد الجينات المعدلة إلى زوجين ، والجين عن طريق زوجين ، إلخ. أي أن خلية واحدة تتكاثر ذاتيًا ، وتملأ الدم تدريجيًا بكريات الدم الحمراء التالفة.

يتمثل جوهر تلف خلايا الدم الحمراء في وجود غشاء بروتين غير مكتمل أو مفقود ، والذي يعمل على حماية الخلايا من جهاز المناعة. عند أدنى عيوب في الخلية ، تدمرها مناعة الجسم ، ونتيجة لذلك يتطور تشخيص مثل انحلال الدم - تدمير داخل الأوعية الدموية للكريات الحمراء ، والذي يتميز بإطلاق الهيموجلوبين النقي في الدم.

تحدث نفس العملية في فقر الدم الانحلالي المزمن ، لذلك فإن بيلة الهيموجلوبينية الانتيابية الليلية هي نظيرتها أو ، كما يقول الممارسون ، شكلها الحاد المكتسب. الفرق الرئيسي والوحيد بين هذه الأمراض هو مبدأ تطورها.

فقر الدم الانحلالي هو علم الأمراض الخلقي ، يتم الحصول على الهيموغلوبين. يمكن أن تنتشر كريات الدم الحمراء المعيبة أيضًا إلى عناصر صلبة أخرى في السائل الوعائي: الكريات البيض والصفائح الدموية.

أعراض بيلة الهيموجلوبين الليلية

تعتمد أعراض مرض Markiafava-Micheli على التصنيف السببي لعلم الأمراض. كما تم اكتشافه ، يمكن أن يكون المرض مستقلاً ، وفقًا لذلك ، يتميز الشكل مجهول السبب لـ PNH. بسبب تطور علم الأمراض على خلفية فقر الدم اللاتنسجي ، تأخذ بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلي شكل متلازمة. يعتبر الشكل الاصطلاحي لـ PNH ، والذي يحدث على خلفية نقص تنسج الدم ، هو الأكثر ندرة.

من المستحيل تحديد أعراض مميزة لأي شكل من أشكال المرض ، لأنه متغير للغاية. قد يكون مسار المرض ظاهريًا بدون أعراض ، وفي هذه الحالة لا يمكن تحديد المرض إلا من خلال التشخيص المختبري. يعاني مرضى آخرون من متلازمة فقر الدم الشديدة.

بشكل عام ، يمكن تحديد تعميم صغير لجميع المظاهر المحتملة لداء الهيموجلوبين الليلي ، وبالتالي إبراز الصورة الرئيسية للأعراض.

• تحدث عملية انحلال الدم (تدمير كريات الدم الحمراء والهيموغلوبين) بشكل رئيسي في الليل (بيلة الهيموغلوبينية الليلية) ، لذلك ، مع التبول الصباحي ، يكتسب لون البول لونًا بني داكن. في النهار وفي المساء ، لا يتم ملاحظة هذه العلامة.
• بسبب الانخفاض الكمي في دم كريات الدم الحمراء ، لوحظت متلازمة فقر الدم. ترتبط مظاهره ارتباطًا مباشرًا بتجويع الأكسجين للأعضاء والأنسجة. لذلك ، قد يعاني المريض من الصداع ، والدوخة ، وخفقان النقاط السوداء أمام العين ، والضعف العام ، والتعب السريع ، ونوبات الذبحة الصدرية ، وعدم انتظام دقات القلب.

• في حالة ما يصاحب ذلك من أمراض معدية ، نزيف ، مجهود بدني ، وما إلى ذلك ، قد تحدث أزمة انحلالي ، والتي تتجلى في قفزة حادة في كمية الهيموجلوبين في السائل الوعائي ، وكذلك الشعور بالضيق الشديد والحمى والألم في قد تظهر العظام ، اصفرار الجلد وتضخم الطحال المعتدل (تضخم الطحال).
• يصاحب الهيموغلوبين الدموي انتهاك لتركيز أكسيد النيتريك في البلازما ، والذي ، على خلفية الأزمات وفي الأمراض الشديدة ، يسبب ضعف الانتصاب لدى الرجال.
• بسبب خلل في الصفائح الدموية (خلايا الدم المسؤولة عن تخثر الدم) ، يمكن أن يحدث تجلط الدم ، والذي غالبًا ما يُلاحظ في الأوردة. يمكن أن تثير نفس العملية مادة يتم إطلاقها عند تدمير خلايا الدم الصلبة. يتسبب في زيادة تخثر السائل الوعائي ، والذي يعتمد عليه الميل إلى تجلط الدم. يمكن أن تكون هذه الانتهاكات قاتلة.

يمكن الحصول على أوضح أعراض بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية عن طريق التشخيص المختبري. ستظهر الدراسات مستوى الهيموجلوبين في الدم ، وحالة الخلايا ، ووجود قلة الصفيحات ونقص الكريات البيض ، ومستوى الحديد والعناصر الدقيقة الأخرى ، وما إلى ذلك. يستغرق الأمر وقتًا طويلاً لتشخيص بيلة الهيموجلوبين بشكل كامل ودقيق ، حيث يمكن لهذا المرض أن تكون مخبأة بعناية تحت ستار أمراض أخرى.

لذلك ، فإن الطريقة الأكثر منطقية للكشف في الوقت المناسب عن مرض Markiafava-Micheli هي الفحص الوقائي المنتظم.

علاج بيلة الهيموجلوبين الانتيابية الليلية

تحدد فترة الكشف عن بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية طرق العلاج اللازمة وتحدد تشخيص نتيجة علم الأمراض ، والتي تكون في معظم الحالات غير مواتية. هذا يرجع إلى عدم وجود سبب محدد للتنمية واستحالة القضاء عليه. لذلك ، لا توجد طريقة محددة لعلاج PNH.

تهدف جميع التدابير العلاجية إلى القضاء على مظاهر الأعراض. الطريقة الوحيدة الفعالة للتخلص تمامًا من الخلايا الطافرة هي زرع نخاع العظم الأحمر (المكان الذي تتشكل فيه خلايا الدم).

مع تطور أزمة انحلال الدم ، شكل حاد من انحلال الدم ، يوصف المريض عمليات نقل متعددة لكتلة كرات الدم الحمراء. يمكن أن يكون هناك 5 عمليات نقل دم أو أكثر. يتم تحديد عدد الإجراءات وتواترها من خلال التحليلات المتكررة ويتم إجراؤها في التكاثر التالي لكريات الدم الحمراء المعيبة.

في حالات نادرة ، يتم استئصال الطحال. العلامات التي تؤدي إلى استئصال الطحال هي زيادة حادة في العضو ومظهر من مظاهر تطور حالة احتشاء.

تتمثل الإجراءات العلاجية المتبقية في تناول مجموعة عقاقير مختلفة تسهل مسار علم الأمراض. الأدوية الرئيسية هي مستحضرات لمجموعات هرمونات الستيرويد ومضادات الخلايا ، وكذلك مستحضرات الحديد وحمض الفوليك.

نيروبول

الأكثر شيوعا في تعيين الأطباء لمكافحة مظاهر أعراض بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلية هو عقار نيروبول. إنه دواء هرموني من مجموعة الستيرويدات الابتنائية. عمل الدواء موجه:

• لتحفيز تخليق البروتين في جسم المريض ، وهو ما لا يكفي في غشاء كريات الدم الحمراء ؛
• له تأثير مفيد على استقلاب النيتروجين ؛
• يؤخر إفراز البوتاسيوم والكبريت والفوسفور ، وهي ضرورية لتخليق البروتين الطبيعي ؛
• يثير زيادة تثبيت الكالسيوم في العظام.

بعد تناول هذا الدواء ، يشعر المريض بزيادة في الشهية ، وزيادة شديدة في كتلة العضلات ، وتسارع تكلس العظام ، فضلاً عن الحالة العامة للجسم بشكل أفضل.

يبدأ استخدام الدواء بـ 10 جم ، ويزيد تدريجياً إلى 30 جم ، 1-2 جرعات في اليوم. بالنسبة للأطفال ، تكون جرعة الدواء حبة واحدة كل يومين ، في الحالات الشديدة ، يوميًا. مسار العلاج مع نيروبول هو 2 إلى 3 أشهر.

بعد انتهاء استخدام الدواء ، لوحظ زيادة في انحلال الدم لدى العديد من المرضى.

يمكن استخدام Nerobol بدقة وفقًا لوصفة الطبيب المعالج.

الهيبارين

الهيبارين مضاد مباشر للتخثر - وسيلة لمنع تخثر الدم. مع الهيموجلوبين الانتيابي الليلي ، يوصف لمنع تجلط الدم ، مما يعقد مسار المرض.

يتم تحديد جرعة وتكرار الإعطاء بشكل فردي تمامًا ، اعتمادًا على مدى تعقيد علم الأمراض وخطر تجلط الدم في الأوعية.

في نهاية الدورة مع الهيبارين ، يصف الطبيب مضادات التخثر غير المباشرة للحفاظ على المستوى الطبيعي للتخثر.

Eculizumab هو دواء يتكون من أجسام مضادة أحادية القناة متوافقة مع البشر. مبدأ عمل الدواء هو وقف انحلال الدم داخل الأوعية الدموية ومعارضة مجاملات الدم مباشرة. نتيجة لذلك ، يتوقف التدمير الطبيعي لكريات الدم الحمراء المعيبة بواسطة جهاز المناعة في الجسم.

هذا الدواء هو أغلى عقار في العالم. لم يتم دراسة آلية عملها وتطوير النتائج المحتملة لاستخدامها بشكل كافٍ.

مستحضرات الحديد وحمض الفوليك

في حالة حدوث اضطرابات في عمل نخاع العظم الأحمر ، يحدث نقص في الحديد وحمض الفوليك ، وهو أمر ضروري لتكوين الدم الطبيعي. يشمل العلاج العلاجي لـ PNH إعطاء مستحضرات هذه العناصر الدقيقة للتعويض عن الخسائر المرضية.

يتم تحديد الجرعة وطريقة تناول الدواء من قبل الطبيب المعالج. في أغلب الأحيان ، يتم وصف Sorbifer و Tardiferron و Ferretab و Fenuls وما إلى ذلك. تشتمل هذه الأدوية على مجموعة من العناصر النزرة اللازمة للتكوين الطبيعي لجزيئات الدم الصلبة في نخاع العظام الأحمر.

دعم الكبد

يؤثر العلاج المعزز في مكافحة بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية بشدة على الكبد. في حالة عدم وجود علاج داعم للكبد ، فقد يرفض ببساطة. لذلك ، من المهم تناول الأدوية بعمل كبد. يمكن أن تكون هذه الأدوية:

• مكسر.
• هيبترال.
• كارسيل.

بالإضافة إلى ذلك ، هناك عدد من الأطعمة التي يمكن أن تساعد في إصلاح خلايا الكبد. وتشمل هذه اليقطين ، والمشمش المجفف ، وعشب البحر ، وزيت الزيتون ، ومنتجات الألبان ، وأكثر من ذلك. الشيء الرئيسي هو عدم تفاقمه مع الوجبات السريعة في لحظات ضعف الكبد.

بعد تحديد المرض ، يعطي الأطباء تنبؤات غير دقيقة. تشير الإحصائيات إلى أنه بعد تحديد التشخيص ، يمكن للمريض أن يعيش على علاج الصيانة لمدة 5 سنوات تقريبًا.

بسبب الأصل غير المعروف للمرض وعدم الدقة في أسباب تطوره ، لا يمكن منع الهيموجلوبين الانتيابي الليلي.

الموجودات

مرض ماركيافافا-ميتشيلي أو بيلة الهيموغلوبينية الانتيابية الليلي مرض خطير يمكن أن يكون قاتلاً حتى مع العلاج المكثف. يعتبر الشفاء الوحيد الممكن هو زرع نخاع العظم الأحمر ، حيث تتشكل خلايا الدم. بالإضافة إلى ذلك ، يستلزم علم الأمراض تطور الأمراض المصاحبة ، والتي لا تقل خطورة على حالة المريض.

لذلك ، يعلن الأطباء بالإجماع أن أفضل طريقة للوقاية من أي أمراض هي الخضوع لفحص طبي كامل بانتظام. ربما ، إذا كان المرض في مرحلة التكوين فقط ، فيمكن إزالته بشكل دائم. مع مثل هذه الأمراض الخطيرة ، فإن التوقيت هو القضية الرئيسية. يجب أن تعتني بنفسك وبجسمك.

في هذه المجموعة من المرضى ، لا يوجد ميل عائلي للإصابة بفقر الدم ، ولا يوجد تشوهات خلقية مصاحبة ، ولا توجد اضطرابات في فترة حديثي الولادة. يمكن أن يحدث فقر الدم اللاتنسجي في أي عمر عند الأطفال والبالغين ، وفي بعض الأحيان يمكن أن يكون مرتبطًا بتسمم أو عدوى معينة ، ولكن غالبًا لا يتم ملاحظة مثل هذه العلاقة ومن ثم يعتبر فقر الدم "مجهول السبب".

بعض الأدوية ، مثل 6-مركابتوبورين وميثوتريكسات وسيكلوفوسفامين وبوسولفان ، لها قدرة معينة يمكن التنبؤ بها تعتمد على الجرعة لتثبيط نخاع العظام. إذا استمر هذا الاكتئاب ، فسيؤدي إلى عدم تنسج نخاع العظم ، والذي عادة ما يتم حله بسرعة بعد سحب الدواء. تدمر هذه الأدوية خلايا نخاع العظم الطبيعية من خلال نفس آلية تثبيط نمو خلايا سرطان الدم. إن المبادئ البيوكيميائية لعملهم مفهومة جيدًا. تنتمي الإصابة الإشعاعية لنخاع العظام إلى نفس الفئة.

الأدوية الأخرى ، مثل الأكريكين والكلورامفينيكول والفينيل بوتازون ومضادات الاختلاج ، التي تُعطى بجرعات علاجية عادية ، يمكن أن تسبب عدم تنسج نخاع العظم العميق في عدد قليل جدًا من الأشخاص ، ولا يمكن التنبؤ بهذا عدم التنسج مسبقًا. غالبًا ما يكون لا رجعة فيه ويموت حوالي نصف المرضى. يندرج أيضًا التسمم بالمبيدات الحشرية مثل الـ دي.دي.تي وبعض المذيبات العضوية في هذه الفئة. غالبًا ما يكون من غير الواضح ما إذا كان فقر الدم يمكن أن يرتبط بدواء معين. الشرط الأساسي لمثل هذه العلاقة هو تناول الدواء خلال الأشهر الستة الماضية. أشهرها ودراستها هو الكلورامفينيكول. يأتي هذا الدواء على رأس قائمة العوامل المسببة المعروفة في مجموعة المرضى الذين يعانون من فقر الدم اللاتنسجي المكتسب الذي وصفه سكوت وآخرون ، وفي نفس مجموعات الأطفال المرضى في شهيدي. لاحظ الذواقة 16 حالة في سيدني لمدة 8 سنوات ، حيث كان المرض مرتبطًا ، كما يُفترض ، بتناول الكلورامفينيكول. كان الحدوث المطلق لفقر الدم اللاتنسجي المكتسب القاتل في المجموعات السكانية التي لم يُعرف فيها التعرض لأي دواء خطير وكان التعرض لأدوية مختلفة ، بما في ذلك الكلورامفينيكول ، معروفًا.

يزيد العلاج بالكلورامفينيكول من احتمالية الإصابة بفقر الدم اللاتنسجي بمقدار 13 مرة ، ولكن من الواضح أيضًا أن هذه الزيادة صغيرة. بالنسبة للأدوية الأخرى ، يكون الخطر أقل. ومع ذلك ، توصي لجنة سلامة الأدوية البريطانية باستخدام الكلورامفينيكول بشكل منهجي لجميع الأمراض بخلاف حمى التيفوئيد والتهاب السحايا بالإنفلونزا الهيموفيلية ، فقط بعد إجراء فحوصات سريرية ومخبرية دقيقة تشير إلى أن مضاد حيوي آخر لن يكون كافياً. لا ينبغي أبدًا استخدامه بشكل منهجي لعدوى عادية.

آلية تطور فقر الدم اللاتنسجي تحت تأثير الكلورامفينيكول غير واضحة. لا يرتبط حدوث فقر الدم اللاتنسجي بجرعة العلاج ومدة العلاج ، ولا يمكن تفسيره بعدم كفاية الإفراز لدى الأفراد المعرضين للإصابة. في المختبر ، من الممكن إثبات تثبيط تخليق الأحماض النووية في خلايا نخاع العظام الطبيعية ، ولكن فقط بتركيز الدواء الذي يتجاوز التركيز المستخدم في الجسم الحي. لقد تم اقتراح أن كميات صغيرة من الكلورامفينيكول يمكن أن تستهلك في حليب الأبقار المعالجة من التهاب الضرع ، وأن هذه الكميات الصغيرة قد تحسس نخاع العظم للجرعات العلاجية المطبقة أكثر. كما تم اقتراح وجود تآزر غير مكتشف مع أدوية أخرى ، والتي من المحتمل أن تكون غير ضارة عند استخدامها بمفردها. عند مناقشة مسببات عدم تنسج قاتلة التنسج القاتلة الناجم عن الكلورامفينيكول ، تجدر الإشارة إلى أنه في نسبة كبيرة من المرضى الذين يتلقون هذا الدواء ، يوجد اكتئاب نخاع عظمي مختلف تمامًا وقابل للعكس ويعتمد على الجرعة. في 10 من 22 مريضًا يتلقون الكلورامفينيكول ، تم العثور على فجوات كبيرة متعددة في خلايا الدم الحمراء المبكرة لنخاع العظام ، والتي غالبًا ما كانت مصحوبة بانخفاض في عدد كرات الدم الحمراء والخلايا الشبكية. تختفي هذه التغييرات بعد أسبوع من إيقاف الدواء. من الواضح أن تطورها يتم تعزيزه من خلال الجرعات المتزايدة ، وتأخر التخلص من البلازما وتكوين الكريات الحمر المتسارع. يمكن رؤية نفس الفجوات مع نقص الفينيل ألانين أو الريبوفلافين.

فيما يتعلق بمسببات حالات عدم التنسج الأخرى التي يسببها الدواء ، كان هناك دائمًا إغراء لاقتراح عمل آليات المناعة ، ربما من نوع الدواء - الناشئ. ومع ذلك ، لم يتم إثبات هذه الآليات. تم تحديد الأصل المناعي لفقر الدم اللاتنسجي في حالة سريرية واحدة فقط ، وبالتحديد في حالة رد فعل الكسب غير المشروع مقابل رد فعل العائل عند الرضع غير الأكفاء مناعياً والذين تلقوا عمليات نقل الدم. إن تطور تفاعل تأقاني واضح بعد التلامس العرضي المتكرر مع الـ دي.دي.تي في مريض حساس يشير أيضًا إلى وجود آلية مناعية. اقترح Newwig ثلاثة تفسيرات لعدم تنسج الدواء: أ) التأثيرات المباشرة والسامة على خلايا نخاع العظام ، على سبيل المثال ، بعد التعرض الصناعي المزمن للبنزين ؛ ب) حساسية حقيقية ، تظهر مظاهرها بسرعة بعد التلامس مع جرعة صغيرة ؛ ج) التلامس طويل الأمد مع الجرعات العالية ، أي "حساسية عالية الجرعة". هذا هو الشكل الأكثر شيوعًا. يفسر المؤلف هذا في المقام الأول من خلال تلف أغشية الخلايا. يمكن أيضًا افتراض الاستعداد الوراثي ، كما يتضح من حالة خلل التنسج الدموي بعد ملامسة الكلورامفينيكول في التوائم المتطابقة. في الآونة الأخيرة ، تم نشر مقالات المراجعة حول فقر الدم اللاتنسجي الطبي لنيويج في لانسيت.

تظهر مشاكل مماثلة فيما يتعلق بالعدوى الفيروسية التي تسبق تطور فقر الدم اللاتنسجي. تمت دراسة هذه الظاهرة جيدًا في التهاب الكبد المعدي. تطور فقر الدم اللاتنسجي في 5 مرضى تتراوح أعمارهم بين 4 إلى 19 عامًا من 1 إلى 7 أسابيع بعد ظهور التهاب الكبد. تم وصف عدد من الحالات المماثلة ، بما في ذلك 3 حالات بواسطة Schwartz et al. لاحظ هؤلاء المؤلفون أنه في التهاب الكبد المعدي ، غالبًا ما يُلاحظ انخفاض مؤقت في عدد الخلايا الحبيبية والصفائح الدموية والهيموجلوبين وأن التغيرات التدريجية التي تؤدي إلى عدم تنسج نخاع العظم في عدد صغير جدًا من المرضى قد تمثل استمرارًا للعملية بأكملها ، والتي ربما يعتمد على الاستعداد الجيني. هنا يمكنك أن ترى تشابهًا مع تسمم الكلورامفينيكول. قلة الكريات الشاملة مع نقص تنسج نقي العظم العابر تم وصفه أيضًا فيما يتعلق بعدد من العدوى التي تسببها فيروسات الحمض النووي الريبي ، بما في ذلك فيروسات الحصبة الألمانية والإنفلونزا ، وفيروسات الإنفلونزا ، والنكاف ، وفيروسات الحصبة. تسبب عدوى فيروسية تجريبية في الفئران ، مثل MVH-3 وسلالة Trinidadian من التهاب الدماغ الخيلي الفنزويلي ، قلة الكريات الشاملة ونقص تنسج نخاع العظام ، ويمكن استنبات الفيروس من نخاع العظم. كما هو الحال مع الأسباب الأخرى لفقر الدم اللاتنسجي ، يُفترض حدوث عملية مناعة ذاتية.

في حوالي نصف فقر الدم اللاتنسجي المكتسب ، لا يوجد تاريخ لعدوى سابقة خطيرة أو التعرض لعوامل سامة. نشر وولف مادة كبيرة ، بما في ذلك 334 حالة من قلة الكريات الشاملة المكتسبة ، وفي 191 حالة ، أي 57.2٪ ، تم التعرف على فقر الدم على أنه مجهول السبب.

في مادة غورمان ، كان العدد النسبي للمرضى المصابين بفقر الدم مجهول السبب أقل ، أي 28 من أصل 104 عانوا من عدم التنسج المكتسب. في 5 من أصل 17 حالة بناءً على مواد شهيدي وفي 5 من أصل 9 حالات بناءً على مادة Desposito ، كان فقر الدم مجهول السبب. لم يتضح بعد ما إذا كانت الأمراض في هذه الحالات ناجمة عن عدوى بفيروس مجهول الهوية. يبدو أن بعض الحالات مجهولة السبب على الأقل تنسجم مع مجموعة خاصة قد تسمى ما قبل سرطان الدم أو سرطان الدم في المرحلة اللاتنسجي.

وصف ميلهورن وآخرون 6 أطفال ، على أساس أدلة قوية لا جدال فيها ، تم تشخيص إصابتهم بفقر الدم اللاتنسجي في سن 1 سنة و 11 شهرًا إلى 6 سنوات ، ولكن كل هؤلاء الأطفال بعد 9 أسابيع إلى 20 شهرًا أصيبوا بفقر الدم اللاتنسجي. ابيضاض الدم الليمفاوي ... في هؤلاء المرضى الستة ، لوحظت سمة مشتركة واحدة - تأثير علاجي أسرع من المعتاد مقارنة بفقر الدم اللاتنسجي على العلاج الأولي بالكورتيكوستيرويدات. لاحظ Gurman نفس الشيء ، ولاحظنا أيضًا هذا التأثير في حالة واحدة ، حيث تطور ابيضاض الدم الليمفاوي الحاد بعد 3 أشهر. هذه الاستجابة السريعة لقلة الكريات الشاملة للعلاج بالكورتيكوستيرويدات وحدها تختلف بشكل ملحوظ عن نقص الاستجابة المعتاد في حالات فقر الدم اللاتنسجي الأخرى. وتجدر الإشارة إلى أنه تم وصف تحول مماثل لسرطان الدم في فقر الدم اللاتنسجي الناجم عن البنزين والكلورامفينيكول.

أعراض فقر الدم اللاتنسجي المكتسبة

وصف نيومان وآخرون 14 طفلاً يعانون من قلة الكريات الشاملة مجهول السبب ولاحظوا أنه بالإضافة إلى العلامات الرئيسية الثلاثة - فقر الدم والحمى والفرفرية ، هناك علامات سلبية مهمة ، أي عدم تضخم الكبد والطحال ، واعتلال العقد اللمفية ، وقرحة الفم واليرقان. ومع ذلك ، يمكن ملاحظة فرفرية الغشاء المخاطي للفم ونزيف من اللثة. في بعض الأحيان قد يكون هناك اعتلال عقد لمفية التهابي مرتبط بالإنتان الموضعي.

إذا كان الطفل يطور بولًا أحمر ، فيجب افتراض تطور بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية.

التشخيص المختبري

Aminaciduria ، الذي لوحظ في حوالي نصف المرضى الذين يعانون من الشكل الدستوري ، غائب ولا يوجد تأخر في عمر العظام.

أكثر من نصف المرضى البالغين الذين يعانون من هذا المرض يعانون من قلة اللمفاويات ونقص سكر الدم مع مستويات IgG غير الطبيعية.

{!LANG-d357b74e578267ddd72d092b11537ed5!}{!LANG-e2009804fddc9e34f9984125ba8e370e!}

{!LANG-32851d89411a118ee6565a5d7b8ffce3!}

{!LANG-1a9634c263c7fc6ce7481568a833ba59!}

علاج

{!LANG-3910c97706eed6d02782b0772df01e0d!}

{!LANG-86fc8b9b643e04289d5036ed52a22f54!}{!LANG-98af28f458ee9a6cfebc43a6b42b21b4!}

{!LANG-2ab9f717a328f0d8c9286581c5ef9b2b!}

{!LANG-fa1c71f1ad2c46161792c5648e02010a!}

{!LANG-532a7819240d50e4025045cf424ebd31!}

{!LANG-9ecaf4d87f776974380c5a221f73c3fc!}

{!LANG-6539375da8f29049adcd1d838e134dc0!}

{!LANG-54b2ccd9edb6ad663dcec32c175e1d12!}{!LANG-4e5a94a8b759f14380c63914d78b0ac5!}

{!LANG-74e87a5437dca7c9daf52401934f0c88!}{!LANG-775f2b2e33540f2131bda429b6af9d8b!}

{!LANG-c31e598fb55bfff285b5db024086d65a!}{!LANG-60ee3b92b58a995507661e26c2e77674!}

{!LANG-1c6c3de50cff62f04a59fea413ba2f39!}

{!LANG-57ce85f0eafb61ab0e6773eea96e3597!}